葛丹藍膠囊制備工藝研究

楊　曉，王　喆，曾愛國(1.西安交通大學藥學院，西安　710061；2.西安市中心醫院，西安　71000；.陜西省中醫藥研究院食品化妝品檢驗檢定中心，西安　71000)

?

葛丹藍膠囊制備工藝研究

楊曉1，2，王喆3，曾愛國1*(1.西安交通大學藥學院，西安710061；2.西安市中心醫院，西安710003；3.陜西省中醫藥研究院食品化妝品檢驗檢定中心，西安710003)

摘要：目的確定葛丹藍膠囊提取、成型的最佳工藝。方法以干膏量、總黃酮為指標，采用正交實驗優化葛丹藍膠囊的最佳提取工藝；單因素考察成型工藝。結果人參粉碎以凈粉量投料；葛根、丹參、桑葉、絞股藍用體積分數為70%的乙醇回流提取2次，每次加12倍量溶劑，1.5 h，制成干膏粉備用；人參細粉與上述干膏粉混勻后用體積分數為85%的乙醇制軟材，16目篩制粒，裝0號膠囊，即得。結論葛丹藍膠囊的制備工藝合理，為其進一步藥效和臨床研究奠定了基礎。

關鍵詞：葛丹藍膠囊；總黃酮；制備；正交實驗

葛丹藍膠囊是由葛根、丹參、桑葉、絞股藍、人參等藥材組成，具有生津止渴、疏肝解郁、滋補肝腎和化濁降脂的功效，用于降血糖和降血脂。

葛根為豆科植物野葛的干燥根，性涼、甘、辛，歸脾、胃、肺經，具有解肌退熱、生津止渴之功。實驗研

究發現，葛根素能明顯降低血脂，改善糖耐量[1]；丹參具有活血祛瘀、通經止痛、清心除煩和涼血消癰之效，主要用于胸痹心痛、瘡瘍腫痛、熱痹疼痛等癥。研究發現，丹參具有明顯的降血脂作用[2]，能改善2型糖尿病患者血糖控制狀況[3]；自古以來中醫就將桑葉作為治療消渴癥(糖尿病)的中藥，廣泛應用于臨床。桑葉總黃酮能抑制大鼠小腸雙糖酶活性，具有顯著的降血糖作用[4]，桑葉提取物還能有效地減肥并調節血脂[5]；絞股藍為葫蘆科植物絞股藍的干燥全草，實驗發現絞股藍皂苷能使糖尿病大鼠血糖、血脂、尿蛋白、腎質量/體質量等指標明顯降低[6]，具有降血脂作用[7]；人參為五加科植物人參的干燥根及根莖，性平，味甘、微苦；歸脾、肺、心經，具有益氣生津、止消渴的作用，人參能顯著性降低實驗性糖尿病大鼠的血糖，具有明顯的降血脂作用[8]。本課題通過研究葛丹藍膠囊的提取、成型工藝，為其進一步藥效和臨床研究奠定基礎。

1儀器與試藥

1.1儀器BT125D電子分析天平(德國賽多利斯)；UV-7504紫外可見分光光度計(上海欣茂儀器有限公司)；恒溫水浴箱(北京科偉永興儀器有限責任公司)。

1.2試藥人參、葛根、丹參、桑葉和絞股藍等藥材均購于西安藻露堂藥業集團西京醫藥有限公司；蘆丁對照品(質量分數99.0%，上海西寶生物科技有限公司)；聚酰胺粉(西安化學試劑廠)；其他試劑均為分析純；水為蒸餾水。

2方法與結果

2.1工藝路線設計根據所用原料有效成分的性質并參考相關文獻[9-11]，擬確定本品工藝路線為：人參粉碎，以細粉入藥；葛根、丹參、桑葉和絞股藍用乙醇回流提取，合并提取液，濾過，濾液回收乙醇，濃縮成浸膏，減壓干燥，粉碎，備用；上述干膏粉與人參細粉混勻，制粒，整粒，填充，包裝。

2.2粉碎工藝考察取人參凈藥材60 ℃低溫干燥后稱取3份，各100 g，粉碎，過100目篩，稱量，計算出粉率，結果見表1。

表1人參粉碎過程的出粉率結果

Tab.1 The yield of ginseng grinding process

實驗次數投料量/g出粉量/g出粉率/%平均值/%110095．795．796．1210096．596．5310096．296．2

結果表明，人參粉碎的平均出粉率為96.1%，表明人參粉性較好。制劑中凈粉量投料，以保證投料的準確性。

2.3乙醇提取工藝通過多因素的正交實驗，優選乙醇提取工藝的各項參數。以醇提干膏收率及總黃酮含量作為考核指標，選擇最佳的工藝參數。

2.3.1正交實驗設計影響醇提的因素有乙醇體積分數、乙醇用量、提取時間和提取次數，在這4個因素的基礎上，每個因素設計3個水平，因素與水平見表2。為了系統、全面地考察醇提的工藝參數，選擇L9(34)正交表進行設計研究，結果見表3。

表2 實驗因素水平表

Tab.2 Factors and levels of the orthogonal design

水平因素A，乙醇體積分數/%B，乙醇用量/倍C，提取時間/hD，提取次數/次160121．01270141．52380162．03

表3L9(34)正交實驗設計及結果

Tab.3 The results of the orthogonal design

實驗號ABCD評價指標干膏收率/%總黃酮含量/g1111111．130．1632122214．410．4323133315．940．3834212315．240．5435223112．080．3426231213．510．4777313213．420．5018321313．980．4519332111．690．280干膏得率K141．4839．7938．6234．90K240．8340．4741．3441．34K339．0941．1441．4445．16k113．8313．2612．8711．63k213．6113．4913．7813．78k313．0313．7113．8115．05R0．800．450．943．42總黃酮含量K10．981．211．090．79K21．361．231．261．41K31．231．141．231．38k10．330．400．360．26k20．450．410．420．47k30．410．380．410．46R0．120．030．060．21

2.3.2實驗方法與結果按照1∶10處方量比例，取葛根55 g、丹參40 g、桑葉30 g、絞股藍30 g，共155 g，平行9份，隨機取樣編為1～9個實驗號。按照正交表L9(34)中每個實驗號要求進行實驗，濾過，合并濾液，測定干膏收率和總黃酮含量。

(1)干浸膏得率測定量取上述備用液200 mL，置于已干燥的蒸發皿中，水浴蒸干，真空干燥后，稱定質量，按照下式計算干浸膏得率，結果見表4。

(2)總黃酮含量測定蘆丁標準溶液的制備：取蘆丁5.0 mg，精密稱定，置于100 mL量瓶中，加甲醇溶解，定容至刻度，搖勻，即得，1 mL約含蘆丁50 μg。

蘆丁標準曲線的繪制：吸取蘆丁標準溶液0，1.0，2.0，3.0，4.0和5.0 mL，分別置于10 mL量瓶中，加甲醇定容至刻度，搖勻，依照紫外-可見分光光度法，在360 nm波長處測定吸光度值，以濃度為橫坐標、吸光度為縱坐標，繪制標準曲線，求回歸方程。

樣品處理：取干膏粉0.5 g，精密稱定，置于50 mL量瓶中，加乙醇適量，超聲提取20 min，繼續加乙醇定容至刻度，搖勻后靜置，吸取上清液2.0 mL，置于蒸發皿中，加1 g聚酰胺粉吸附，置于水浴上揮發除去乙醇，然后轉入層析柱。先用20 mL苯洗，苯液棄去，用甲醇洗脫黃酮，定容至25 mL。依照紫外-可見分光光度法，在360 nm波長處測定吸光度值。以回歸方程為依據，計算樣品中總黃酮含量，結果見表3。

(3)正交實驗結果由表3直觀分析可知，以干膏收率為考察指標時，A1>A2>A3，B3>B2>B1，C3>C2>C1，D3>D2>D1， A、B、C、D各因素影響依次為D>C>A>B，最佳工藝為A1B3C3D3；以總黃酮含量為考察指標時，A2>A3>A1，B2>B1>B3，C2>C3>C1，D2>D3>D1，A、B、C、D各因素影響依次為D>A>C>B，最佳工藝為A2B2C2D2。

方差分析結果見表4。由表4可知，以干膏收率為考察指標時，D因素影響最顯著(P<0.05)，A、B、C因素影響較小，無顯著性差異；以總黃酮含量為考察指標時，D和A因素影響顯著(P<0.05)，B和C因素影響較小，無顯著性差異。

表4 正交實驗方差分析

Tab.4 Variance analysis of the orthogonal design

類別方差來源離差平方和自由度FP干膏得率A1．018023．352>0．05B(誤差)0．303821．000C1．706825．619>0．05D17．9260259．014<0．05總黃酮含量A0．0254219．013<0．05B(誤差)0．001321．000C0．005123．818>0．05D0．0825261．650<0．05

注：F0.05(2.2)=19.0。

綜合直觀分析和方差分析，A和D 2個因素對總黃酮含量有顯著性影響，以總黃酮含量為考察指標優選的A2D2較以干膏收率為考察指標優選的A1D3，提取的總黃酮含量更多，但提出的干膏更少，意味著A2D2單位體積干膏中總黃酮的含量更高，有利于服用量的減少；B和C因素對2個指標均無顯著性影響，且B因素對兩指標的影響最小，因此選擇B1與B2進行比較，B2的總黃酮含量只比B1略高，但B1減少了溶劑的加入，有利于降低成本；對于C因素，以總黃酮含量為考察指標優選的C2較以干膏收率為考察指標優選的C3，提取出的總黃酮含量更多，且C2較C3提取時間短，更能節省能耗。由于本工藝的目的是盡可能多地提取藥材中的有效成分，同時縮小制劑體積、減少服用量，并盡可能的降低能耗。故乙醇提取部分最優工藝條件為A2B1C2D2，即用體積分數為70%的乙醇回流提取2次，每次加入12倍量乙醇回流1.5 h。

(4)驗證實驗 按照1∶10處方量比例，取葛根55 g、丹參40 g、桑葉30 g、絞股藍30 g，共155 g，平行3份，加質量分數為70%的乙醇回流提取2次，每次加入12倍量溶劑，回流提取1.5 h，濾過，合并濾液，測定干膏收率及總黃酮含量，結果見表5。

表5驗證實驗結果

Tab.5 The results of the verification test

實驗號藥材量/g干膏得率/%平均得率/%總黃酮含量/g平均含量/g115514．3214．180．5720．564215514．010．568315514．210．552

驗證結果表明，乙醇提取平均干膏收率為14.18%，總黃酮平均含量為0.564 g，其中總黃酮含量比正交實驗中最高值略高，說明工藝基本可行，故確定最佳工藝為:加體積分數為70%的乙醇,回流提取2次，每次加入12倍量溶劑，各回流提取1.5 h。

2.4成型工藝考察

2.4.1潤濕劑考察取混合好的細粉(干膏粉與人參細粉)3份，每份200 g。用等體積不同體積分數的乙醇分別制粒，將顆粒成型的難易及干顆粒的硬度等進行比較，結果見表6。

表6乙醇體積分數對制粒的影響

Tab.6 The effect of the ethanol volume fraction on granulation

乙醇體積分數/%外觀情況75制粒較困難，濕顆粒易粘結;干顆粒硬度大85制粒容易，顆粒成型性好;干顆粒硬度適中95制粒容易，干顆粒硬度適中;細粉比例較大

結果表明，用體積分數為85%的乙醇制粒，顆粒成型好，硬度適中，大小均勻，質量較好，故確定以體積分數為85%的乙醇為潤濕劑。

2.4.2干顆粒流動性的測定顆粒流動性的大小會直接影響到膠囊填充機分裝時裝量差異的大小。相對而言，流動性大時裝量差異會小，反之則大。顆粒流動性可用休止角來表示，休止角越大，流動性就越差。采用固定漏斗法，對休止角進行測定，以堆高度與底面半徑的函數值來表示。通過實驗測定，干顆粒平均休止角為37.0°，表明干顆粒的流動性良好。

2.4.3膠囊裝量確定根據處方工藝條件篩選的有關數據，計算膠囊裝量。配方中人參細粉200 g；提取部分：醇提藥材量為1 550 g，干膏得率14.18%，干膏量約219.79 g，共得總量約為420 g，共制成膠囊1 000粒，每粒應裝0.420 g，考慮到粉碎、過篩、制粒、膠囊填充工序的損耗，故本品規格定為每粒裝0.4 g。

2.4.4空心膠囊型號的選擇根據制備的膠囊內容物(即藥物顆粒)堆密度與膠囊的容積來確定。堆密度的測定采用體積質量比法進行。結果表明，干顆粒堆密度為0.603 1 g·mL-1，裝量為0.4 g/粒，因此確定空心膠囊容積V為0.663 mL，0號膠囊容積為0.67 mL，能滿足填充要求，再結合多次試裝結果，因此選擇0號膠囊，每粒膠囊裝0.4 g。

3結論

根據以上研究結果確定本品的生產工藝為：

(1)葛根、丹參、桑葉、絞股藍和人參5味藥材，經凈制、檢驗合格后供制劑使用。

(2)取人參藥材，60 ℃干燥后粉碎，過100目篩，收取200 g細粉，用5 kGy劑量的60Co輻照滅菌后備用。

(3)將葛根、丹參、桑葉和絞股藍加12倍量體積分數為70%的乙醇，回流提取2次，每次1.5 h，提取液濾過，合并濾液(藥渣棄)，濾液回收乙醇(-0.065～-0.075 MPa，65 ℃)，并濃縮至相對密度為1.30～1.35(60 ℃測)的浸膏，減壓干燥(-0.085 MPa，65 ℃)，所得干膏粉碎成細粉，過80目篩，備用。

(4)將上述干膏粉與人參細粉混勻，用體積分數為85%的乙醇制軟材，16目篩制粒，55～60 ℃干燥，14目篩整粒，裝入0號膠囊，拋光，檢驗，包裝，即得成品(每粒裝0.4 g)。

4討論

人參在方中為名貴藥材且其成粉性好，以細粉入藥，既可兼作賦形劑，避免膠囊劑內容物吸潮、結塊現象的出現，又可較多地保留其有效成分，提高其成品的穩定性，對工藝有利，并可減少大量輔料的使用。因此，本工藝中人參采用直接打粉入藥的方法。葛根、丹參、桑葉主要含有黃酮類成分，絞股藍主要含有皂苷等成分，黃酮類與皂苷類成分均易溶于乙醇，因此選用乙醇對其進行提取。乙醇提取時受乙醇體積分數、提取次數、提取時間、乙醇用量等因素的影響，因此對醇提工藝進行優化。醇提的最優工藝是：葛根等四味藥材加12倍量體積分數為70%的乙醇回流提取2次，每次1.5 h。葛丹藍膠囊采用制粒后填充膠囊，因此對制粒過程中的潤濕劑、顆粒的流動性以及填充量等進行考察，從而對制劑成型進行優化。

本文在以往研究的基礎上，對葛丹藍膠囊的醇提工藝和成型工藝進行優化，以確定最佳制備工藝。結果表明，葛丹藍膠囊制備工藝合理，為其進一步藥效和臨床研究奠定了基礎。

參考文獻：

[1]玉從容，呂俊華，王丹.葛根素對胰島素抵抗綜合征大鼠血壓、血脂及糖耐量的影響[J].山東中醫雜志，2005，24(6):367-369.

[2]何淑虹.丹參對花生四烯酸及血脂調節的大鼠實驗研究[J].浙江中西醫結合雜志， 2005，15(12):749-750.

[3]唐國驥，許玲. 復方丹參對2型糖尿病患者血糖及紅細胞變形性的影響[J].山東醫藥，1999，39(10):25-26.

[4]原愛紅，黃哲，馬駿，等.桑葉黃酮的提取及其降糖作用的研究[J].中草藥，2004， 35(11):1242-1243.

[5]耿成燕，姜麗平，宮德正，等.殼聚糖、桑葉與決明子提取物對大鼠體脂、血脂與血糖的影響[J].中國臨床康復，2005，9(39):112-114.

[6]郎志芳，董琦，韓繼成，等.絞股藍皂甙對糖尿病大鼠腎臟氧化應激影響的研究[J]. 牡丹江醫學院學報，2005，26(4):5-8.

[7]林轉娣.絞股藍總甙片調節血脂的療效觀察[J]. 廣東醫學院學報，2001， 19(3):200-201.

[8]徐承水.人參降血脂作用的實驗研究[J].長春中醫學院學報，2000，16(3):45-46.

[9]崔九成，宋小妹，張培芳，等.葛根總黃酮提取工藝研究[J]. 西北藥學雜志，1999，14(5):202.

[10]郭增軍，蘇紀蘭，王開，等.丹參提取工藝的實驗研究[J].西北藥學雜志，2002， 17(2):62-63.

[11]張阿慧，安彩賢，侯鴻軍，等.正交實驗優選絞股藍總皂苷的提取方法[J].西北藥學雜志，2001，16(6):252-253.

·藥物分析·

Study on the preparation of Gedanlan Capsules

YANG Xiao1，2，WANG Zhe3，ZENG Aiguo1*(1.School of Pharmacy，Xi′an Jiaotong University，Xi′an 710061，China；2.Xi′an Central Hospital，Xi′an 710003，China；3. Food and Cosmestic Examine Center，Shaanxi Provincial Acadamy of Traditional Chinese Medicine，Xi′an 710003，China)

Abstract:Objective To optimize the extraction and preparation process of Gedanlan Capsules. Method An orthogonal experimental design was used to optimize the parameters of the extraction process on the basis of the dry extract yield and flavonoid contents，and the single factor experiment was used to optimize the parameters of the preparation process. Results Ginseng was crushed and the resulting powder was used. Pueraria lobata radix，Salvia miltiorrhiza，Lolium mori and Gynostemma pentaphyllum were extracted for two times with 70% ethanol，the ratio of solvent to material was 12，the extraction time was 1.5 h，and the resulting extraction liquid was condensed into a dry paste for use. The ginseng powder and the dry paste powder were mixed with 85% ethanol for soft material，and the granule was prepared by 16 mesh sieve and filled into the No. 0 capsule for Gedanlan Capsules. Conclusion The preparation of Gedanlan Capsules is feasible.

Key words:Gedanlan Capsules；flavonoids；preparation；orthogonal design

(收稿日期：2015-06-23)

*通信作者：曾愛國，男，博士，副教授

作者簡介：楊曉，女，在讀碩士研究生

中圖分類號：R944

文獻標志碼：A

文章編號：1004-2407(2016)02-0142-04

doi:10.3969/j.issn.1004-2407.2016.02.010