靳連平
(遼寧省綏中縣前衛動物衛生監督所,遼寧綏中 125203)
羊布魯氏菌病的診斷與防控
靳連平
(遼寧省綏中縣前衛動物衛生監督所,遼寧綏中 125203)
本病是由布氏菌引起的人、畜共患的慢性傳染病。其特點是生殖器官、胎膜及多種器官組織發炎、壞死和肉芽腫的形成,引起流產、不孕、睪丸炎及關節炎等癥狀。
布魯氏菌病;羊;診斷
布氏菌屬分羊種布氏菌、牛種布氏菌、豬種布氏菌、沙林鼠種布氏菌、綿羊附睪種布氏菌和犬種布氏菌6個生物種,19個生物型。其中羊種菌有3個生物型,牛種菌有9個生物型,豬種有4個生物型,綿羊附睪種、沙林鼠種和犬種布氏菌各有1個生物型。
多種動物和禽類對布氏菌均有不同程度的易感性,羊布氏菌的自然宿主為山羊和綿羊,對人也能引起感染,而且病癥較重。母畜較公畜易感,幼畜對本病具有抵抗力,隨著年齡增長,這種抵抗力逐漸減弱,性成熟后對本病最為敏感。病畜或帶菌者是本病的主要傳染源。消化道是主要傳染途徑,其次是生殖道和皮膚、黏膜,實際上幾乎通過任何途徑都可傳染。本病無季節性,但以春季產羔季節較為多見。
潛伏期短者2周,長者可達半年以上。羊群一旦被感染,首先表現孕畜流產,開始僅為少數,以后逐漸增多,嚴重時可達半數以上。早期癥狀有結膜炎、體溫升高等。乳房可形成暫時性硬快。有時發生關節炎和滑囊炎而致跛行。公羊發生睪丸炎。
羊群感染布氏菌后,多數為隱性感染,除一部分妊娠母羊呈現流產、胎盤炎、子宮內膜炎、乳腺炎和公羊的睪丸炎外,大多數感染后很少有明顯的全身性臨床癥狀。因患布氏菌病而死亡的病例更為少見。
(1)病理剖檢變化。病理剖檢主要可見慢性增生性淋巴結炎、肺臟多見布氏菌病性增生性結節,結節的中心為一壞死灶,某些急性病例,還可以看到新形成的滲出性結節。有時可見支氣管炎和支氣管性肺炎。腎臟多見慢性間質性腎炎。肝臟偶爾可見到小的增生性結節。乳腺可見局灶性炎癥。妊娠胎膜和子宮內膜呈現化膿-壞死性炎。在重癥病例,可見漿液-化膿性關節炎和滑液囊炎。脾臟一般在肉眼檢查時不見明顯的病理變化。
(2)病理組織學變化。病理組織學變化主要可見淋巴結早期以淋巴細胞增生為主,有些病例同時還有網狀細胞增生。病情稍有惡化時,一些上皮樣細胞則繼發變性壞死,在其周圍由特殊性肉芽組織包圍,再外圍由非特殊性肉芽組織和淋巴細胞環繞,形成增生性結節。脾臟白髓淋巴組織增生,形成明顯的淋巴濾泡,在紅髓和白髓中,也可以看到上皮樣細胞結節和增生性結節。在肺臟的增生性結節中可見大量崩解的嗜中性粒細胞,其外周為特殊的肉芽組織和普通肉芽組織。滲出性結節中開始有少量嗜中性粒細胞浸潤,進而局部組織和浸潤的細胞發生壞死、崩解,形成壞死灶,其周圍組織發生充血、出血,漿液滲出和嗜中性粒細胞浸潤。腎臟可見淋巴樣細胞和上皮樣細胞增生,有時有上皮樣細胞結節形成。急性病例,可見顯著的急性腎小球性腎炎。肝臟除可見實質變性外,常能見到許多極小的病灶,可見到肝細胞崩解,淋巴樣細胞和嗜中性粒細胞浸潤。心臟最常見有間質性心肌炎。乳腺間質中有淋巴樣細胞增生,偶爾可見上皮樣細胞結節。子宮黏膜深層組織常有結節狀病變。
雖然分離本菌是診斷羊布氏菌病非常可靠的方法,但該法較為麻煩,且需時間長,檢出陽性率低。因此,診斷本病最常用的仍是血清學診斷。布氏菌病血清學診斷方法很多,一般以凝集反應應用最廣,補體結合試驗由于對鑒別診斷有意義,近年來也有應用。血清凝集反應(SAT),家畜感染布氏菌4~5d后,血液中就出現凝集素(SA),主要為IgM,隨后凝集滴度逐漸增高,主要為IgG和IgA。
試管凝集試驗(SAT)操作方法:
(1)材料準備。①器材:試管(1cm×8cm)、1ml吸管、恒溫箱。②布氏菌凝集抗原、標準陽性血清、陰性血清由指定生物制品廠供應。③用作本試驗的血清必須是新鮮的,采得后24h內送實驗室,最遲不能超過3d。不能按期送達者,每0.9ml血清加5%石炭酸0.1ml,立即振蕩混合,血清應無明顯蛋白凝塊、無嚴重溶血和腐敗氣味。
(2)操作方法。①每份血清用4支試管分別加入0.5%石炭酸生理鹽水(管1加2.3ml,管2、3、4加0.5ml),然后用1ml吸管吸取待檢血清0.2ml,加入第1管中,吹吸3次后,吸出1.5ml棄去,再吸0.5ml于第2管,依次對倍稀釋至第4管,混合后棄去0.5ml,各管的血清稀釋度依次為1:12.5、1:25、1:50和1:100,各管液量均為0.5ml。②各管加入用0.5%石炭酸生理鹽水20倍稀釋的布氏菌凝集抗原0.5ml,每次試驗須設抗原對照、陽性血清和陰性血清對照,加入各種成分。③加畢抗原后,充分搖勻,置37℃溫箱4~10h,再移置室溫18~24h后進行判定。
(3)結果判定。按下述標準記錄各管凝集程度:①+++ +:液體完全透明,菌體完全凝集呈傘狀沉于管底,振搖時,沉淀物呈片狀和絮狀。②+++:液體略呈混濁,菌體大部沉降于管底,呈傘狀,為75%凝集。③++:液體不甚透明,有明顯的顆粒狀凝集,為50%凝集。④+:液體不透明,有少量顆粒沉淀,為25%凝集。⑤-:液體不透明,管底無顆粒沉淀,不凝集。有時有少量菌體集中于管底中心,但振搖時立即散開呈均勻渾濁。當出現++以上凝集的血清最高稀釋度即為該血清的凝集價。凝集價1:50以上判為陽性。凝集價1:25判為可疑。結果為可疑的家畜,必須經2~3周后采血重檢,重檢仍為可疑時,可判為陽性。
患布魯氏菌病的家畜宰前有癥狀或宰后發現病變者,其肉尸、內臟須經高溫處理后出場。宰前診斷為陽性而無癥狀,宰后檢驗無病變的牲畜,其生殖器官和乳房作工業用或銷毀,羊肉尸、內臟經高溫處理后出場。消滅布病的綜合措施是檢疫、免疫、消毒。通過免疫生物學檢查方法在畜群中反復進行檢查淘汰(屠宰),可以凈化畜群,至少每年一次定期檢疫。主動免疫接種是控制本病的有效措施。
[1] 范玉芳,孔祥英.羊布魯氏菌病的診斷與防治[J].畜牧獸醫雜志,2011,30(3):120-121.
靳連平(1968—),男,本科,獸醫師。