尿銻檢測方法在我國的應用*

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·綜述·

尿銻檢測方法在我國的應用*

李榮娟 綜述，覃利梅 審校

(廣西壯族自治區(qū)職業(yè)病防治研究院，廣西南寧 530021)

關(guān)鍵詞:尿銻；檢測；方法

銻應用于化工、電工和醫(yī)藥及軍火工業(yè)上，它的合金可制鉛字、軸承等，而人體中是不需要銻元素的。銻以蒸氣或塵的形式由呼吸道、消化道和皮膚黏膜等攝入人體，主要由尿液排出，其排出量約占總排量的60%以上[1]。許多研究者認為，銻化合物作用機制是抑制酶活性，對人體的多器官特別是免疫系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)、人體發(fā)育等有一定的毒性[2-4]，而三氯化二銻為可疑人類致癌物[5]。國內(nèi)[6]和國外[7]報道過測定尿銻的濃度對生物監(jiān)測和臨床診斷具有十分重要的意義。我國目前還未制定出尿銻檢測的國家標準方法和地方標準方法，檢測方法現(xiàn)在處于研究和摸索的階段。因此，如何選擇安全、快捷、準確可靠的檢測方法，對比各種檢測方法優(yōu)缺點，為實驗技術(shù)人員應用提供參考依據(jù)，確保實驗數(shù)據(jù)正確是檢測方法研究中的重要內(nèi)容。現(xiàn)將尿銻檢測方法在我國的應用綜述如下。

1分光光度法

分光光度法是采用5-溴-吡啶偶氮二乙基氨基苯酚(5-Br-PADAP)顯色，用苯提取后比色測定法[8]。該法是樣品經(jīng)消化酸解后，銻離子與碘化鉀及5-Br-PADAP反應生成藍綠色三元絡(luò)合物，被苯提取后在610 nm波長下測吸光度進行定量。該方法不需要大型儀器，操作成本不高，靈敏度為0.01 mg/L。由于該法使用易揮發(fā)、強致癌作用的苯作為溶劑，對實驗人員健康造成危害，且方法繁瑣，分析時間長，條件嚴格。雖然該法是空氣中金屬銻及其化合物檢測的國家標準方法，但很少作為尿中銻檢測方法使用。

2石墨爐原子吸收光譜法

石墨爐原子吸收光光度計在如今已被廣泛應用。肖梅等[9]，覃利梅等[10]使用塞曼效應原理的原子吸收分和熱解石墨管，通過使用銅[11]和硝酸鎂溶液[12]基體改進劑，選擇適當?shù)母稍飼r間、灰化溫度和原子化溫度、原子化時間等條件，研究出尿銻原子吸收光譜直接進樣檢測法。該方法所需要的尿樣體積少，不需要前期消化，方法線性范圍較寬，精密度好，靈敏度高，檢出限低為0.06 pg，干擾少，測定速度快等優(yōu)點[10-11]，適用于大批量職業(yè)人群的尿銻檢測篩查。

3氫化物發(fā)生-原子熒光光譜法(HG-AFS)

原子熒光光譜法(AFS)是20世紀，60年代發(fā)展起來的一種新的痕量元素分析方法，在微量元素分析方面得到廣泛運用[12]，在我國的發(fā)展也非常迅速。其原理是通過被測定元素的原子蒸氣在輻射能激發(fā)下產(chǎn)生的熒光發(fā)身強度進行元素分析。尿樣經(jīng)前處理后銻形成氣態(tài)的氫化物在銻特種空心陰極燈作用下激發(fā)光源發(fā)出熒光，銻的含量與熒光強度一定范圍內(nèi)成正比。HG-AFS是近幾年我國學者研究討論最多的一種痕量銻檢測方法。其原子化效率高、進樣效率高，所需樣品量少，靈敏度高，基體干擾少等優(yōu)點，是金屬元素分析方法較為常用的一種，占有重要的地位[13]。該方法使用儀器是原子熒光儀，設(shè)備便宜、簡單易操作，容易被接受推廣。已經(jīng)過實際樣品測試，準確率和重復性都很好，結(jié)果滿意。其一，微波消解-氫化物發(fā)生原子熒光光譜法，樣品前處理需要硝酸、高氯酸消化后再裝入消化罐中進行微波消解，耗時較長，消化過程不易控制，會產(chǎn)生爆沸，酸氣泄漏而爆罐存在較大安全隱患[14]。消化罐處理麻煩，不適宜于職業(yè)病體檢和人群本底水平調(diào)查等大批量尿樣的前處理。其二，國內(nèi)學者[7，15-17]研究用濕法消化-氫化物發(fā)生原子熒光測定尿銻，樣品酸消化后經(jīng)硫脲-抗壞血酸溶液預還原，流動方式進樣使溶液與硼氫化鉀-鹽酸還原體系在氫化物發(fā)生器中反應生成揮發(fā)性銻氫化物，根據(jù)濃度-熒光強度標準曲線計算出尿中銻含量。這是一種測定結(jié)果準確、儀器操作簡單，易于掌握，容易推廣普及的尿銻檢測方法。有報道[18]，石墨爐原子吸收光譜法和濕法消化-氫化物發(fā)生原子熒光法測尿銻兩種方法比較，濕法消化-氫化物發(fā)生原子熒光法具有更高靈敏度，檢出限為0.06 μg/L。成本低易推廣應用，實用于職業(yè)人群體檢，是大批量尿樣標本銻檢測較為理想的測定方法。這也是目前我國使用最多的尿銻檢測方法。

4電感偶合等離子檢測法

痕量分析技術(shù)不斷地發(fā)展、更新，目前有電感偶合等離子體發(fā)射光譜法(ICP-AES)和電感偶合等離子體質(zhì)譜法(ICP-MS)。其原理是高頻電流使氣體形成等離子體中，樣品中元素在高熱能的激發(fā)下而發(fā)射出特征譜線，根據(jù)強度進行定性定量的測定。質(zhì)譜是使試樣中各組分通過高速雙通道在離子源中發(fā)生電離后進行檢測，樣品濃度線性動態(tài)范圍可達9個數(shù)量級。該方法有高特異性和高靈敏度，檢出限最低、動態(tài)線性范圍最寬，基體干擾最少、分析準確度及精密度高、分析簡便且快捷，并可同時進行多種元素、多種組分分析測定的優(yōu)點，符合理想分析方法的要求。兩者比較ICP-MS法檢出限比ICP-AES低2～3個數(shù)量級。

5聯(lián)用技術(shù)檢測法

銻的毒性取決于其形態(tài)，主要集中在無機態(tài)銻(Ⅲ)和銻(Ⅴ)毒性及生物有效性的研究[19]。單一儀器或技術(shù)不能滿足形態(tài)分析方法，因此將兩種或兩種以上分析技術(shù)連接起來得到的分析技術(shù)成為現(xiàn)代分析重要手段。高效液相色譜(HPLC)與ICP-AES、ICP-MS聯(lián)用：自1980年有研究者第一次提出聯(lián)用技術(shù)以來[20]，各學者開始進一步研究并使聯(lián)用技術(shù)迅速發(fā)展，作為形態(tài)分離的HPLC和ICP-MS結(jié)合是發(fā)展較為完善的聯(lián)用技術(shù)之一，但儀器成本和維護費用高導致其應用難以推廣普及。HPLC與HG-AFS聯(lián)用：由于氫化物發(fā)生進樣不斷改善，分析方法更快、更有效。高效液相色譜的高效分離能力和原子熒光光譜結(jié)合經(jīng)實際樣品測試，已成功用于砷化合物形態(tài)分析[21-22]。今后應用于銻化合物檢測研究上是十分具有吸引力的課題。

6結(jié)語

在過去幾十年中，銻及其化合物檢測從分光光度比色法到滿足痕量分析要求的ICP-MS，再到HPLC元素形態(tài)分離，其過程是分析技術(shù)的重大突破。HPLC是元素形態(tài)分離的有效途徑，HPLC和HG-AFS、ICP-AES、ICP-MS等聯(lián)用技術(shù)已應用于實際中的個別元素形態(tài)分析。但該方法的人員技術(shù)操作和理論知識要求高，還存在設(shè)備價格昂貴，一般實驗室不具備的缺點，同時絕大多數(shù)藥物、生物樣品測定條件和分析參數(shù)待研究，需要較長的過程，這也決定了要建立高靈敏、高準確、高效率、高快捷的痕量分析檢測方法，運用各種聯(lián)用技術(shù)測定不同形態(tài)銻是我國今后研究發(fā)展的主要方向和趨勢。

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(收稿日期：2015-11-18)

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.04.033

文獻標識碼：A

文章編號：1673-4130(2016)04-0511-02

基金項目：廣西衛(wèi)生廳課題資助項目(Z2014238)。

作者簡介：李榮娟，女，副主任技師，主要從事職業(yè)病檢測工作研究。