生脈注射液與常用輸液配伍穩(wěn)定性研究

馮 珺 曹佳薇 姚 君 周 峰 蔡鑫君 倪堅軍

生脈注射液與常用輸液配伍穩(wěn)定性研究

馮 珺 曹佳薇 姚 君 周 峰 蔡鑫君 倪堅軍

生脈注射液；輸液配伍；穩(wěn)定性

生脈注射液是由紅參、麥冬、五味子3種中藥經(jīng)提取制成的制劑，具有益氣養(yǎng)陰、復(fù)脈固脫的功效，廣泛用于冠狀動脈粥樣硬化性心臟病、心力衰竭、休克、病毒性心肌炎、急性心肌梗死、腦梗死、腦出血、新生兒缺氧缺血性腦病等的治療及輔助治療[1]。按生脈注射液說明書要求，其臨床應(yīng)用時須與5%葡萄糖注射液（GS）250mL稀釋后靜脈給藥。考慮到與5%葡萄糖配伍不適用于糖尿病患者，因此我們從臨床實際出發(fā)，模擬臨床用藥情況，考察生脈注射液在5%GS和0.9%氯化鈉注射液（NS）中的配伍穩(wěn)定性，主要觀察其澄明度、微粒及含量變化，為臨床安全、合理應(yīng)用本品配伍提供依據(jù)。生脈注射液中含有8種皂苷和1種木脂素，由于人參皂苷Rg1屬于原人參三醇型，是生脈注射液中含量最高、活性最確切的主要藥效成分[2]。因此，本實驗選擇人參皂苷Rg1為生脈注射液研究的標(biāo)志物。

1 儀器與試劑

Agilent1100液相色譜儀；分析天平（賽多利斯科學(xué)儀器北京有限公司）；KQ-50E型超聲清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）；gwf-5型微粒分析儀（天津天河儀器有限公司）。人參皂苷Rg1對照品（中國藥品生物制品檢定所，批號110703-201128）；生脈注射液（江蘇蘇中藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司，批號13100904）。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件[3]色譜柱：Agilent zorbax SB-C18柱（250mm×4.6mm，5μm)；流動相：V乙腈:V水=23:77；檢測波長：203nm；柱溫：40℃；流速：1.0mL/min；進(jìn)樣量：20μL。在此色譜條件下，空白樣品和人參皂苷Rg1對照品及含藥樣品色譜圖見圖1。

圖1 人參皂苷Rg1的HPLC色譜圖

2.2 對照品溶液制備 精密稱取人參皂苷Rg1對照品適量，置于10mL容量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度,搖勻，即得。

2.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線制備 精密吸取對照品溶液適量，置10mL量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，配制成系列標(biāo)準(zhǔn)溶液，按“2.1”項下色譜條件進(jìn)行測定，以峰面積（A）為縱坐標(biāo)，以藥物質(zhì)量濃度（C）為橫坐標(biāo)，得線性回歸方程：A=2682.0C+211.64，r=0.999。結(jié)果表明，人參皂苷Rg1質(zhì)量濃度在0.0519～0.9264mg/mL內(nèi)與峰面積之間線性關(guān)系良好。

2.4 精密度試驗 取對照品溶液按“2.1”項下色譜條件連續(xù)進(jìn)樣5次，計算峰面積RSD為2.7%，表明精密度良好。

2.5 回收率試驗 采用加樣回收法。精密量取樣品2mL，置5mL量瓶中，分別加入對照品溶液1.5mL、2.0mL和2.5mL，加甲醇至刻度，搖勻，即得。分別取20μL注入液相色譜儀，測定，計算人參皂苷Rg1的回收率，平均回收率為99.3%，RSD為0.92。

2.6 配伍溶媒對含量測定的影響 由于對照品溶液采用甲醇作為溶劑，而樣品中人參皂苷Rg1含量測定時，采用配伍液過濾后直接進(jìn)樣，因此需比較兩種不同溶媒對人參皂苷Rg1含量的影響。精密稱取三份人參皂苷Rg1對照品，置于10mL容量瓶中，分別加入甲醇、0.9%NS、5%GS溶解并稀釋至刻度,搖勻，分別取20μL注入液相色譜儀，平行測定3次。結(jié)果顯示，采用注射液溶媒作為人參皂苷Rg1的溶劑對含量測定基本沒有影響，見表1。

表1 人參皂苷Rg1在不同溶劑中的平均峰面積（±s）

表1 人參皂苷Rg1在不同溶劑中的平均峰面積（±s）

?

2.7 配伍穩(wěn)定性考察

2.7.1 配伍溶液制備 操作人員在超潔凈臺將50mL生脈注射液分別加入到0.9%氯化鈉注射液250mL和500mL，以及5%葡萄糖注射液250mL和500mL中，搖勻，分別于室溫下不避光放置。

2.7.2 外觀性狀和不溶性微粒測定 由于本實驗需要考察生脈注射液在各種輸液中配伍后的不溶性微粒變化，因此需排除輸液本身及注射器對微粒數(shù)的影響。微粒測定見表2～3。

表2 4種輸液和生脈注射液微粒檢測結(jié)果（個/mL）

表3 4種輸液用注射器抽取后微粒檢測結(jié)果（個/mL）

按“2.7.1”制備的配伍溶液在5h內(nèi)，無沉淀及混濁出現(xiàn)，也無明顯顏色變化。用微粒分析儀分別在1、3、5h測定配伍溶液后的不溶性微粒數(shù)，見表4。

表4 生脈注射液與兩種輸液配伍后不溶性微粒變化（個/mL）

依據(jù)2010年版《中國藥典》（一部）附錄中有關(guān)微粒的規(guī)定，每毫升中含10μm以上的微粒不得超過20粒，含25μm以上的微粒不得超過2粒。表2中數(shù)據(jù)表明，大輸液及生脈注射液的不溶性微粒數(shù)量均符合規(guī)定。而表3數(shù)據(jù)表明，注射器的應(yīng)用對于輸液的不溶性微粒幾乎沒有影響。

由表4數(shù)據(jù)可知：（1）生脈注射液與5%葡萄糖注射液配伍后微粒數(shù)明顯比與0.9%氯化鈉注射液配伍后的微粒數(shù)少；（2）生脈注射液與5%葡萄糖注射液配伍3h后微粒數(shù)明顯增加，5%葡萄糖注射液的溶媒量越大微粒數(shù)越少；（3）生脈注射液與0.9%氯化鈉注射液配伍3h后微粒數(shù)明顯增加，0.9%氯化鈉注射液的溶媒量越大微粒數(shù)越少；（4）只有生脈注射液與5%葡萄糖注射液配伍后含25μm及25μm以上的微粒符合《中國藥典》的限量規(guī)定。

2.7.3 人參皂苷Rg1含量變化的測定 取“2.7.1”項下用0.9%氯化鈉注射液250mL和5%葡萄糖注射液250mL制備的配伍溶液，經(jīng)0.22μm的水膜過濾后，于1、3、5h后進(jìn)樣測定，平行做3份，分別以1h時的藥物含量為100.0%，經(jīng)回歸方程計算出各時間點配伍溶液中人參皂苷Rg1的相對含量。見表5。

由表5可見，（1）生脈注射液與0.9%氯化鈉注射液250mL注射液配伍5h內(nèi)比較穩(wěn)定，人參皂苷Rg1的含量基本不變；（2）生脈注射液與5%葡萄糖注射液配伍1h后，人參皂苷Rg1的含量明顯下降。

表5 生脈注射液與不同輸液配伍后各時間點人參皂苷Rg1含量變化（%）

3討論

根據(jù)表2、表3的結(jié)果，大輸液和生脈注射液其本身的不溶性微粒數(shù)是符合藥典要求的，而注射器的抽取輸液對于不溶性微粒的數(shù)目沒有影響，說明操作環(huán)境及操作過程可能對微粒數(shù)造成影響。而表4的研究數(shù)據(jù)表明，生脈注射液按照臨床實際情況配置成輸液后，兩種輸液的微粒均不符合標(biāo)準(zhǔn)。從理論上說，中藥注射液簡單稀釋后在輸液中微粒數(shù)也應(yīng)符合標(biāo)準(zhǔn)，但輸液中加入生脈注射液后不溶性微粒卻大幅增加，這可能的原因是中藥注射液的成分比較復(fù)雜，一般會含有少量的鞣質(zhì)。而鞣質(zhì)在水中成膠體狀態(tài)，當(dāng)加入電解質(zhì)后可能會產(chǎn)生鹽析，這些鹽類使得輸液中的微粒數(shù)增加。因此，生脈注射液與0.9%氯化鈉注射液配伍后的微粒數(shù)會比與5%葡萄糖注射液配伍后的微粒數(shù)多。二是輸液配伍的操作過程及操作環(huán)境，再加上貯藏環(huán)境如時間、溫度、濕度等原因均可導(dǎo)致微粒增加。

由于中藥注射劑存在與溶媒配伍后微粒數(shù)不符合《中國藥典》的要求以及臨床不良反應(yīng)較多[5-6]，因此生脈注射液應(yīng)在明確的臨床指證下謹(jǐn)慎適用。

本研究結(jié)果顯示，在5h內(nèi)不避光的環(huán)境下，生脈注射液在0.9%氯化鈉注射液和5%葡萄糖注射液中的澄明度、顏色無明顯變化，也沒有發(fā)生渾濁或沉淀。雖然已經(jīng)有生脈注射液與5%葡萄糖注射液配伍穩(wěn)定性的考察報道，但是該文獻(xiàn)并沒有對配伍后的含量變化進(jìn)行測定[7]。根據(jù)表5可知，生脈注射液與0.9%氯化鈉注射液配伍后，5h內(nèi)人參皂苷Rg1含量基本不變；而與5%葡萄糖注射液配伍后，1h后含量開始下降。

生脈注射液中含有9種成分[8]，本研究只是對其中的一種Rg1進(jìn)行了考察，具有一定的局限性。本研究通過對生脈注射液與兩種輸液配伍后的澄明度、不溶性微粒以及含量變化的考察，與藥品說明書推薦的用法相吻合，建議作為首選配伍方案。生脈注射液與5%葡萄糖注射液250mL配伍1h后，人參皂苷Rg1的含量明顯下降，建議配伍后應(yīng)在1h內(nèi)輸注完畢。

［1］張曉明，劉亞.生脈注射液的藥理作用機制及臨床應(yīng)用［J］.醫(yī)學(xué)綜述，2013，19（15）：2813-2816.

［2］詹淑玉，邵青，李正，等.生脈注射液中人參皂苷Rg1，Rb1在心肌缺血大鼠體內(nèi)的藥動學(xué)-藥效學(xué)結(jié)合研究［J］.中國中藥雜志，2014，4（39）：1300-1305.

［3］王海英.生脈注射液不良反應(yīng)的臨床表現(xiàn)及預(yù)防措施［J］.中國藥房，2010，21（16）：1505-1506.

［4］國家藥典委員會.中華人民共和國藥典:一部［S］.2010年版.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：附錄58-59.

［5］田小芹，許群芬，龔亞林.生脈注射液致藥物不良反應(yīng)43例文獻(xiàn)分析［J］.中國藥業(yè)，2004，13（10）：56.

［6］趙洋，趙雪梅，龍揚，等.344例生脈注射液致不良反應(yīng)/事件分析［J］.中國藥房，2013，24（12）：1127-1128.

［7］馬玉蓉，許群芬.不同劑量生脈注射液與5%葡萄糖注射液配伍的穩(wěn)定性研究［J］.中國藥業(yè)，2007，16（14）：29.

［8］王進(jìn)，張平.HPLC法同時測定生脈注射液中9種成分［J］.中成藥，2013，35（3）：508-512.

（收稿：2015-07-08 修回：2015-08-10）

浙江省中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會科研項目（No.2012LY017）

浙江省中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院西藥房（杭州 310003）

倪堅軍，Tel：（0571）56109701；E-mail：997072943@qq.com