氯芬黃敏片中人工牛黃鑒別方法改進(jìn)

黃東萍，何　潔，張國柱，杜遠(yuǎn)東，黃　文

(漢中市食品藥品檢驗檢測中心，陜西 漢中　723000)

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氯芬黃敏片中人工牛黃鑒別方法改進(jìn)

黃東萍，何潔，張國柱，杜遠(yuǎn)東，黃文

(漢中市食品藥品檢驗檢測中心，陜西 漢中723000)

摘要：目的改進(jìn)氯芬黃敏片中人工牛黃鑒別方法。方法采用薄層色譜方法鑒別人工牛黃、膽酸。結(jié)果薄層展開劑采用正己烷—乙酸乙酯—冰醋酸—甲酸系統(tǒng)適用。結(jié)論該方法操作簡便，能較全面評價氯芬黃敏片中人工牛黃的質(zhì)量。

關(guān)鍵詞：氯芬黃敏片；人工牛黃；鑒別；薄層色譜

人工牛黃由牛膽粉、膽酸、豬去氧膽酸、牛磺酸、膽紅素、膽固醇、微量元素等加工而成[1]，或為貝斯素、膽酸、豬去氧膽酸、膽紅素、膽固醇、無機(jī)鹽等配制而成[2]，貝斯素系牛膽粉70%、牛磺酸30%[3]，具有清熱解毒，化痰定驚的功效[4]。國家藥品標(biāo)準(zhǔn)收載的氯芬黃敏片是含馬來酸氯苯那敏、人工牛黃、雙氯芬酸鈉的解熱鎮(zhèn)痛類復(fù)方制劑，每片含人工牛黃15 mg，對人工牛黃中膽酸的鑒別方法是取1片用60%冰醋酸溶解后，取上清液加新制糠醛溶液和硫酸溶液(1→2)，搖勻，70℃水浴中加熱，溶液應(yīng)顯藍(lán)紫色[5]。糠醛易聚合，使用前須蒸餾純化，操作較繁瑣。加上人工牛黃價格較高，市場出現(xiàn)偽品和次品，僅通過理化反應(yīng)無法評價復(fù)方制劑中人工牛黃藥材的質(zhì)量，因此筆者探索采用薄層色譜法進(jìn)行鑒別。

1儀器與試藥

超聲儀(AS10000205，天津奧特賽恩斯儀器有限公司)、微量注射器(50 μL，上海注射器三廠)、硅膠G薄層層析板(天津思利達(dá)色譜技術(shù)開發(fā)公司)、電子天平(CPA225D，德國賽多利斯)。

人工牛黃對照藥材(中國食品藥品檢定研究院，121197-201003)，膽酸對照品(中國食品藥品檢定研究院，100078-200414)。

正己烷、乙酸乙酯、冰醋酸、甲酸為分析純。

2方法與結(jié)果

2.1對照品溶液的制備取膽酸對照品適量，精密稱定加甲醇制成每1 mL含1 mg的溶液。

2.2對照藥材溶液的制備取人工牛黃對照藥材10 mg，加甲醇適量，超聲處理使充分溶解，再加甲醇至5 mL，搖勻，靜置，取上清液作為對照藥材溶液。

2.3供試品溶液的制備取三批氯芬黃敏片的細(xì)分約一片量(相當(dāng)于人工牛黃15 mg)加30 mL甲醇，超聲處理使溶解，濾過，取濾液為供試品溶液。

2.4陰性樣品溶液的制備根據(jù)氯芬黃敏片處方和工藝除去人工牛黃制備沒有人工牛黃的陰性樣品，同“2.3”法制備陰性樣品溶液。

2.5薄層色譜試驗吸取上述4種溶液各5 μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正己烷—乙酸乙酯—冰醋酸—甲酸(9∶6∶2∶0.4)為展開劑展開，取出，晾干，在紫外燈(365 nm)下檢視，供試品色譜中，在與膽酸和人工牛黃對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(圖1)；噴以10%磷鉬酸乙醇溶液，于105℃加熱至斑點清晰，供試品色譜中，在與膽酸和人工牛黃對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(圖2)。

圖1　紫外燈下檢視

注：1 陰性對照；2～4 供試品；5 對照藥材；6 對照品。

圖2　10%磷鉬酸顯色

注：1 陰性對照；2～4 供試品；5 對照藥材；6 對照品。

3討論

糠醛為無色或淡黃色油狀液體，置空氣中或見光易變?yōu)樽厣玔6]，影響鑒別項中的理化顯色，使用前必須蒸餾，且現(xiàn)用現(xiàn)制，操作較繁瑣。

人工牛黃的主要成分為牛膽粉、膽酸、豬去氧膽酸、牛磺酸、膽紅素、膽固醇，以人工牛黃為對照藥材、膽酸為對照品，采用薄層色譜法進(jìn)行鑒別，較糠醛鑒別試驗可以更全面評價氯芬黃敏片中人工牛黃的品質(zhì)。

薄層試驗的展開系統(tǒng)參考預(yù)試了《中國藥典2010年版一部》中人工牛黃、復(fù)方牛黃消炎膠囊、牛黃清心丸、安宮牛黃丸、牛黃上清片等多品種項下人工牛黃的薄層鑒別展開系統(tǒng)，牛黃清心丸[7]異辛烷—乙酸乙酯—冰醋酸系統(tǒng)、牛黃上清片[8]正己烷—乙酸乙酯—冰醋酸—甲酸系統(tǒng)均有較好的分離效果，正己烷—乙酸乙酯—冰醋酸—甲酸系統(tǒng)展開的斑點更集中。

除人工牛黃外，體外培育牛黃也是天然牛黃代替品，體外培育牛黃為牛的新鮮膽汁作母液，加入去氧膽紅素、膽酸、復(fù)合膽紅素鈣等制成[9]，解熱作用強(qiáng)度與天然牛黃相似[10]、抗驚厥鎮(zhèn)痛作用明確[11-13]，張軼華等[14]采用薄層色譜法以異辛烷—乙酸乙酯—冰醋酸為展開系統(tǒng)，對小兒氨酚黃那敏顆粒中人工牛黃和體外培育牛黃進(jìn)行快速鑒別。因未獲得體外培育牛黃，所以未驗證復(fù)方制劑中體外培育牛黃與人工牛黃在正己烷—乙酸乙酯—冰醋酸—甲酸系統(tǒng)的區(qū)別。

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Improved identification method of artificial Calculus Bovis in Compound Dicolfenac Sodium and Chlorphenamine Maleate Tablets

HUANG Dong-ping,HE Jie,ZHANG Guo-zhu,et al

(FoodandDrugControlCenter,Hanzhong,Shaanxi723000,China)

Abstract:ObjectiveTo improve the identification of Artificial Calculus Bovis in Compound Diclofenac Sodium and Chlorphenamine Maleate Tablets.Methods We adopted thin layer chromatography to identify artificial Calculus Bovis and cholic acid. Results The system of n-hexane- ethyl acetate- acetic acid-methanoic acid is feasible. Conclusions The method is simple and can control the quality of artificial Calculus Bovis in compound preparation comprehensively.

Key words:Compound Diclofenac Sodium and Chlorphenamine Maleate Tablets；artificial Calculus Bovis；identification；TLC

(收稿日期：2015-10-22，修回日期：2016-01-18)◇臨床醫(yī)學(xué)◇

doi:10.3969/j.issn.1009-6469.2016.03.016