◎羅鵬程
(固原市市場監管檢驗檢測中心,寧夏 固原 756000)
食品檢驗中多重PCR技術應用
◎羅鵬程
(固原市市場監管檢驗檢測中心,寧夏 固原 756000)
隨著社會經濟的發展,我國的食品安全問題日益突出。食品安全是關乎國計民生的大事,影響著人們的日常生活和工作健康。近些年,各大媒體相繼報道了食物中毒的新聞事件,細菌污染是食物中毒最主要的原因。國內制定了相關的食物病原菌的檢驗方法,但這些檢驗方法耗費大量時間,且國內試劑供應存在不配套等問題,使食物中毒病原菌的檢驗方法不能滿足我國公共衛生的需求。本文立足于PCR的概念,對在食品檢驗中多重PCR技術的應用進行科學有效的闡述,為我國的食品安全提供保障。
食品檢驗;PCR技術;原理;應用分析
聚合酶鏈式反應(Polymerase Chain Reaction, PCR)又被稱為無細胞克隆系統,是在20世紀80年代興起的一種分子生物學新技術。應用PCR技術可以在幾個小時內讓微量的特定DNA片段迅速的擴增到百萬倍。該項技術具有高靈敏度、強特異性等特點,這些優點使得PCR迅速發展,應用范圍也越來越廣[1],在基因的克隆、醫學、環境科學和食品科學等領域都有應用。
2.1 在病原菌檢驗測的應用研究
造成食品污染的病原菌較多,主要有腸出血性大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、單核細胞增生李斯特菌和耐藥球菌等。在檢測這些微生物時,易受其他微生物的影響,因而在檢驗的過程中準確率不高。當前的多項研究均是采用多重PCR技術對這些病原菌進行檢測。
2.2 在食品非致病菌檢測中的應用
密閉環境下主要的微生物是乳酸菌,針對真空食品包裝而言,其乳酸菌的含量普遍不高。但不排除在儲藏的過程中進行繁殖的可能性,采用多重PCR技術對真空包裝中的微生物進行檢測,可以檢驗食品中是否會出現腐敗變質[2]。
2.3 食品微生物檢測中應用多重PCR技術存在的問題
在食品微生物檢測中應用多重PCR技術不可避免地會存在一些問題,導致引物與非靶序列的結合產生非特異性擴增。因而在應用多重PCR技術時需要對引物進行科學合理的設計,通過對多重PCR技術進行優化分析可最大限度地減少非特異性擴增,減少假陰性和假陽性結果的出現。
2.4 免疫PCR
免疫PCR是以DNA分子作為標記物,在發生免疫反應后,進行PCR擴增和電泳分析。一般情況下,免疫PCR多采用生物素作為連接的分子。生物素都有兩個獨立的結合位點,其中一個結合位點與DNA分子進行結合,另一個結合位點與抗原2抗體復合物上的親和素結合,實現DNA分子與抗原抗體復合物的有效連接,進而形成一定的復合物[3]。
隨著PCR技術的發展,其在食品檢驗領域也獲得了普遍的應用,不同于傳統的檢驗方法,PCR具有高靈敏性、快速性以及操作便捷性等各種優勢,雖然當前的PCR技術還存在一定缺陷,但是相信在PCR技術不斷完善與發展的過程中,該技術必定能在食品檢驗甚者更多的領域發揮積極的作用。
[1]栗建永,趙 琢,賈曉川,等.食源性致病菌檢測分析技術的研究進展[J]. 食品研究與開發,2013(18):110-115.
[2]周蓓莉,肖進文,劉生峰,等.食品中3種致病菌多重PCR檢測方法的建立及初步應用[J].食品科技,2012(6):312-315.
[3]周明東,張臣偉,張海濱,等.食源性致病菌快速檢測方法的建立與應用[J].中國食品學報,2012(10):169-176.
Application of Multi-PCR Technology in Food Inspection
Luo Pengcheng
(Guyuan Market Supervison and Inspection Center, Guyuan 756000, China)
With the development of social economy, food safety aroused people's concern gradually. Food safety problems affect people's daily life, work and health as well as related to national economy. In recent years, the media had reported that the food poisoning news events and bacterial contamination is the main reason. Our country made the inspection method of food poisoning pathogenic bacteria, but these test methods take a long time, the existence of problems make food poisoning pathogenic bacteria testing method can't adapt to the needs of the public health event emergency treatment better. In this paper, based on the concept and technical principle of PCR, introduce the application of multiple PCR technique in food inspection carries on the scientific and effective.
Food inspection; PCR; Principle; Application analysis
TS201
10.16736/j.cnki.cn41-1434/ts.2016.14.015