骨橋蛋白（OPN）在子癇前期患者胎盤組織中的表達及作用分析

張新閣

?

骨橋蛋白（OPN）在子癇前期患者胎盤組織中的表達及作用分析

張新閣

目的 探析骨橋蛋白（OPN）在子癇前期患者胎盤組織中的表達及作用。方法 選擇我院產科2013年1月～2014年12月收治75例子癇前期住院分娩產婦及75例健康產婦進行研究，將其作為研究組和對照組，研究組30例為輕度PE（輕度組）、45例為重度PE（重度組），用免疫組織化學方法檢測兩組胎盤組織中OPN表達情況并比較。結果 研究組和對照組均存在明顯OPN表達，以胎盤絨毛滋養細胞胞膜、胞質以及胎盤毛細血管內皮細胞為主要表達部位；在OPN免疫反應產物吸光度方面，重度組OPN免疫反應產物吸光度最低，對照組最高，三組間兩兩比較均有統計學意義（P＜0.05）。結論 OPN參與子癇前期發病，且在子癇前期患者胎盤組織中表達明顯減弱，但到底是PE病因還是疾病結果有待深入研究。

OPN；子癇前期；胎盤組織；表達

子癇前期（preeclampsia，PE）為妊娠期特有多系統疾病，對母嬰健康有較大危害。該病發病率在5%左右，為導致圍生期死亡主要并發癥之一［1］。PE主要臨床表現為母體綜合征（蛋白尿、高血壓，伴或不伴有多器官系統損傷），部分孕婦還會伴有胎兒綜合征（胎兒窘迫、胎兒生長受限），以致圍產兒患病率、死亡率升高。骨橋蛋白（osteopontin，OPN）為多功能細胞因子及黏附蛋白，在介導細胞分化、遷移、黏附、增殖、信號轉導、免疫調節、炎癥及對感染性疾病免疫能力方面作用重大［2］。本文以我院產科收治的75例子癇前期住院分娩產婦及75例健康產婦進行研究，探析骨橋蛋白（OPN）在子癇前期患者胎盤組織中表達及作用，現報道如下。

1　資料與方法

1.1一般資料

1.1.1納入標準（1）符合第七版《婦產科學》［3］中PE診斷標準；（2）自愿加入研究。

1.1.2排除標準（1）合并糖尿病與高血壓者；（2）合并免疫系統疾病者；（3）合并肝腎、心臟功能障礙者。

1.1.3分組資料選擇我院產科2013年1月～2014年12月收治的子癇前期住院分娩產婦75例作為研究組，其中30例為輕度PE、45例為重度PE。另從同期住院分娩健康產婦中隨機抽取75例作為對照組。研究組年齡在22～31歲，平均（28.9±4.0）歲。孕周在34～41周，平均（37.7±1.8）周。對照組年齡在23～30歲，平均（28.7±3.8）歲。孕周在33～40周，平均（37.6±1.7）周。兩組年齡、孕周的比較無顯著差異（P＞0.05），具有可比性。

1.2方法

產婦娩出胎盤后避開鈣化、壞死、出血部位取3～4塊胎盤中央絨毛豐富部位母體面胎盤組織，大小在1.0 cm×1.0 cm×1.5 cm，生理鹽水沖洗并置于液氮中，過夜后保存在-80℃溫度下。另取1.0 cm×1.0 cm×1.5 cm新鮮胎盤置于4%多聚甲醛中固定，用于免疫組化測定。胎盤組織OPN蛋白表達用SP法（免疫組織化學方法）檢測：4%多聚甲醛固定的小塊胎盤組織行常規脫水、透明、石蠟包埋后切片，厚度5μm，每個組織塊取3張。鼠抗OPN單克隆抗體室溫孵育切片過夜；生物素化兔抗鼠IgG室溫孵育1h；以DAB/H2O2顯色，之后蘇木精輕度復染。抗體稀釋液替代一抗，行陰性對照，反應呈陰性。光學顯微鏡下選取5個高倍視野（×400）觀察照相，測定切片OPN免疫反應產物的吸光度值。比較兩組胎盤組織中OPN表達情況，包括部位及表達水平等。

1.3統計學方法

2　結果

研究組和對照組均存在明顯OPN表達，以胎盤絨毛滋養細胞胞膜、胞質以及胎盤毛細血管內皮細胞為主要表達部位；在OPN免疫反應產物吸光度方面，重度組OPN免疫反應產物吸光度為（0.33±0.06），輕度組為（0.62±0.05），對照組為（0.98±0.09），重度組OPN免疫反應產物吸光度最低，對照組最高，三組間兩兩比較均有統計學意義（P＜0.05）。

3　討論

近百年來國際醫學界對PE病因形成多種學說，包括免疫學說、胎盤血管損傷學說、基因遺傳學說、凝血與纖溶系統失調學說、滋養層淺表植入學說、前列腺素系統學說、腎素-血管緊張素-醛固酮學說等［4］。近年，學者更傾向于認同滋養層淺表植入學說，即為滋養細胞功能障礙引發PE［5］。原因在于有病理生理學研究顯示，滋養細胞分化異常導致浸潤表淺、胎盤淺著床、螺旋動脈重鑄失敗、過度炎性反應、血管內皮細胞損傷等為PE特征性病理生理變化。

有臨床研究證實［6］，OPN為影響子宮胚胎微環境重要因素，其在胎盤上及滋養細胞中都有表達，與整合素受體結合，參與調節絨毛侵入、胎盤形成、介導細胞遷移、母胎界面免疫調節等過程，與子癇前期發病有密切關系。OPN為重要細胞外基質結構組分，富含精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸三肽序列，在各種組織及體液中廣泛存在，具多種生物學活性。為明確OPN在子癇前期發病機制中作用，本次以我院患者進行研究，比較不同程度子癇前期患者及正常孕婦胎盤組織中OPN蛋白表達情況。結果顯示，OPN蛋白在兩組胎盤組織中均表達，且以胎盤絨毛滋養細胞胞質、胞膜及胎盤毛細血管內皮細胞為主。且PE組患者水平明顯低于對照組，PE組中則是重度低于輕度，提示隨著疾病的發生及發展，胎盤中OPN蛋白表達明顯減弱。由此我們推測胎盤組織中OPN低表達與PE發病有著重要聯系，OPN表達的降低會改變子宮-胎盤微環境，信號轉導途徑也會受到直接影響［7］，從而引發母胎界面免疫失衡，導致滋養細胞侵襲力不足與螺旋動脈重鑄失敗，胎盤淺著床，最終引發PE。此外，OPN低表達還可能通過打破MMPs/TIMPs平衡，引發過度炎癥反應誘導PE發生。國外有研究指出［8］，正常妊娠過程中，OPN對滋養層生長及侵入的調節過程復雜，而葡萄胎、胎兒生長受限、自然流產及子癰前期等妊娠相關疾病中該種調節被改變，與本次研究保持一致，但OPN低表達到底是PE病因還是疾病結果有待進一步研究。

綜上，OPN在子癇前期患者胎盤組織中表達明顯減弱，且參與PE發病，OPN低表達到底是PE病因還是疾病結果有待進一步研究。

［1］夏俊霞，喬福元，蘇放明，等. 子癇前期患者胎盤骨橋蛋白的表達及意義［J］.華中科技大學學報（醫學版），2010，39（2）：184-188.

［2］夏俊霞，喬福元，吉瓊梅，等. 骨橋蛋白在缺氧對滋養細胞侵襲力影響機制中的作用［J］. 華中科技大學學報（醫學版），2012，41（4）：431-435.

［3］樂杰. 婦產科學［M］. 第7版. 北京：人民衛生出版社，2008：92-93.

［4］徐亞玲，常穎，陳敘. 子癇前期預測指標的臨床應用研究進展［J］.國際婦產科學雜志，2016，43（1）：11-14.

［5］李滿超，何志明，周祎，等. 骨橋蛋白在體重不一致性雙胎胎盤中的表達［J］.中國產前診斷雜志（電子版），2013，5（3）：14-20.

［6］謝暢，穆飆，趙永聚，等. 樂至黑山羊OPN基因多態性及其與胎盤效率的相關性研究［A］.//第十六次全國動物遺傳育種學術討論會暨紀念吳仲賢先生誕辰100周年論文集［C］. 2011：387.

［7］夏俊霞，喬福元，蘇放明. 子癇前期患者胎盤骨橋蛋白及整合素ανβ3的表達及意義［J］. 華西醫學，2010，25（2）：322-325.

［8］沈瑤，林建華. 子癇前期胎盤因素在胎兒生長受限中的作用［J］.現代婦產科進展，2010，19（1）：59-62.

The Expression and Function of Osteopontin （OPN） in Placenta Tissue of Patients with Preeclampsia

ZHANG Xinge Department of Pathology，Central Hospital of Zhumadian City，Zhumadian He'nan463000，China

Objective To study the expression and function of osteopontin（OPN） in placenta tissue of patients with preeclampsia. Methods 75 cases of pregnant women with preeclampsia admitted into our hospital from January 2013 to December 2014 and 75 healthy women were selected as the research object，as the study group and the control group，30 cases in the study group were mild PE （mild group），45 cases were severe PE （severe group）. The expression of OPN in placenta tissue of the two groups was detected and compared by immunohistochemical method. Results Therewere obvious expression of OPN of the two groups and the cell membrane of placental trophoblast cells，cytoplasm and placental capillary endothelial cells were the mainly expressing parts. From the aspect of absorbtivity of immune response of OPN，the absorbtivity of OPN immune reaction product of the severe group was the lowest while the control group was highest. The contrast differences among the three groups were statistically signifcant （P＜0.05）. Conclusion OPN is involved in the pathogenesis of preeclampsia，and its expression in placenta of patients with preeclampsia decreases signifcantly，but further study is needed to confrm whether the results are caused by PE or disease.

OPN，Preeclampsia，Placenta tissue，Expression

R714.245

A

1674-9308（2016）18-0035-02

10.3969/j.issn.1674-9308.2016.18.022

河南省駐馬店市中心醫院病理科，河南 駐馬店 463000