針灸對缺血性腦卒中血管新生相關信號通路影響研究進展

宋祖賢，曹　奕，王　琳

（1.安徽中醫(yī)藥大學2014級碩士研究生，安徽 合肥 230038；2.安徽中醫(yī)藥大學第二附屬醫(yī)院，安徽 合肥 230061）

針灸對缺血性腦卒中血管新生相關信號通路影響研究進展

宋祖賢1，曹奕2，王琳2

（1.安徽中醫(yī)藥大學2014級碩士研究生，安徽 合肥 230038；2.安徽中醫(yī)藥大學第二附屬醫(yī)院，安徽 合肥 230061）

缺血性腦卒中的治療有多種方法，如神經(jīng)保護、抗凝、溶栓、增加血容量、外科手術及康復治療等。而針灸治療缺血性腦卒中具有顯著的療效。針刺既可改善缺血區(qū)腦組織的能量代謝與血液循環(huán)，發(fā)揮腦保護作用，又可以激活腦組織不同區(qū)域，提高視覺皮層區(qū)域腦組織血氧飽和度［1］。針灸治療還具有影響某些信號通路，促進血管新生，抗自由基氧化等作用。缺血性損傷在內皮祖細胞及細胞因子的綜合作用下可以促進新生血管的形成。在腦缺血病程中，神經(jīng)血管單元因長時間缺血缺氧而發(fā)生壞死和凋亡，因此及時恢復血供、開放側支循環(huán)及促進血管新生十分重要。血管新生是指在原有血管基礎上，通過內皮細胞芽生，血管分裂、分支而形成復雜血管網(wǎng)絡，并使其功能與局部需要相適應的過程。研究顯示內皮組細胞、細胞因子等因素均與血管新生有密切聯(lián)系［2］。

1　缺血性腦卒中與相關信號通路

Notch信號通路。婁遠蕾等［3］實驗發(fā)現(xiàn)腦缺血后腦組織缺血皮質區(qū)NICD蛋白的表達明顯的上調，提示Notch信號通路參與了腦缺血后血管新生過程的調控。有研究表明抑制Notch信號衰減的內脂素可以有效地誘導體內體外的血管生成［4］。Notch能夠有效地調控VEGF受體的表達，該受體是血管密度的關鍵調控因子，Notch信號的缺失或異位激活可分別導致血管密度的增加或者減低［5］。Notch1在調節(jié)內皮細胞VEGFR-1中扮演重要角色，其功能可能表現(xiàn)為血管生成及病理生理等方面［6］。王拯等［7］認為Notch信號通路與其他信號通路，如血管內皮生長因子，BMP-SMAD及細胞外基質分子交互作用共同協(xié)調血管新生的過程。當人體急性創(chuàng)傷或急性缺血再灌注損傷時，阻斷Notch信號通路可以促進血管生成［8］。內皮細胞中的Notch信號活性與VEGF-VEGFR/Dll4-Notch這一信號回路處于動態(tài)平衡，從而可以保證正常的血管萌芽和血管網(wǎng)絡構建。此信號還能夠影響細胞外基質成分的生成和分布，具有穩(wěn)定血管壁的作用，進而調控動靜脈分化的作用［9］。Notch信號分子在血管內皮細胞中均有良好的表達，能夠誘導內皮細胞發(fā)生、分化［10］。激活Jagged1/Notch3可以促進新生血管生成，提高缺血區(qū)域的血流灌注［11］。激活Dll4同樣可以促進缺血區(qū)的血管生成［12］。

Sonic hedgehog（Shh）信號通路。范層層［13］等觀測到缺血性腦卒中可以上調Shh信號通路成分在大鼠側腦室下帶（SVZ）區(qū)的表達，提示Shh信號通路可能對于參與卒中后神經(jīng)再生的機制具有調控作用。Renault等［14］發(fā)現(xiàn)，Shh可以促進毛細血管形態(tài)發(fā)生，誘導內皮細胞遷移，并且在內皮細胞上Shh是通過Rho途徑而非經(jīng)典的Gli途徑調節(jié)血管生成。

其他信號通路。在神經(jīng)細胞中JNK通路隨著p-MKK4、p-JNK和p-c-Jun表達增加而被激活，調節(jié)JNK信號通路在介導細胞凋亡中可以發(fā)揮重要的作用［15］。Toll樣受體（Toll like receptors，TLRs）作為炎癥信號受體，其信號通路在腦缺血發(fā)生后引發(fā)的炎癥級聯(lián)反應過程中起到重要作用，與炎癥介質表達關系密切［16］。武菲等［17］等發(fā)現(xiàn)，經(jīng)典Wnt信號通路抑制劑Dkk-1參與缺血神經(jīng)損傷的病理生理過程，Wnt信號在調節(jié)成體神經(jīng)干細胞對稱性分裂中發(fā)揮作用。薛金龍等［18］研究表明大鼠造模后可激活了Wnt信號通路發(fā)揮保護神經(jīng)，促進神經(jīng)發(fā)生的作用。

2　針灸對血管新生相關信號通路的影響

體針。姚建寧等［19］認為曲池、足三里等穴位可以明顯的改善MCAO大鼠的神經(jīng)功能缺損癥狀，降低腦梗死范圍，炎癥反應能夠明顯的緩解，電針調控NF-KB信號通路，抑制炎癥因子分泌來實現(xiàn)對腦缺血的治療等機制可能與此相關。胥虹貝等［20］用線栓法建立大鼠大腦中動脈阻塞腦缺血模型取“百會”穴及左側“四關”穴為相應電針穴位，研究表明電針可通過上調局灶腦缺血/再灌注大鼠腦缺血皮質區(qū)eNOS和金屬基質蛋白酶的表達，從而促進血管再生。徐曉明等［21］等發(fā)現(xiàn)，電針水溝穴能促進缺血大鼠腦內血管內皮細胞CD34的表達，促進微血管密度的增加，故增加了血管新生的力度。丁玲等［22］以線栓法復制大鼠MCAO模型，使用電針對百會、水溝、足三里穴進行刺激，使大鼠梗死灶周圍BFGF表達顯著上調，ES表達明顯下降，提示針灸可能通過雙向調節(jié)血管生成促進因子及血管生成抑制因子，促進血管新生，改善缺血區(qū)半暗帶的血供，促進缺血后的神經(jīng)功能恢復。張珊珊等［23］采用線栓法制備SD大鼠局灶腦缺血再灌注模型，取雙側“合谷”穴為電針穴位可提高p-AKT1表達水平，加強PI3K/AKT通路激活，促進EPCs歸巢至缺血組織區(qū)，從而促進血管再生。

頭針。唐強等［24］采用頭穴叢刺療法與康復治療及模型組相對比，針康治療組mNSS評分降低（P＜0.05），bFGF蛋白表達升高（P＜0.05），AS蛋白表達降低（P＜0.05）。針康法可通過上調bFGF蛋白表達和下調AS蛋白表達，促使血管新生，減輕缺血性腦損傷，加快腦卒中后期受損腦組織的修復，從而促進缺血性腦卒中神經(jīng)功能恢復。朱路文等［25］采用頭穴叢刺與現(xiàn)代康復技術的結合，利用頭穴叢刺能夠透過顱骨，刺激大腦皮層，直達責任病灶;從而促進腦缺血區(qū)半暗區(qū)VEGF、LN的表達，進一步促進腦缺血后微血管的再生，改善血腦屏障的通透性。楊敏等［26］采用改進的線栓法制做永久性大腦中動脈閉塞模型，選取頂顳后斜線、頂顳前斜線，與模型組比較，頭皮針組各時間點大鼠腦組織VEGF含量增多，ES含量減少，得出頭針可能通過上調缺血區(qū)VEGF的表達、下調ES來引導腦缺血再灌注后的血管新生，有利于改善缺血半影區(qū)血液供應和促進神經(jīng)功能恢復。

眼針。宓丹等［27］采用改良線栓法制備局灶性腦缺血再灌注模型用眼針進行治療，定位取肝區(qū)、上焦區(qū)、下焦區(qū)、腎區(qū)。發(fā)現(xiàn)眼針可以通過上調VEGF、VEGFR2及其mRNA的表達，促進微血管新生。趙丹玉等［28］對局灶性腦缺血再灌注大鼠模型進行眼針刺激能夠抑制TLR4及MyD88的表達，抑制炎癥因子的表達而減輕其炎癥反應，從而達到對腦皮層組織的保護目的。許秀洪等［29］參照Longa法復制局灶腦缺血再灌注模型，表里經(jīng)配穴電針組取表里經(jīng)配穴的足三里、三陰交和尺澤、合谷行電針治療。發(fā)現(xiàn)表里經(jīng)配穴法可以調控JNK信號通路，下調p-JNK表達，減輕細胞凋亡，保護大腦神經(jīng)元。

3　小　結

近年來，越來越多的研究發(fā)現(xiàn)多種信號通路在血管生成中發(fā)揮重要作用，但目前對缺血性腦卒中的研究多以實驗為主，臨床研究較少，因此還應更多地結合現(xiàn)代科學技術，在不違背醫(yī)學倫理學的前提下開展臨床研究，從而為治療缺血性腦血管疾病提供幫助。同時，針刺治療的手法多樣，穴位各異，故應以中醫(yī)基礎理論為指導結合現(xiàn)代科學技術手段，運用循證醫(yī)學方法，尋找出有效又系統(tǒng)規(guī)范的針灸治療方案，提高腦梗死治療效果。

［1］ 沈俊明，詹宇豪，張文麗.太沖、合谷穴對腦缺血作用機制的研究進展［J］.醫(yī)學綜述，2016，22（2）：329-331.

［2］ CHIBA S.Notch signaling in stem cell systems［J］. Stem Cells，2006，24（11）：2437-2447.

［3］ 婁遠蕾，匡助才，魯友明，等.大鼠腦缺血后Notch分子上調調控血管新生［J］.基礎醫(yī)學與臨床，2015，35（1）：97-98.

［4］ YH BAE，HJ PARK，SR KIM，et al.Notch1 mediates visfatin-induced FGF-2 up-regulation and endothelial angiogenesis［J］.Cardiovasc Res，2011，89（2）：436-445.

［5］ GRIDLEY T. Notch signaling in vascular development and physiology［J］.Development，2007，134（15）：2709-2718.

［6］ Y FUNAHASHI，CJ SHAWBER，M VORONTCHIKHIN，et al.Notch regulates the angiogenic response via induction of VEGFR-1［J］. Blood，2010，116（26）：6133-6143

［7］ 王拯，張莛蔚，韓向龍.Notch信號通路調控下的血管形成［J］.中國組織工程研究，2015，19（46）：7498-7503.

［8］ 董麗，孔令蕊，王恬.Notch信號通路對免疫細胞的調節(jié)作用［J］.中國生物化學與分子生物學報，2013，29（12）：1106-1112.

［9］ 劉虎仙，雷永紅，韓巖.Notch信號通路在組織血管化中的作用［J］.中國美容醫(yī)學，2015，24（8）：83-86.

［10］ ISO T，HAMAMORI Y，KEDES L.Notch signaling in vascular development［J］.Arterioscler Thromb Vasc Biol，2003，23（4）：543-553.

［11］ ZENG H，LI L，CHEN J X.Overexpression of angiopoietin-1 increases CD133+/c-kit+ cells and reduces myocardial apoptosis in db /db mouse infarcted hearts［J］.PLoS One，2012，7（4）：e35905.

［12］ HUANG F，ZHU X，HU X Q，et al.Mesenchymal stem cells modified with miR-126 release angiogenic factors and activate Notch ligand Delta-like-4，enhancing ischemic angiogenesis and cell survival［J］. Int J Mol Med，2013，31（2）：484-492.

［13］ 范層層，楊琴，陳娜，等.局灶缺血性腦卒中大鼠側腦室下帶Shh信號通路成分的動態(tài)表達［J］.生命科學研究，2011，15（6）：524-529.

［14］ RENAULT MA，RONCALLI J，TONGERS J，et al.Sonic hedgehog induces angiogenesis via Rho kinase-dependent signaling in endothelial cells［J］.J Mol Cell Cardiol，2010，49（3）：490-498.

［15］ ANANDA SS，BABU PP.c-Jun N terminal kinases （JNK）are activated in the brain during the pathologof experimental cerbral malaria［J］. Neurosci Lett，2011，488（2）118-122.

［16］ ELTZSCHIG HK，ECKLE T.Ischemia and reperfusion-from mechanism to translation.Nat Med，2011，7（11）：1391-1401.

［17］ 武菲，張秋玲.神經(jīng)干細胞與腦卒中后的神經(jīng)發(fā)生［J］.生理科學進展，2012，43（3）：221-226.

［18］ 薛金龍，孫芳玲，劉婷婷，等.莫諾苷對局灶性腦缺血再灌注大鼠Wnt7a和APC表達的影響［J］.中國比較醫(yī)學雜志，2014，24（9）：9-13.

［19］ 姚建寧，王鮮，柳維林，等.電針激活大腦中動脈閉塞大鼠miRNA調控NF-κB信號通路的機制研究［J］.中國康復醫(yī)學雜志，2016，31（4）：388-393.

［20］ 胥虹貝，羅勇，朱艷含，等.電針通過eNOS促進局灶腦缺血/再灌注大鼠腦缺血皮質區(qū)血管再生［J］.中國組織化學與細胞化學雜志，2015，24（5）：381-387.

［21］ 徐曉明，尤艷利，舒適，等.電針對MCAO大鼠缺血半暗帶血管新生的影響［J］.中國藥物經(jīng)濟學，2014，9（z1）：31-33.

［22］ 丁玲，陳邦國，張曉明，等.電針對局灶性腦缺血再灌注大鼠腦組織bFGF、ES表達的影響［J］.光明中醫(yī)，2012，27（5）：879-881.

［23］ 張珊珊，羅勇，武磊.PI3K/AKT通路在電針促進局灶腦缺血再灌注大鼠腦內血管再生中的作用［J］.第三軍醫(yī)大學學報，2010，32（23）：2488-2491.

［24］ 唐強，姜云飛，朱路文，等.針康法對局灶性腦缺血大鼠神經(jīng)功能缺損及缺血區(qū)堿性成纖維細胞生長因子、血管抑制素蛋白表達的影響［J］.中國康復理論與實踐，2015，21（10）：1151-1155.

［25］ 朱路文，唐強，李季，等.針康法對腦缺血大鼠腦組織VEGF、LN表達的影響［J］.針灸臨床雜志，2015，31（10）：71-74.

［26］ 楊敏，陳邦國，梁超.頭針對大鼠局灶性腦缺血再灌注后腦組織VEGF及ES表達的影響［J］.中國中醫(yī)急癥，2014，23（6）：1012-1013，1052.

［27］ 宓丹，馬賢德，王建.眼針對局灶性腦缺血再灌注大鼠VEGF/VEGFR系統(tǒng)表達的影響［J］.山東大學學報（醫(yī)學版），2013，51（2）：22-26，32.

［28］ 趙丹玉，苗蘭英，曹陽，等.眼針對腦缺血再灌注損傷模型大鼠腦皮層組織TLR4、MyD88表達的影響［J］.中國老年學雜志，2016，36（7）：1547-1549.

［29］ 許秀洪，周國平，李春，等.表里經(jīng)配穴法對腦缺血再灌注損傷大鼠海馬細胞凋亡及JNK信號通路的影響［J］.廣州中醫(yī)藥大學學報，2015，32（1）：76-80，186.

R271.917.5

A

1004-2814（2016）10-1039-02

曹 奕

2016-05-23