MicroRNA與食管癌化療關(guān)系的研究進(jìn)展

吳　波　楊鯨蓉　朱　捷.南京軍區(qū)福州總醫(yī)院急診科，福建福州 35005；.南京軍區(qū)福州總醫(yī)院胸心外科，福建福州　35005

MicroRNA與食管癌化療關(guān)系的研究進(jìn)展

吳波1楊鯨蓉2▲朱捷2
1.南京軍區(qū)福州總醫(yī)院急診科，福建福州 350025；2.南京軍區(qū)福州總醫(yī)院胸心外科，福建福州350025

食管癌是我國(guó)常見(jiàn)的消化系統(tǒng)惡性腫瘤之一?；熓鞘彻馨┲委煹闹匾侄危煰熜Т嬖趥€(gè)體差異，且化療過(guò)程中常遇到耐藥情況。microRNA（miRNA）是一類(lèi)內(nèi)源性非編碼蛋白短鏈RNA，參與調(diào)控細(xì)胞增殖、分化、凋亡、耐藥和侵襲轉(zhuǎn)移等多種生物學(xué)行為。研究表明，miRNA可通過(guò)多種不同的機(jī)制參與調(diào)解食管癌對(duì)化療敏感性。miRNA可成為預(yù)測(cè)食管癌化療療效、判斷預(yù)后的生物標(biāo)志物，并有望成為食管癌化學(xué)治療中的新靶點(diǎn)。本文就miRNA在食管癌化療中的研究進(jìn)展作一綜述。

食管癌；microRNA；化療

［Abstract］Esophageal cancer is one of the most common malignant tumors in digestive system in China.Chemotherapy is an important method in the treatment of esophageal cancer，but there are individual differences in the efficacy of chemotherapy.Drug resistance is often encountered in the process of chemotherapy.MicroRNA（miRNA）is a kind of endogenous non-coding protein short chain RNA，which regulates many tumor biological behaviors，such as cell multiplication，differentiation，apoptosis，drug resistance，invasion and metastasis.Studies suggest that miRNA may be involved in regulating the drug sensitivity of esophageal cancer to chemotherapy through different mechanisms.miRNA has the potential to be a biomarker for predicting prognosis of esophageal cancer and efficacy of chemotherapy.MiRNA is expected to be a new target in the treatment of esophageal cancer.This article reviews the research progress of miRNA in the chemotherapy of esophageal cancer.

［Key words］Esophageal cancer；MicroRNA；Chemotherapy

我國(guó)食管癌發(fā)病率高，居各類(lèi)惡性腫瘤第五位。在我國(guó)食管鱗癌最為常見(jiàn)。食管癌的治療方式包括外科治療、放射治療、化學(xué)治療和綜合治療。其中，化療在圍術(shù)期輔助治療及晚期食管癌姑息治療中占有重要地位。然而，并不是所有食管癌患者均能從化療中獲益。microRNA（miRNA）是一類(lèi)具有內(nèi)源性、功能性的非編碼RNA，長(zhǎng)17～25個(gè)核苷酸序列。miRNA在食管癌的發(fā)生、發(fā)展、侵襲和轉(zhuǎn)移中發(fā)揮重要作用。miRNA還參與調(diào)解化療敏感性，有可能成為食管癌治療的新靶點(diǎn)，并可用于預(yù)測(cè)食管癌化療療效。

1　miRNA與食管癌

miRNA在食管癌中的表達(dá)存在差異，并且能調(diào)節(jié)食管癌的增殖、凋亡、侵襲和遷移等生物學(xué)特性，表明miRNA參與了食管癌發(fā)生和發(fā)展等病理過(guò)程。在食管癌組織中上調(diào)的miRNA有miR-21、miR-16、miR-25、miR-92c、miR-155、miR-208、miR-214、miR-223、miR-296、miR-200b、miR-let-7c、miR-145等；相反，大量低表達(dá)的miRNA在食管癌中可能存在保護(hù)作用，如miR-133a、miR-138、miR-143、miR-195、miR-200b、miR-203、miR-429、miR-375和miR-625等［1-4］。深入研究探討miRNA和食管癌之間的關(guān)系，有助于食管癌的診斷、治療及預(yù)后判斷，具有實(shí)際的臨床應(yīng)用價(jià)值。食管癌組織中高表達(dá)miR-21、miR-30e、miR-103、miR-200c、miR-107、miR-198和miR-145等或低表達(dá)miR-138、miR-375、miR-145和miR-302b等，患者預(yù)后往往較差［5-8］。具有治療潛力的miRNA可成為食管癌治療的潛在靶點(diǎn)，為食管癌的治療提供新思路。

2　miRNA與食管癌細(xì)胞化療敏感性的關(guān)系

化療是治療食管癌的主要方法之一。目前常用的治療食管癌的一線(xiàn)化療藥物有：順鉑、氟尿嘧啶、伊立替康、紫杉醇和奧沙利鉑等。目前，關(guān)于食管癌化療與miRNA的研究主要為體外食管癌細(xì)胞系的研究，miRNA可通過(guò)多種不同的作用機(jī)制影響化療藥物對(duì)食管癌的抗腫瘤作用。

目前研究表明和食管癌化療敏感性相關(guān)的miRNA有miR-31、miR-125a-5p、miR-96、miR-483、mir-193a-3p、mir-let-7g/i、miR-330-5p、miR-634、miR-499、miR-223、miR-483、miR-214、miR-133a/b、mir-505、miR-99b、miR-451、miR-145和 miR-200c等［9-15，17-25］。但同一腫瘤細(xì)胞，不同的化療藥物耐藥差異表達(dá)的miRNA不一樣；同一化療藥物耐藥，食管癌類(lèi)型不一樣，差異表達(dá)的miRNA也不一樣；同一miRNA，在不同化療藥物耐藥中表達(dá)差異也不一樣。Hummel等［9］比較了順鉑耐藥組、順鉑敏感組、氟尿嘧啶耐藥組、氟尿嘧啶敏感組的食管腺癌細(xì)胞和食管鱗癌細(xì)胞間miRNA的表達(dá)差異，發(fā)現(xiàn)只有2種miRNA（miR-31和miR-125a-5p）在順鉑耐藥組和氟尿嘧啶耐藥組中均存在差異表達(dá)。有趣的是，miR-31-5p在順鉑耐藥的食管腺癌細(xì)胞中表達(dá)下調(diào)，在氟尿嘧啶耐藥的食管腺癌細(xì)胞中miR-125a-5p表達(dá)上調(diào)，而在順鉑抵抗的食管腺癌細(xì)胞和氟尿嘧啶抵抗的食管鱗癌細(xì)胞，miR-125a-5p表達(dá)均受抑制。因此，這為miRNA與食管癌細(xì)胞化療敏感性關(guān)系的研究帶了挑戰(zhàn)，需要對(duì)不同的化療藥物、不同病理類(lèi)型的食管癌進(jìn)行細(xì)分研究。

3　miRNA參與調(diào)節(jié)食管癌細(xì)胞化療敏感性的機(jī)制

miRNA影響食管癌化療敏感性的機(jī)制尚不明確，可能通過(guò)直接作用于靶基因、活化信號(hào)通路、激活線(xiàn)粒體凋亡、藥物外排增加、藥物經(jīng)代謝或解毒的失活等方式參與調(diào)節(jié)食管癌細(xì)胞對(duì)化療的敏感性。不同的miRNA參與調(diào)節(jié)食管癌細(xì)胞化療敏感性的機(jī)制不同。

3.1直接作用于靶基因參與調(diào)節(jié)食管癌細(xì)胞對(duì)化療的敏感性

miRNA可以通過(guò)直接作用于 PSEN1、BCL2、ABCC10、polβ和PARP1等靶基因，通過(guò)靶基因影響食管癌細(xì)胞對(duì)化療的敏感性。mir-193a-3p過(guò)表達(dá)增加食管鱗癌細(xì)胞化療耐藥性。相反，mir-193a-3p下調(diào)降低了食管癌細(xì)胞化療耐藥。通過(guò)小干擾RNA（siRNA）誘導(dǎo)的PSEN1基因抑制與上調(diào)mir-193a-3p作用相似，可抑制食管癌細(xì)胞凋亡。表明，mir-193a-3p通過(guò)下調(diào)PSEN1可引起食管癌的化療耐藥［10］。Wu等［11］研究表明mir-let-7g/i過(guò)表達(dá)顯著抑制食管癌細(xì)胞增殖和促進(jìn)順鉑誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡。耐藥基因ABCC10是一個(gè)mir-let-7g/i直接的有功能的靶基因。熒光素酶報(bào)告基因分析證實(shí)let-7g和let-7i直接與ABCC10的3'UTR相結(jié)合，抑制ABCC10表達(dá)和增強(qiáng)細(xì)胞對(duì)順鉑藥物的敏感性。

Wang等［12］研究表明polβ是miR-499的一個(gè)靶基因。Polβ在調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞對(duì)化療敏感性中起重要作用。polβ可增強(qiáng)順鉑抑制細(xì)胞增殖和促進(jìn)細(xì)胞凋亡的功能。Streppel等［13］研究表明增加miR-223表達(dá)，可減少PARP1的表達(dá)，可增加食管腺癌細(xì)胞的化療敏感性。3.2活化信號(hào)通路參與調(diào)節(jié)食管癌細(xì)胞對(duì)化療的敏感性

miRNA還通過(guò)活化信號(hào)通路來(lái)調(diào)節(jié)食管癌細(xì)胞對(duì)化療藥物的敏感性。Bibby等［15］研究表明miR-330-5p在新輔助化放療敏感組和抵抗組中差異表達(dá)最顯著，在抵抗組中，miR-330-5p顯著下調(diào)。miR-330部分調(diào)節(jié)E2F1/pAkt，miR-330低表達(dá)可增加E2F1蛋白表達(dá)和p-Akt水平?；罨疎2F1/p-Akt通路通過(guò)抑制促凋亡蛋白來(lái)提高食管癌細(xì)胞存活。另外增加p-Akt表達(dá)水平可誘導(dǎo)化療和放療反應(yīng)來(lái)提高食管癌細(xì)胞存活和逃逸細(xì)胞死亡［16］。

Hamano等［17］研究顯示，miR-200c的表達(dá)在順鉑耐藥的食管癌細(xì)胞顯著增加。轉(zhuǎn)染anti-mir-200c后，增加了對(duì)順鉑的化療敏感性并促進(jìn)了食管癌細(xì)胞凋亡。免疫印跡顯示，敲除miR-200c的表達(dá)增加了PPP2R1B（蛋白磷酸酶2A的一個(gè)亞基）的表達(dá)，可減少磷酸化Akt的表達(dá)。因此，miR-200c參與食管癌化療耐藥，是通過(guò)Akt信號(hào)通路介導(dǎo)的。

Sugimura等［18］在體外試驗(yàn)中，轉(zhuǎn)染Let-7c后恢復(fù)對(duì)順鉑的敏感性，增加細(xì)胞凋亡率。Let-7c可直接抑制順鉑激活的白介素-6（IL-6）/STAT3 6存活通路。表明let-7通過(guò)IL-6/STAT3通路調(diào)節(jié)食管癌細(xì)胞對(duì)順鉑的敏感性。

3.3其他機(jī)制

miRNA還可能通過(guò)激活線(xiàn)粒體凋亡來(lái)調(diào)節(jié)食管癌細(xì)胞對(duì)化療的敏感性。Fujiwara等［19］研究表明miR-634過(guò)表達(dá)可通過(guò)直接作用于靶基因和線(xiàn)粒體穩(wěn)態(tài)、抗凋亡、抗氧化和細(xì)胞自噬來(lái)激活線(xiàn)粒體凋亡路徑。在食管鱗癌模型中，miR-634過(guò)表達(dá)可增強(qiáng)化療誘導(dǎo)的細(xì)胞毒性。因此逆轉(zhuǎn)miR-634介導(dǎo)的細(xì)胞保護(hù)過(guò)程可提高食管癌化療治療效果。

Tanaka等［20］研究顯示雖然miR-27a/b轉(zhuǎn)染食管癌細(xì)胞后，對(duì)化療敏感性的影響并不顯著，但miR-27a/b轉(zhuǎn)染正常成纖維細(xì)胞上清液中培養(yǎng)的食管癌細(xì)胞對(duì)順鉑的敏感性降低了。轉(zhuǎn)染miR-27a/b的正常成纖維細(xì)胞中α-平滑肌肌動(dòng)蛋白（α-SMA）表達(dá)和轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子（TGF-β）增加。α-SMA是癌癥相關(guān)成纖維細(xì)胞的標(biāo)志物。通過(guò)TGF-β中和抗體，食管癌細(xì)胞的化療敏感性恢復(fù)了。研究結(jié)果表明，miR-27a/b可能通過(guò)誘導(dǎo)正常細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)榘┌Y相關(guān)成纖維細(xì)胞參與食管癌化療抵抗。

此外，miRNA還可能通過(guò)藥物外排增加、藥物經(jīng)代謝或解毒的失活等方式調(diào)節(jié)調(diào)節(jié)食管癌細(xì)胞對(duì)化療的敏感性。miR-483和miR-214的高表達(dá)可能預(yù)示著化療效果不好。miR-483和miR-214的下調(diào)可以增加食管癌細(xì)胞對(duì)P-糖蛋白相關(guān)和P-糖蛋白不相關(guān)的藥物敏感性，并可能誘導(dǎo)阿霉素（ADR）的蓄積和減少ADR的釋放［21］。

4　miRNA與食管癌化療敏感性的臨床研究

miRNA參與食管癌的發(fā)生和發(fā)展，并參與調(diào)節(jié)食管癌細(xì)胞對(duì)化療的敏感性。因此，經(jīng)鑒定有意義的miRNA可成為預(yù)測(cè)食管癌化療療效、判斷預(yù)后的生物標(biāo)志物，并有望成為食管癌化學(xué)治療中的新靶點(diǎn)。

目前關(guān)于miRNA與食管癌化療敏感性的臨床研究主要為預(yù)測(cè)食管癌化療療效和判斷預(yù)后。Skinner等［22］研究顯示mir-505、iR-99b、miR-451、miR-145在食管腺癌化療后病理完全緩解組和非病理完全緩解組中比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。聯(lián)合應(yīng)用這四種miRNA建立預(yù)測(cè)模型，可預(yù)測(cè)食管腺癌化療敏感性。Tanaka等［20］研究分析了接受順鉑為基礎(chǔ)的化療方案的68例食管癌患者，在化療敏感組和抵抗組間有18種miRNA差異表達(dá)。其中，化療抵抗組miR-27a/b高表達(dá)。Sugimura等［18］研究表明在化療前活檢食管癌組織中低表達(dá)let-7b和Let-7c與臨床及病理組織學(xué)上化療反應(yīng)差顯著相關(guān)。let-7c低表達(dá)與預(yù)后差相關(guān)。Hamano等［17］也表明miR-200c的表達(dá)與化療療效（臨床和病理反應(yīng)）顯著相關(guān)。

Chen等［23］對(duì)100例食管癌患者在初始治療前檢測(cè)miR-133a和miR-133b表達(dá)。隨后，所有患者接受紫杉醇為基礎(chǔ)的化療4個(gè)周期，評(píng)估短期治療效果，并進(jìn)行3年的隨訪(fǎng)。研究顯示miR-133a/b均下調(diào)的食管癌患者行紫杉醇為基礎(chǔ)的化療緩解率顯著增高。單變量和多變量Cox分析顯示，miR-133a/b表達(dá)均下調(diào)是食管癌患者預(yù)后的獨(dú)立因素。Tanaka等［24］研究表明miR-200c的高表達(dá)與化療反應(yīng)差顯著相關(guān)。而化療敏感性和miR-21，miR-145及l(fā)et-7c表達(dá)水平之間沒(méi)有顯著關(guān)系。miR-200c高表達(dá)縮短了無(wú)進(jìn)展生存期，多變量分析確定miR-220c表達(dá)是接受新輔助化療的食管癌患者最有價(jià)值的預(yù)后因素。因此，血清miR-200c可預(yù)測(cè)化療反應(yīng)，也可成為食管癌患者接受新輔助化療的患者的獨(dú)立預(yù)后因子。

Wu等［25］分析了在378例接受鉑類(lèi)方案治療的晚期食管鱗癌患者中5種miRNA多態(tài)性與化療反應(yīng)、毒副作用和總體生存率之間的關(guān)系，研究表明miR-146ars2910164與嚴(yán)重的血液學(xué)毒性顯著相關(guān)。mir-196a2rs11614913和miR-125ars12976445 TT基因型與較差的生存率顯著相關(guān)。綜合分析顯示，攜帶兩種不利基因型患者死亡風(fēng)險(xiǎn)增加了4.073倍。因此，miRNA基因多態(tài)性可預(yù)測(cè)晚期接受鉑類(lèi)為基礎(chǔ)化療的食管鱗癌患者的預(yù)后。

由于目前miRNA與食管癌化療敏感性的臨床研究較少，研究樣本量小，研究方法不一，及miRNA多樣性等因素，miRNA與食管癌化療敏感性的臨床研究尚處于起步階段，需要進(jìn)一步的深入研究。

5　總結(jié)

目前miRNA與食管癌化療關(guān)系的研究尚處于起步階段，缺乏足夠的臨床研究。篩選出能準(zhǔn)確預(yù)測(cè)化療療效的miRNA，建立更完善的預(yù)測(cè)模型指導(dǎo)個(gè)體化治療，從而使食管癌患者在化療中獲得最大利益。另外，深入熟悉miRNA在食管癌化療耐藥中的機(jī)制，也可為食管癌化療耐藥提供治療新靶點(diǎn)。

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Advances in research on association between microRNA expression and chemotherapy in esophageal cancer

WU Bo1YANG Jingrong2▲ZHU Jie2
1.Department of Emergency，F(xiàn)uzhou General Hospital of Nanjing Military Command，F(xiàn)ujian Province，F(xiàn)uzhou 350025，China；2.Department of Thoracic and Cardiovascular Surgery，F(xiàn)uzhou General Hospital of Nanjing Military Command，F(xiàn)ujian Province，F(xiàn)uzhou 350025，China

R735.1

A

1674-4721（2016）08（b）-0066-04

2016-04-20本文編輯：趙魯楓）