不同級別腦膠質瘤中TGF-β1 SRF及波形蛋白表達水平及意義

田　力

遼寧調兵山市鐵法煤集團總院神經外科　調兵山　112700

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不同級別腦膠質瘤中TGF-β1 SRF及波形蛋白表達水平及意義

田力

遼寧調兵山市鐵法煤集團總院神經外科調兵山112700

【摘要】目的探討不同級別腦膠質瘤中轉化生長因子β1(TGF-β1)、血清應答因子(SRF)及波形蛋白表達水平及意義。方法分析40例腦膠質瘤患者的臨床資料。結果研究組TGF-β1、SRF及波形蛋白陽性表達率分別為65.0%(26/40)、45.0%(18/40)、77.5%(31/40)，均顯著高于對照組的26.7%(8/30)、13.3%(4/30)、7.1%(2/30)(P<0.05)，腫瘤級別Ⅲ+Ⅳ級患者的TGF-β1、SRF及波形蛋白陽性率分別為77.3%(17/22)、63.6%(14/22)、86.4%(19/22)，均顯著高于Ⅰ+Ⅱ級患者的50.0%(9/18)、22.2%(4/18)、66.7%(12/18)(P<0.05)，TGF-β1與SRF、SRF與波形蛋白均呈顯著正相關(P<0.05)。結論腦膠質瘤中TGF-β1、SRF及波形蛋白表達水平顯著提升，與其惡性程度顯著相關。

【關鍵詞】不同級別腦膠質瘤；TGF-β1；SRF；波形蛋白

SRF屬于MADS轉錄因子家族成員，從進化上來說具有高度保守性。相關研究表明，SRF能夠對立早基因、細胞骨架、黏附相關基因等的表達進行有效調控。最新研究表明，胃癌、肝癌等多種惡性腫瘤中均具有較高的SRF表達水平，同時還具有較高的間質標記物波形蛋白表達水平及較低的上皮標記物E-鈣黏蛋白表達水平，而通常情況下該過程發生的前提條件為生長因子信號活化和調控，如TGF-β1。相關研究表明[1]，SRF能夠為腫瘤細胞對間質細胞表型的獲取提供良好的前提條件，直接而深刻地影響著腫瘤的轉移和浸潤。本研究對40例腦膠質瘤患者的臨床資料進行分析，探討不同級別腦膠質瘤中TGF-β1、SRF及波形蛋白表達水平及意義，報告如下。

1資料與方法

1.1一般資料運用隨機抽樣方法選取我院2011-01—2014-09收治的40例腦膠質瘤患者為研究組，均接受手術切除治療，均經病理確診為腦膠質瘤，均知情同意；男23例，女17例，年齡14～77歲，平均(47.5±10.2)歲；病程1～3 a，平均(1.1±0.4)a。Ⅰ級2例，Ⅱ級16例，Ⅲ級13例，Ⅳ級9例。另選取我院同期收治的30例腦膠質瘤患者的膠質瘤旁正常腦組織標本為對照組，男18例，女12例，年齡14～77歲，平均(43.6±10.7)歲；病程1～3 a，平均(1.0±0.3)a。2組一般資料差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。本研究通過醫院倫理委員會批準。

1.2方法依次常規石蠟切片、HE染色、組織學觀察。以厚度為5 μm連續切片，分別將Santa Cruz 公司生產的抗TGF-β1(sc-146)、SRF(sc-335)及EPITOMICS 公司生產的波形蛋白抗體(2707-1)加入其中，采用SP法試劑盒(SP-9001，SP-9002)進行免疫組織化學染色，抗體濃度均為1%，對其進行熱修復，修復過程中運用枸鹽酸。購買北京中山金橋生物技術有限公司生產的試劑盒ZLI-9031進行DAB顯色。TGF-β1陽性的標準為有棕黃色顆粒出現在細胞質內，SRF和波形蛋白表達分別在細胞核定位、主要為胞漿，通常情況下絲狀、索狀條紋為其主要表達[2]。400倍視野下認真細致地觀察10個視野，細胞個數為100個/視野，計算陽性細胞百分比。依據4級計分：陽性細胞數在10%以下，計0分；陽性細胞數10%～25%，計1分；陽性細胞數26%～50%，計2分；陽性細胞數51%～75%，計3分；陽性細胞數75%以上，計4分[3]。染色強度評分標準：無色、淡黃色、棕黃色、棕色或棕褐色分別為0分、1分、2分、3分。陽性標準為兩者乘積至少為4分[4]。

1.3統計學分析運用Excel將數據庫，采用統計學軟件SPSS 20.0進行統計學分析，計數資料采用率(%)表示，組間比較行χ2檢驗，相關性分析采用Spearman相關系數，P<0.05為差異有統計學意義。

2結果

2.12組TGF-β1、SRF及波形蛋白陽性表達水平比較研究組TGF-β1、SRF及波形蛋白陽性表達率均顯著高于對照組(P<0.05)。見表1。

表1　2組TGF-β1、SRF及波形蛋白陽性

注：與對照組比較，*P<0.05

2.2研究組TGF-β1、SRF及波形蛋白陽性表達的影響因素研究組腫瘤級別Ⅲ+Ⅳ級患者的TGF-β1、SRF及波形蛋白陽性率均顯著高于Ⅰ+Ⅱ級(P<0.05)，但不同性別、年齡、腦腫瘤部位、腫瘤大小患者的TGF-β1、SRF及波形蛋白陽性率差異均無統計學意義(P>0.05)。見表2。

表2　研究組TGF-β1、SRF及波形蛋白陽性表達

注：與Ⅰ+Ⅱ級比較，*P<0.05

2.3研究組TGF-β1、SRF及波形蛋白表達的相關性分析研究組TGF-β1與SRF、SRF與波形蛋白均呈顯著正相關(P<0.05)。見表3。

表3　研究組TGF-β1、SRF及波形蛋白表達的

3討論

膠質瘤屬于一種顱內腫瘤，臨床極為常見，主要特點為侵襲性生長，手術很難完全切除，同時，放化療會受到膠質瘤細胞的抵抗，一定程度上造成患者術后具有較高的復發率及病死率。相關研究表明[5]，含有血清應答元件的人類基因有300個，占全部基因組的1%左右。可以看出，SRF的作用之一是多種轉錄調控。SRF在細胞內結合DNA的CArG-box的形式為同源二聚體。近年來，相關研究表明[6]，SRF在多種腫瘤組織中表達較高。可以看出，在腫瘤的發生發展進程中，SRF的主要作用為調控；TGF-β1會為腫瘤進展及侵襲提供良好的前提條件，這一事實已得到臨床普遍認可，其在多種腫瘤細胞及組織中的表達均較高，直接而深刻地影響腫瘤血管的生成、增值及侵襲。Zhang等[7]研究表明，在高級別和低級別腦膠質瘤中，TGF-β1分別達到93.8%和43.10%的陽性表達率，高級別腦膠質瘤的TGF-β1陽性表達率顯著高于低級別腦膠質瘤，同時其表達隨著微血管密度的提升而提升，降低而降低。體外研究也表明[8]，TGF-β1刺激膠質瘤SHG-44細胞及U251細胞能夠對細胞遷移進行明顯誘導；波形蛋白直接而深刻地影響腦膠質瘤的增值、轉移及患者預后等，因此，臨床普遍認為其可作為一種腫瘤標志物。現階段，其作為一種間質標記物得到臨床普遍認可，在腫瘤細胞獲取遷移及侵襲能力過程中發揮至關重要的作用[9-10]。在神經系統發育中，神經膠質原纖維酸性蛋白表達不同于兩種中間絲結構蛋白波形蛋白，通常情況下，波形蛋白在膠質瘤細胞惡性轉化的診斷中可能能夠作為一項重要的參考指標[11-12]。本研究表明，研究組TGF-β1、SRF及波形蛋白陽性表達率均顯著高于對照組(P<0.05)，腫瘤級別Ⅲ+Ⅳ級患者TGF-β1、SRF及波形蛋白陽性率均顯著高于Ⅰ+Ⅱ級(P<0.05)，TGF-β1與SRF、SRF與波形蛋白均呈顯著正相關(P<0.05)，充分說明了腦膠質瘤中TGF-β1、SRF及波形蛋白表達水平顯著提升，與其惡性程度顯著相關。

4參考文獻

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(收稿2015-01-15)

【中圖分類號】R739.41

【文獻標識碼】A

【文章編號】1673-5110(2016)03-0065-02