檢測技術在轉基因食品分析中的應用

張巧苑

（東莞出入境檢驗檢疫局，廣東 東莞 523000）

檢測技術在轉基因食品分析中的應用

The Application of Detection Technology in Genetically Modified Food Analysis

張巧苑

（東莞出入境檢驗檢疫局，廣東 東莞 523000）

轉基因食品又被稱為基因修飾食品，問世以來迅速占據市場份額，在巨大經濟利益背后，其安全問題也成為社會各界關注的焦點，相應的管控法律也相繼出臺。基于此，要保證市場化結構的良性發展，就要建構切實可行的檢測技術框架和監督機制，從而提升整體檢測技術的檢驗水平。

1 轉基因技術的基本原理

基因也叫遺傳因子，是具有遺傳效應的DNA片段，支持著生命的基本構造和性能。其中最重要的是DNA結構，生物體通過遺傳物質的復制、轉錄和翻譯，實現信息的傳遞和表達，正是由于該過程的差異，導致生物出現不同的遺傳性狀，轉基因技術就是在此基礎上建立起來的。利用DNA限制性內切酶和基因克隆等，實現了轉基因項目的發展目標。在轉基因過程中，目標DNA片段被有效分離，直接克隆到細菌等載體的DNA中，從而構建出重組DNA，并將其擴增，同時利用基因槍、化學誘導劑、微注射操作和花粉通道等方式，將啟動子和終止子與目的基因一起轉入植物細胞中，確保轉化成功后，誘導產生完整的植株，再進行一系列的擴種，確保轉基因食品的批量生產[1]。

2 轉基因定量檢測技術的應用路徑

在定量檢測轉基因的過程中，要保證待測分子具有一定的特征，并根據分子特征的選擇相應的定量檢測技術。在轉基因定量檢測技術的具體要求中，不僅要從科研結構中復制外源基因，也要確保基因的含量，確保能對相關基因信息和數據的統籌管理，一定程度上保證定量檢測技術的支撐作用。

（1）傳統定量檢測技術。在分析轉基因定量檢測技術的過程中，不能忽視傳統定量檢測技術的影響和基本作用，其中，定量PCR檢測技術最終目標是精確分析數據，確保定量低檢測限和定量檢測限能符合實際需求，檢測出樣品中的分子復制數量。另外，相關管理人員應選擇合適的轉基因品系特征基因和物種內部參考基因檢測基因成分的含量。

在傳統定量檢測技術過程中，主要是借助光學原理，例如常見的Real-Time PCR可通過觀測熒光的變化，實時監測目標物質生成的量。在該技術應用過程中，標記物主要有熒光探針、分子信標機制和SYBR GreenⅠ。SYBR GreenⅠ的成本在三種標記物中最低，能特異性地標記雙鏈DNA分子。而分子信標機制能實現整體反應的逐漸增大和優化，不僅整體操作成本較低，且靈敏度較高，但兩者的靈敏度都沒有熒光探針靈敏，在利用熒光探針的過程中，能實現測試項目和片段的特異性組合，確保整體信號參數的完整度，也能有效升級整體特異性和靈敏度的整體優化目標。另外，隨著技術結構的發展，在實際項目運行過程中，技術人員要有效認知特異性和淬滅性，并在定量技術結構中滿足自身系統的應用價值。Real-Time PCR是目前較為重要的定量檢測技術。

（2）數字PCR檢測技術。數字PCR檢測技術的發展進程不斷推進，最大的優勢是將分子生物學和統計學結合在一起，且數字PCR技術是在定性PCR技術之后產生的。主要是稀釋樣品后，利用反應孔處理模板分子，特別是在傳統PCR檢測技術的基礎上，能保證熒光信號的反應孔發揮最大的定量作用。

若系統內部的濃度數值較高，則每個反應孔并不是只有一個分子通過，需借助泊松概率分布計算出樣品的濃度和復制數量，該方法是在擴增曲線和定量標準曲線基礎上建立，能綜合分析整體復制數，并分析基因分型、單細胞基因表達等參數結構，實現整體研究領域的升級和系統優化。另外，在數字PCR檢測技術運行過程中，要控制外源基因的復制數量，確保標準物質和絕對定量參數的完整度，并且提高擴增反應的有效性。不僅在農業項目中，數字PCR技術在醫學領域的應用也越來越廣泛。能為臨床應用項目提供有效的技術檢測和診斷，但在轉基因檢測研究機制方面還存在一定問題，主要是由于數字PCR技術并不依賴標準物質定量操作，而是對核算定量集中處理[2]。

（3）新材料輔助定量檢測技術。隨著科學技術的不斷進步，納米技術的應用范圍和推廣機制逐漸得到擴大，不僅能降低檢測中的不穩定性，也能有效提升檢測項目的準確性，而目前，較為新興的新材料主要包括氧化石墨烯（GO）、納米金粒子等。氧化石墨烯（GO）主要是借助化學鍵形成單分子層二維蜂窩狀的氧化結構，能提升技術運行的穩定性和參數管控能力，作為最有效的熒光淬滅介質，能實現淬滅操作，并標定熒光基團。另外，也能有效地結合單鏈DNA分子，實現整體淬滅操作。納米金粒子主要是借助金單質的微小粒子，直徑控制在1～100 nm，形成有效的復合物，并保證光學性質的穩定性。

3 結語

在分析轉基因食品的過程中，要對轉基因食品進行定性分析和集中管控，建立完整的轉基因品評價體系，實現標識制度符合實際需求，提升高通量，以保證其貼合實際需求，完善準確度和靈敏性的管控手段，為基因檢測技術的良性發展奠定堅實基礎。

[1]芮玉奎，黃昆侖，王為民，等.近紅外光譜技術在檢測轉基因油菜籽中芥酸和硫甙上的應用研究[J]光譜學與光譜分析，2016（12）：2190-2192.

[2]陳源樹，李 婷，劉 津，等.轉基因蛋白質GB檢測方法在玉米酒糟粕轉基因成分檢測中的應用性研究[J].糧食與飼料工業，2014（9）：56-58，61.

Zhang Qiaoyuan
(Dongguan Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau, Dongguan 523000,China)

隨著經濟的不斷發展，人們的生活水平在不斷提高，轉基因食品的范圍越來越廣，其安全問題也受到了全社會的關注。本文從轉基因技術的基本原理分析入手，分析傳統定量技術、數字PCR檢測技術和新材料輔助定量檢測技術分析檢測技術在基因食品分析中的應用。

檢測技術；轉基因食品；原理；應用

Along with the continuous development of economy, the people's living standard is improving and the food safety of GMF is more and more wide. This paper analysis the application of traditional quantitative techniques, digital PCR detection technology and new materials assisted quantitative detection technology analysis of genetic technology in food analysis from the basic principles of genetically modified technology.

Detection technology; Genetically modified food; Principle; Application

TS207.3

10.16736/j.cnki.cn41-1434/ts.2016.22.017