蛋白酶體REGγ對雄性小鼠生精功能的影響

李寧，李磊，趙登攀，李曉濤，張曉峰*

(1.上海市中醫(yī)醫(yī)院實驗中心，上海　200071；2. 華東師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院 上海　200241)

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·實驗研究·

蛋白酶體REGγ對雄性小鼠生精功能的影響

李寧1，李磊2，趙登攀2，李曉濤2，張曉峰1*

(1.上海市中醫(yī)醫(yī)院實驗中心，上海200071；2. 華東師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院 上海200241)

【摘要】目的研究蛋白酶體REGγ對雄性小鼠生精功能的影響。方法利用免疫蛋白印跡檢測小鼠睪丸中REGγ的表達；通過組合酶消化法分離精原干細胞，流式細胞儀檢測精原干細胞中c-kit及α6-integrin的表達；通過小鼠精子分析儀檢測REGγ基因敲除雄鼠的精子濃度和精子活力；進行小鼠合籠實驗檢測正常雌鼠和REGγ基因敲除雄鼠合籠后的生育力。結(jié)果REGγ在小鼠睪丸中高表達；應(yīng)用組合酶消化法得到了純度70%的精原干細胞；REGγ基因敲除雄鼠精原干細胞的c-kit及α6-integrin表達量均顯著低于野生型組(P<0.05)；REGγ基因敲除型雄鼠的平均精子濃度(37.1×106/ml)和精子活力(54%)均顯著低于野生型雄鼠(75.4×106/ml、74%)(P<0.05)；REGγ基因敲除型雄鼠與野生型雌鼠合籠后的產(chǎn)仔數(shù)均低于野生型雄鼠(P<0.05)。結(jié)論蛋白酶體REGγ參與調(diào)節(jié)雄鼠的生精功能。

【關(guān)鍵詞】REGγ；生精；精原干細胞

(JReprodMed2016，25(3)：242-247)

11S蛋白酶體激活因子γ(REGγ)系蛋白酶體激活因子REG家族成員蛋白，通過非泛素和ATP依賴途徑催化蛋白酶體20S的蛋白水解活性[1-2]。過去認(rèn)為，REGγ只能促進蛋白酶體降解一些細胞內(nèi)的短肽，但是不能降解細胞內(nèi)完整的蛋白分子[3]，此觀念一度影響了科學(xué)家對REGγ的重視程度。2006年，Li等[3]首次發(fā)現(xiàn)了REGγ-20S蛋白酶體的第一個細胞內(nèi)完整的蛋白分子底物SRC-3，隨后，又相繼發(fā)現(xiàn)了另外一些細胞內(nèi)完整的蛋白分子底物，如細胞周期抑制蛋白p21、p16和p14等[4-5]，促進了對REGγ功能的認(rèn)識。越來越多的證據(jù)顯示REGγ可能在許多生理以及病理過程中發(fā)揮重要的生物學(xué)功能。REGγ通過不同機制調(diào)控p53的穩(wěn)定性及活性，進而發(fā)揮特定的生物學(xué)功能[6-7]；……