13C-尿素呼氣試驗檢測幽門螺桿菌的影響因素

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·綜述·

13C-尿素呼氣試驗檢測幽門螺桿菌的影響因素

王艷嬌(綜述)，劉改芳*(審校)(河北醫科大學第三醫院消化內科，河北 石家莊 050051)

[關鍵詞]螺桿菌，幽門；(13)C-尿素呼氣試驗；質譜儀；紅外光譜儀

doi:10.3969/j.issn.1007-3205.2016.03.032

13C-尿素呼氣試驗(13C-urea breath test，13C-UBT)是1987年Graham等[1]首次報道用于幽門螺桿菌(Helicobacter pylori，H.pylori)感染的診斷方法。該方法于1996年9月通過美國食品藥物管理局的評審批準應用于臨床。至今13C-UBT仍然被認為是H.pylori感染診斷的金標準。但有些因素可影響13C-UBT檢測結果的準確性，使其出現假陰性或假陽性結果。現就13C-UBT檢測H.pylori的影響因素綜述如下。

1檢測儀器的影響

用于13C-UBT的檢測儀器主要有質譜儀和紅外光譜儀2種。13C-呼氣質譜儀由氣相色譜儀、離子比率質譜儀、加樣器和計算機系統等組成，其工作原理為通過氣相色譜法，將CO2從呼出氣樣品中分離出來，得到純凈的CO2,然后將CO2注入離子比率質譜儀中，離子比率質譜儀包括離子源、質量分析器和檢測器，根據相對分子質量對CO2分子進行分析，得到呼氣中13C的千分差值。

1.1質譜儀質譜儀檢測H.pylori是目前最靈敏的方法，但儀器核心部件的性能對檢測結果有一定的影響，其核心部件包括離子源和質量分析器兩部分，樣品在質譜分析前首先要進行離子化，離子源部件的性能決定了離子化效率，因而很大程度上決定了一臺質譜儀的靈敏度。質量分析器的準確性受分析器的穩定性和分辨率的影響，為確保檢測結果不受儀器部件穩定性等的影響，對于核心部件每5年需由專業技術人員定期進行更換[2]。13C-呼氣質譜儀結構復雜、價格昂貴、維護費用高，使其在臨床的推廣應用和普及受到一定的限制。相比之下，13C-紅外光譜儀因價格便宜、操作簡單，是目前我國臨床應用比較普及的檢測H.pylori的儀器。

1.213C-紅外光譜儀13C-紅外光譜儀由高選擇性的13CO2和12CO2探測器組成，檢測CO2在紅外線譜之間的特異性吸收，最終得到呼氣中13C的千分差值。國內外一些對比研究表明13C-紅外光譜儀與13C-呼氣質譜儀的檢測結果具有很好的相關性，用于13C-UBT檢測H.pylori是非常可靠的[2]。13C-紅外光譜儀測定時需要將集氣袋的口打開連接至儀器端口，操作過程中可能會有一部分樣本漏出，從而降低測定值，因此應用13C-紅外光譜儀進行檢測時要盡量減少樣本漏出[3]。另外，13C-紅外光譜儀的性能不如質譜儀穩定，需要定期進行校正，一般每周需要校正2次。總之，在應用13C-呼氣質譜儀檢測H.pylori時，對其核心部件需要定期進行更換，以減少儀器本身對檢測結果造成的誤差；在應用13C-紅外光譜儀時需注意盡快將集氣袋插入端口，減少因氣體漏出導致的誤差，并應按要求時間及時對儀器進行校正。

2飲食的影響

研究表明，許多食物會對13C-UBT的檢測結果有一定的影響。綻永華等[4]對60例H.pylori陽性的十二指腸潰瘍患者隨機分為2組進行根除H.pylori治療，治療組口服埃索美拉唑+阿莫西林+呋喃唑酮+大蒜素膠囊，對照組不含大蒜素膠囊，服藥7 d后2組繼續服用埃索美拉唑3周，停藥4周后復查UBT,治療組H.pylori根除率為92.9%，對照組為84.4%，差異有統計學意義(P<0.05)，大蒜素是大蒜的主要有效成分，其分子中的巰基可抑制與H.pylori生長繁殖有關的含巰基酶，進而產生抗菌作用。富含乳酸桿菌的酸奶酪等食物的攝入可抑制H.pylori在胃內的生長[5]。Fujimura等[6]研究認為乳酸桿菌可以抑制H.pylori的生長。這與乳酸桿菌產生的細菌素、乳酸、過氧化氫等可以抑制H.pylori活性有關[7]。另外，Stoicov等[8]通過體外實驗及動物實驗發現綠茶對H.pylori有抑菌作用，這可能是因為綠茶的主要成分兒茶素對H.pylori尿素酶有抑制作用。因此，在13C-UBT檢測前患者需要隔夜空腹或禁食4 h以上，從而避免食物對檢測結果的影響；此外，還應了解患者的飲食習慣，如果長期或近期飲用綠茶、頻繁進食大蒜或富含乳酸桿菌的食物，檢測結果可能會出現假陰性或較低的檢測值。

3藥物的影響

研究已證實近期內使用抗生素、鉍制劑、質子泵抑制劑、H2受體阻滯劑、部分中藥(如黃連、黃芩、大黃等)對H.pylori的檢測有明顯的影響，可造成假陰性的結果。吳炎等[9]對156例十二指腸球部潰瘍患者做了研究，發現近期內未使用抗生素者UBT陽性率明顯高于使用抗生素者，在停藥1個月后對之前檢測為陰性的患者再次檢測,陽性率為66．7%；不同種類的抗生素對UBT的影響是不同的，近期應用克林霉素的患者，UBT均為H.pylori陽性，未顯示出影響；而近期應用甲硝唑、阿莫西林等類藥物的患者，在停藥1個月后復查時，原H.pylori陰性者均轉為陽性；近期應用左氧氟沙星的患者，在停藥1個月后復查時原來H.pylori陰性者45.5%轉為陽性，54.5%的患者仍為陰性。質子泵抑制劑有強烈、持久的抑酸作用,應用后會使胃內酸度降低，H.pylori在生存環境不利時易于發生形態變異，常由S型縮卷成球形，處于靜止的自身保護狀態，可能導致對H.pylori的檢測出現假陰性[10]。而鉍制劑抗H.pylori的機制主要有：鉍制劑可進入H.pylori菌體內并聚集，促使其發生不規則收縮，導致細胞膜破裂；另外，鉍制劑還可與H.pylori產生的毒素結合，使H.pylori無法在胃黏膜上皮定植[11]。H2受體阻滯劑本身對H.pylori沒有抑制作用，其對13C-UBT結果的影響可能與其抑制胃酸分泌，使胃內pH升高有關。部分中藥對13C-UBT結果也有很大影響，游運舸等[12]研究認為用祛菌通幽湯(其內含有炒大黃、黃連等)替代含鉍劑四聯方案中的抗生素對H.pylori有很好的根除效果，其具體機制尚不清楚。故在13C-UBT檢測前應仔細詢問病情，了解之前是否使用過相關藥物，如有服藥史需告知患者停用相關藥物一定時間后再進行檢測，如因某些原因不能停服者，可采用血清學方法檢測H.pylori抗體；對于H.pylori根除治療的患者應囑其在停藥后4周以上復查，如復查仍為陽性者，應在停藥后2～3個月待H.pylori恢復其典型形態、尿素酶活性恢復后再次行根除治療。

4疾病的影響

某些疾病狀態下進行13C-UBT也會影響其檢測結果的準確性，出現假陽性或假陰性。李舜等[13]對382例上消化道疾病患者同期UBT的結果以病理對照作為判定H.pylori感染的標準，結果顯示慢性萎縮性胃炎者UBT假陽性率達24.1%，原因可能是萎縮性胃炎者胃酸缺乏極易發生胃內其他產尿素酶的細菌過度生長,可能導致13C-UBT假陽性。尹曙明等[14]對94例殘胃者和100例非殘胃者進行13C-UBT檢測，結果顯示殘胃者術后H.pylori感染率明顯低于術前和非殘胃者(37.2%vs79.8%，77.0%)，畢Ⅱ式術后H.pylori感染率低于畢Ⅰ式術后(24.4%vs47.2%)，且隨著術后病程的延長H.pylori感染率逐漸降低。胃部分切除的患者口服13C-尿素后13C-尿素在胃內排空速度過快，更易進入十二指腸或小腸，導致13C-UBT出現假陰性，對于殘胃者宜采用胃黏膜組織快速尿素酶試驗或H.pylori糞便抗原等檢測方法檢測。徐林發等[15]對53例上消化道出血患者做了研究，結果顯示UBT檢測H.pylori陽性率明顯低于病理組織學方法(24.5%vs90.6%)，差異有統計學意義(P<0.01)，說明上消化道出血者用UBT檢測H.pylori會出現假陰性結果。這可能是因為出血后胃內的血液及血凝塊一方面中和胃酸，使胃內pH值升高，另一方面釋放大量的氧氣抑制H.pylori的生長，使H.pylori尿素酶活性降低[9]。鄭忠法等[16]研究顯示慢性胃炎H.pylori的陽性率為71.7%，膽汁反流性胃炎的H.pylori陽性率為36%，2組比較差異有統計學意義(P<0.05)，說明膽汁反流對H.pylori有抑制作用，但膽汁反流性胃炎與H.pylori感染是可以并存的，這可能與膽汁反流的時間、頻率等有關。高瑞梅等[17]關于H.pylori的細菌培養試驗顯示，膽汁濃度高于1∶192時H.pylori分離株無法生長。膽汁反流可以破壞H.pylori生長的微環境，膽汁酸對H.pylori的聚集、生長有明顯抑制效果，膽汁反流可影響13C-UBT的檢測結果，造成假陰性。因此，在13C-UBT前需先了解患者的疾病狀態，對可影響檢測結果的疾病給予相應的處理措施，或采用其他(如H.pylori抗體檢測)檢測方法進行檢測，以提高檢測結果的準確性。

5受檢者的配合及尿素劑型的影響

在檢測前需向患者詳細介紹13C-UBT的方法、簡單原理及需要患者配合的注意事項，以消除患者的顧慮，從而得到其重視和配合。檢測開始前需囑患者清潔口腔，因為口腔中也有一定的尿素酶活性，這會影響13C-UBT的檢測結果。零時呼氣后需叮囑患者保持安靜，避免劇烈活動，因為身體在安靜和運動狀態下CO2的產量有很大變化,呼氣中13CO2濃度會因內源性CO2的產生而被不同程度的稀釋,使13CO2豐度明顯下降,造成檢測結果出現偏差。將13C-尿素制成膠囊口服可減少口腔尿素酶活性的影響,Peng等[18]比較了服用膠囊制劑及粉劑的UBT檢測H.pylori的敏感度、特異度及準確性，結果顯示膠囊制劑的準確性較高(98%、93%)。因此，為避免口腔中尿素酶活性對檢測結果的影響，檢測前需告知患者清潔口腔或口服膠囊制劑；在檢測前應與患者溝通，使其配合操作者進行檢測，這對于檢測結果的準確性也是非常必要的。

6展望

H.pylori感染可導致消化性潰瘍、胃癌、尋常型銀屑病、阿爾茨海默病等許多疾病[19]，因此對H.pylori感染的診斷及根除是非常重要的。13C-UBT作為目前國際公認的檢測及抗H.pylori藥物療效監測的金標準，已經在臨床上推廣應用。但其檢測的準確性也受許多因素的影響，除上述影響因素外，關于13C-UBT的13C-尿素劑量等目前尚無統一的規定，有報道提出了優化方案[20]，但減小13C-尿素劑量是否會影響檢測結果的準確性尚不明確。

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(本文編輯：許卓文)

[中圖分類號]R573

[文獻標志碼]A

[文章編號]1007-3205(2016)03-0358-03

*通訊作者

[作者簡介]王艷嬌(1987-)，女，河北定興人，河北醫科大學第三醫院醫學碩士研究生，從事消化內科疾病診治研究。

[收稿日期]2014-12-19；[修回日期]2015-01-13