乙型肝炎病毒-DNA檢測在乙型肝炎中的診斷價值研究

葛曉衛

（商丘市傳染病醫院檢驗科，河南 商丘 476100）

乙型肝炎病毒-DNA檢測在乙型肝炎中的診斷價值研究

葛曉衛

（商丘市傳染病醫院檢驗科，河南 商丘 476100）

目的研究乙型肝炎病毒-DNA（HBV-DNA）檢測在乙型肝炎中的診斷價值。方法選擇商丘市傳染病醫院檢驗科2014年11月-2016年11月收治的乙型肝炎患者60例為研究對象，檢測HBV血清標志物乙型肝炎表面抗體（抗-HBs）、乙型肝炎表面抗原（HBsAg）、乙型肝炎核心抗體（抗-HBc）、乙型肝炎e抗體（抗-HBe）、乙型肝炎e抗原（HBeAg）分為五組，測定五組患者HBV-DNA水平及陽性率。結果依HBV血清標志物檢測結果可將研究對象分Ⅰ組18例（30.00%）、Ⅱ組26例（43.33%）、Ⅲ組8例（13.33%）、Ⅳ組6例（10.00%）、Ⅴ組2例（3.33%），Ⅱ組人數多于其余4組，差異有統計學意義（P＜0.05）；Ⅰ組患者HBV-DNA水平高于其他各組；其陽性率明顯高于其他4組，差異有統計學意義（P＜0.05）。結論乙型肝炎病毒-DNA檢測輔以HBV血清標志物檢測可提高乙型肝炎早期診斷的準確率和靈敏度。

乙型肝炎；HBV-DNA；診斷價值

乙型肝炎屬臨床慢性傳染性疾病的一種，我國發病率居全球首位[1]。研究表明，乙型肝炎由機體感染HBV引發，根治較為困難，而其所致的肝硬化、肝衰竭等致死率極高[2]。因此，早期診斷從而給予積極干預措施在改善乙型肝炎患者預后、減輕家庭及社會壓力中具有重要意義[3]。本研究對定量檢測60例乙型肝炎患者的血清HBV-DNA水平，旨在為乙型肝炎的診斷提供臨床依據。具體信息如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇商丘市傳染病醫院檢驗科2014年11月～2016年11月收治的乙型肝炎患者60例為研究對象，其中男36例，女24例；年齡17～76歲，平均（34.17±6.52）歲；病程3d～6年，平均（3.69±0.24）年。

1.2 方法

患者60例均于凌晨取空腹靜脈血6mL，經離心處理后分為2管，3mL/管；采用ELISA法檢測HBV血清標志物抗-HBs、HBsAg、抗-HBc、抗-HBe、HBeAg；HBV-DNA采用Option DNA Engine型PCR擴增儀（美國MJ公司）以熒光定量法測定。相關試劑盒分別由中山生物有限公司、上海科華生物科技有限公司提供，所有操作嚴格依照試劑盒說明書進行。

1.3 評價指標

依HBV血清標志物檢測結果分為Ⅰ組（HBsAg、HBeAg、抗-HBc陽性）；Ⅱ組（HBsAg、抗-HBc、抗-HBe陽性）；Ⅲ組（抗-HBs、抗-HBc、抗-HBe陽性）；Ⅳ組（HBsAg、抗-HBc陽性）；Ⅴ組（抗-HBs陽性），未有提及指標則為陰性。以HBV-DNA＞500copy/mL為陽性，≤500copy/mL則為陰性。

1.4 統計學方法

采用SPSS21.0統計學軟件對數據進行處理，以例數（n）表示，計數資料以百分數（%）表示，行x2檢驗，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 血清標志物

依HBV血清標志物檢測結果可將研究對象分為5組，其中Ⅰ組18例（30.00%）、Ⅱ組26例（43.33%）、Ⅲ組8例（13.33%）、Ⅳ組6例（10.00%）、Ⅴ組2例（3.33%）。其中Ⅱ組人數多于其余4組，差異有統計學意義（P＜0.05）。

2.2 HBV-DNA

Ⅰ組患者HBV-DNA水平高于其他各組；其陽性率高達100%，明顯高于其他4組，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表1。

表1 HBV-DNA定量檢測結果

3 討 論

機體受肝炎病毒入侵后，可見肝細胞嚴重受損，目前我國HBV感染人口約為2億，對患者個人、家庭及社會均造成了嚴重的醫療衛生負擔。研究表明，HBV早期感染患者并無典型臨床癥狀，多數患者初次就診即可見并發癥的發生，臨床治療難度大，患者預后較差[4]。

HBV-DNA無蛋白質包裹，是HBV的遺傳信息所在，也是病毒復制、增殖的基本條件，能夠單獨完成對宿主的侵襲，侵襲完成后宿主體內短期內即可見完整的HBV顆粒。HBV-DNA檢測的目的主要在于對患者病毒載量進行判定，是抗病毒用藥治療效果的重要指征之一，也可用于乙型肝炎的轉歸判斷[5-6]。本研究中，通過實時熒光定量PCR對HBV-DNA進行檢測，采取了閉管方式進行擴增和檢測，是臨床基因診斷的重要手段，可一定程度上避免以往PCR的污染問題，檢測可信度更高。此外，熒光探針還可準確定量檢測HBV水平，在一定程度上增強PCR檢測的特異性，定量范圍廣；實際操作過程中定量范圍極廣，陽性梯度具有可設性。ELISA則是HBV感染臨床傳統檢測方法，與熒光定量PCR相比，其以人體對HBV的免疫反應狀態為研究對象，屬于間接病毒感染檢測手段。本研究結果顯示，“小三陽（HBsAg、抗-HBc、抗-HBe陽性）”、“大三陽（HBsAg、HBeAg、抗-HBc陽性）”患者所占比例分別居于第一、二位，占比可達43.33%、30.00%，高于其他三組，提示目前乙型肝炎的患病率較高，但臨床檢查率不夠滿意；熒光定量PCR檢測顯示“大三陽”患者HBV-DNA平均水平為5.09×107copy/mL，陽性率為100%，明顯高于其余四組，表明HBV-DNA定量檢測可用于ELISA檢測的輔助手段，能夠較高反映HBV機體載量，從而為臨床治療及預后提供依據。

綜上所述，單一ELISA在乙型肝炎診斷中存在一定局限性，HBV-DNA定量檢測可在一定程度上改善乙型肝炎早期診斷的準確率和靈敏度，臨床干預后檢測有助于療效及預后的判斷，值得臨床推廣應用。

[1] 鄭 徽,王富珍,張國民,等.2011-2013年全國傳染病報告信息管理系統中乙型肝炎病例重復報告現狀分析[J].中華流行病學雜志,2016,37(09):1248-1252.

[2] 李振挺,李 芹,林 恢,等.FibroScan與慢性乙型肝炎肝組織炎癥及纖維化程度的相關性研究[J].中西醫結合肝病雜志,2016,26(05):270-271,274.

[3] 張 旭,王 煜,馬 娟,等.5種無創診斷技術單獨及聯合應用對慢性乙型肝炎肝纖維化的診斷價值比較[J].臨床肝膽病雜志,2016,32(10):1888-1893.

[4] 陳華國,莊育剛,周書琴,等.六項指標的積分：早期診斷慢性乙型肝炎引起的慢加急性肝衰竭[J].中國基層醫藥,2015,22(17):2628-2631.

[5] 李向永,尤 旭,吳元凱,等.慢性HBV感染者經長期核苷(酸)類似物治療獲HBsAg陰轉停藥后的療效[J].中山大學學報(醫學科學版),2016,37(03):408-412.

[6] 黃 金,尹春煜,諶翠容,等.Peg-IFNα序貫聯合NUCs治療高病毒載量e抗原陽性乙型肝炎療效觀察[J].浙江臨床醫學,2016,18(10):1817-1819.

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ISSN.2095-8803.2016.12.033.02