利用獸藥典方法對青霉素鉀工業鹽和原料藥的檢測比較

徐嫄，于麗娜，韓寧寧，龔旭昊，王靜文，郝利華，趙暉

(中國獸醫藥品監察所，北京100081)

利用獸藥典方法對青霉素鉀工業鹽和原料藥的檢測比較

徐嫄，于麗娜，韓寧寧，龔旭昊，王靜文，郝利華，趙暉*

(中國獸醫藥品監察所，北京100081)

為了辨別青霉素鉀工業鹽和青霉素鉀原料藥，依據《中國獸藥典》中青霉素鉀的質量標準，對四家青霉素原料藥生產企業提供的4批青霉素鉀工業鹽和4批青霉素鉀原料藥進行了檢測，項目包括性狀、鑒別、吸光度、結晶性、溶液澄清度與顏色、青霉素聚合物、干燥失重、不溶性微粒、酸堿度、有關物質、細菌內毒素、可見異物、無菌和含量測定。結果表明，8批樣品均符合現行獸藥典青霉素鉀標準中各項規定，但結果無法用以區分青霉素鉀工業鹽和青霉素鉀原料藥，提示青霉素鉀的質量標準需進一步完善，以提高對成品藥——注射用青霉素鉀的質量控制。

青霉素鉀；工業鹽；原料藥；中國獸藥典

青霉素是β-內酰胺類抗生素，被廣泛應用于畜禽細菌感染疾病的防治。青霉素工業鹽是青霉素和各種半合成抗生素藥品生產過程中的藥用中間體。青霉素的生產需要經過多次萃取、過濾、結晶、脫色、洗滌和干燥等復雜的工藝過程，最終由青霉素工業鹽得到青霉素鉀原料藥，無菌分裝后得到符合國家藥典標準的產品[1-2]。由此可知，生產過程中藥用中間體及原料藥的質量控制對成品藥的質量至關重要。

國內獸藥市場中曾有直接利用青霉素工業鹽代替青霉素原料藥分裝成注射用青霉素產品的違法現象，并且產品質量參差不齊[3-4]。本實驗以《中國獸藥典》(2010年版)[5]為依據，對四家青霉素原料藥生產企業提供的青霉素鉀原料藥和青霉素鉀工業鹽進行比較，以期對兩者進行辨別，為獸醫行政管理部門執法檢查打擊制售假劣獸藥的非法行為提供技術依據。

1 材料與方法

1.1 標準品與樣品 青霉素對照品，含量93.1%，中國食品藥品檢定研究院(130437-201306)；青霉素系統適用性對照品，中國食品藥品檢定研究院(130606-201202)。青霉素鉀原料藥：企業A(批號：1021301009)，企業B(批號：20081202033)，企業C(批號：101211004)，企業D(批號：120421)。青霉素鉀工業鹽：企業A(批號：1205139-3)，企業B(批號：280113012096)，企業C(批號：231301215)，企業D(批號：1221305141)。

1.2 主要儀器及試劑 Waters 2695高效液相色譜儀，2487紫外檢測器，Waters公司；AX205分析天平，梅特勒公司；Milli Q超純水儀，美國Millipore公司；TU-1901紫外可見分光光度計，北京普析通用儀器有限公司；FT-IR550傅立葉變換紅外光譜儀，美國NICOLET公司；MET-50智能恒溫加熱儀，天大天發科技公司；CX41RF顯微鏡，OLYMPUS；CS101-2電熱鼓風干燥箱，重慶四達公司；SPX-250B-Z生化培養箱，上海博迅實業公司；GWF-8JA微粒分析儀，天津天河分析儀器公司；HTY-601集菌儀，集菌培養器，杭州泰林生物技術設備公司；YB-2型澄明度檢測儀，天津大學精密儀器廠。甲醇(Merck公司，色譜純)；磷酸二氫鉀，冰醋酸(國藥集團，分析純)；液狀石蠟(國藥集團，化學純)；青霉素酶，細菌內毒素工作標準品，鱟試劑，細菌內毒素檢查用水(中國食品藥品檢定研究院)。

1.3 方法 依據《中國獸藥典》(2010年版)中青霉素鉀質量標準，對8批樣品進行檢測。

2 結果

2.1 性狀 8批樣品均為白色結晶性粉末，符合獸藥典規定。實驗中發現，在白熾燈下肉眼可見企業A和D生產的青霉素鉀原料藥和工業鹽均為細膩的結晶性粉末，但原料藥的亮度比工業鹽更高。企業B和C的工業鹽和原料藥顏色基本一致，但工業鹽中的大顆粒更多。2.2 鑒別 依獸藥典鑒別項下(1)和(2)兩個檢驗項目對8批樣品的檢測結果表明：(1)8批樣品在含量測定項下記錄的色譜圖中，主峰的保留時間均與對照品溶液主峰的保留時間一致；(2)8批樣品的紅外吸收測定結果均符合獸藥典規定。

2.3 檢查 對8批樣品進行吸光度、結晶性、溶液澄清度與顏色、青霉素聚合物、干燥失重、不溶性微粒、酸堿度、有關物質、細菌內毒素、可見異物與無菌共10個項目的檢測，均符合獸藥典規定，且無明顯差異。具體結果如下：2.3.1 青霉素聚合物、干燥失重、不溶性微粒、酸堿度、有關物質檢測 結果均符合標準規定，見表1。其中，青霉素聚合物的測定結果均在限度范圍內，但同一企業工業鹽的數值均高于原料藥。不溶性微粒檢測結果顯示，企業A、B和C的工業鹽中10 μm及10 μm以上微粒數含量均高于原料藥。

表1 青霉素聚合物、干燥失重、不溶性微粒、酸堿度、有關物質檢測結果

2.3.2 吸光度測定 在280～325 nm的波長處測定吸光度，吸光度均不大于0.10，在264 nm的波長處均有最大吸收，4批工業鹽測定值均大于4批原料藥，但吸光度值均在0.8～0.88規定范圍內(表2)，以企業A提供樣品為例，其紫外吸收結果見圖1。2.3.3 結晶性檢查 采用偏光顯微鏡法，實驗中稱取適量樣品，分別加1mL液狀石蠟使晶粒浸沒其中，由于晶體具有光學各向異性，在偏光顯微鏡下觀察呈現雙折射和消光位的晶體光學性質。通過顯微鏡放大觀察，四家企業的工業鹽中長度在200 μm以上的晶體顆粒均多于原料藥。結果見圖2。

表2 吸光度測定264 nm處最大吸收值

圖1 企業A樣品的紫外吸光度測定

2.4 含量測定 標準規定青霉素鉀含量按干燥品計算，不得少于96.0%。利用高效液相色譜法測定

8批供試品含量，經計算含量均符合規定，結果見表3。

圖2 結晶性檢查結果

企業樣品含量/%A原料藥100.9工業鹽99.5B原料藥100.3工業鹽100.0C原料藥100.1工業鹽100.2D原料藥100.5工業鹽100.7

3 討論

依據《中國獸藥典》(2010年版)中青霉素鉀的質量標準對四家青霉素原料藥生產企業提供的青霉素鉀工業鹽和青霉素鉀原料藥進行檢測，結果均符合規定；但檢測結果無法用以區分青霉素鉀工業鹽和青霉素鉀原料藥。錢志平[3]在1995年曾指出青霉素工業鹽的性狀、雜質含量、無菌、澄明度等控制項目無法達到藥用青霉素標準。但是，隨著生產技術水平的提高，青霉素聚合物、含量、有關物質、無菌、細菌內毒素等質量控制關鍵項目，依照現有標準和限度已無法對青霉素鉀工業鹽和原料藥加以區分。

工業鹽作為藥用中間體，不同企業在生產中，質量控制標準可能略有差異。在青霉素生產過程中，脫色和洗滌等工藝可以提高產品透明度、降低雜質含量，且脫色中活性炭的粒度大小和濾速控制均會對產品外觀性質產生影響[6]。本實驗的上述發現說明青霉素鉀工業鹽和原料藥在性狀、顆粒大小、不溶性微粒、聚合物及吸光度等方面存在差異，但由于樣品數量有限、企業之間生產工藝及不同批次產品之間可能存在不同，需要檢測更多樣品才能核實、確認兩者的“差異點”；另外，可根據藥物的性質和生產工藝特點，尋找其他方法對兩者進行鑒別。張秀英等[7]曾利用色差計對注射用青霉素溶液進行比較；曹艷玲[8]和楊井蘭[9]等應用氣相色譜法分別測定了青霉素鉀和青霉素鈉中正丁醇、乙酸乙酯和乙酸丁酯等殘留溶媒；劉廣楨等[10]應用X射線衍射分析方法對注射用青霉素鈉進行分析鑒別。因此，為保證成品藥的質量安全，建議對現行控制標準和限度進行修訂或制定新的控制項目，以區分青霉素鉀工業鹽和原料藥。

[1] 吳國員，查舜行. 青霉素生產概述[J]. 上海醫藥情報研究，1997，45(2)：26-33.

[2] 張翼飛. 青霉素提煉新工藝在青霉素G生產過程中的應用[J]. 科技視界，2010，8，37-38.

[3] 錢志平. 淺談青霉素工業鹽的辨別[J]. 中國獸藥雜志，1995，29(1)：37-38.

[4] 侯及波，包溫奎. 獸醫注射用青霉素鉀質量檢測[J]. 青海畜牧獸醫雜志，2001，31(3)：25.

[5] 中國獸藥典委員會. 中華人民共和國獸藥典[S]. 二〇一〇年版. 北京：中國農業出版社，2011：121-122.

[6] 趙素霞，劉建輝，紀愛民，等.青霉素生產中活性炭粒度與濾速的關系探討[J]. 河北化工，2011，34(6)：25-28.

[7] 張秀英，陸連壽. 色差計在注射用青霉素溶液顏色判定中的應用[J]. 中國獸藥雜志，2010，44(2)：29-30.

[8] 曹艷玲，劉學良. 頂空氣象色譜法測定注射用青霉素鈉中殘留溶媒[J]. 黑龍江醫藥，2007，20(4)：302-303.

[9] 楊井蘭，李新華. 氣相色譜法測定青霉素鉀鹽殘留溶媒[J]. 黑龍江醫藥，2005，18(2)：34-35.

[10]劉廣楨，胡文紅，楊娜. 注射用青霉素鈉的X射線衍射分析[J]. 中國現代應用藥學，2011，28(1)：76-78.

(編輯：李文平)

Tests Comparing of Benzylpenicillin Potassium Industry Salt and Benzylpenicillin Potassium Active Pharmaceutical Ingredient by Methods in Chinese Veterinary Pharmacopoeia

XU Yuan，YU Li-na，HAN Ning-ning，GONG Xu-hao，WANG Jing-wen，HAO Li-hua，ZHAO Hui*

(ChinaInstituteofVeterinaryDrugControl，Beijing100081，China)

In order to distinguish between benzylpenicillin potassium industry salt and benzylpenicillin potassium active pharmaceutical ingredient, 4 bathes of industry salt samples and 4 bathes of active pharmaceutical ingredient samples offered by 4 different veterinary drug manufacturers respectively were identified according to quality standards in Chinese Veterinary Pharmacopoeia 2010 version. Results of those 8 batches of samples were all in compliance with the standards, however, finding no distinguish differences between industry salt and active pharmaceutical ingredient, which might indicate that quality standard of benzylpenicillin potassium need to be improved in order to enhance quality control of the finished drug-benzylpeninicillin potassium for injection.

benzylpenicillin potassium；industry salt；active pharmaceutical ingredient；Chinese Veterinary Pharmacopoeia

徐嫄，碩士，從事抗生素檢驗及檢測方面工作。

2015-11-14

A

1002-1280 (2016) 01-0056-05

S859.79