降糖解郁茶飲防治糖尿病并發(fā)抑郁癥的作用

王君明　王　月　王沙沙　張月月　張敏杰　崔　瑛　廖培培　楊月圓

(河南中醫(yī)學(xué)院呼吸疾病診療與新藥研發(fā)河南省協(xié)同創(chuàng)新中心，河南　鄭州　450046)

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降糖解郁茶飲防治糖尿病并發(fā)抑郁癥的作用

王君明王月1王沙沙1張月月張敏杰1崔瑛廖培培1楊月圓1

(河南中醫(yī)學(xué)院呼吸疾病診療與新藥研發(fā)河南省協(xié)同創(chuàng)新中心，河南鄭州450046)

〔摘要〕目的考察降糖解郁茶飲防治糖尿病抑郁癥作用。方法雄性昆明小鼠隨機分為正常組、模型組、陽性藥〔鹽酸二甲雙胍(DMBG，100 mg/kg)、鹽酸氟西汀(FH，10 mg/kg)聯(lián)合用藥〕和降糖解郁茶飲低、中、高劑量組(1、2、4 g/kg)，連續(xù)灌胃(ig)給藥21 d，1次/d，末次給藥后1 h進行糖水消耗實驗(SCT)、開場實驗(OFT)、強迫游泳實驗(FST)和血糖測試。結(jié)果與正常組比較，模型組小鼠血糖顯著升高、糖水偏愛顯著降低、游泳不動時間顯著增加、OFT運動時間和站立次數(shù)顯著降低(P<0.05或P<0.01)；與模型組比較，降糖解郁茶飲和DMBG+FH均可使以上異常指標(biāo)顯著改善，二者相比無顯著差異。結(jié)論降糖解郁茶飲具有防治糖尿病并發(fā)抑郁癥的作用，且與陽性藥DMBG+FH作用相當(dāng)。

〔關(guān)鍵詞〕降糖解郁茶飲；糖尿病并發(fā)抑郁癥；糖水偏愛；強迫游泳實驗；開場實驗

抑郁癥是糖尿病常見并發(fā)癥之一，糖尿病患者抑郁癥發(fā)病率是正常人的3倍。國外文獻報道，糖尿病病人中60%～75%伴有抑郁情緒，其中10%～35%為重度抑郁〔1,2〕。就糖尿病而言，沉重的精神壓力、不良情緒不僅會使血糖升高，降低治療的依從性，還會加速心、腎等并發(fā)癥的發(fā)生，對病情的預(yù)后不利。反之，血糖控制不好，病情加重，又會導(dǎo)致病人精神痛苦、悲觀等，加重他們的抑郁癥狀。此外，重度抑郁還會引起悲觀和絕望，甚至出現(xiàn)自殘和自殺行為。本研究旨在考察降糖解郁茶飲防治糖尿病并發(fā)抑郁癥的藥理作用，為其開發(fā)奠定前期實驗基礎(chǔ)。

1材料與方法

1.1動物昆明(KM)小鼠，雄性，SPF級，體質(zhì)量18～22 g，由河南省實驗動物中心提供〔SCXK(豫)2010-0002〕。

1.2試藥鹽酸二甲雙胍片(DMBG)：上海信宜藥廠有限公司，批號48140908；鹽酸氟西汀(FH)：常州四藥制藥有限公司，批號20130701；鏈脲佐菌素(STZ)：Sigma，批號20150225；蔗糖(分析純)：天津致遠化學(xué)試劑有限公司，批號2014111061；枸櫞酸(分析純)：天津致遠化學(xué)試劑有限公司，批號：20150201；氫氧化鈉(分析純)：天津市恒興化學(xué)試劑制造有限公司，批號20140723；生理鹽水：河南太龍藥業(yè)股份有限公司，批號13012152；血糖試紙：江蘇魚躍醫(yī)療設(shè)備股份有限公司，魚躍；毛冬青：經(jīng)本校藥學(xué)院生藥學(xué)科陳隨清教授鑒定為冬青科植物毛冬青IlexpubescensHook.etArn.的干燥根；合歡花：經(jīng)本校藥學(xué)院生藥學(xué)科陳隨清教授鑒定為豆科植物合歡AlbizziajulibrissinDurazz.的干燥花序；梔子：經(jīng)本校藥學(xué)院生藥學(xué)科陳隨清教授鑒定為茜草科植物梔子GardeniajasminoidesEllis的干燥成熟果實；牡丹皮：經(jīng)本校藥學(xué)院生藥學(xué)科陳隨清教授鑒定為毛茛科植物牡丹PaeoniasuffruticosaAndr.的干燥根皮。

1.3儀器血糖儀：江蘇魚躍醫(yī)療設(shè)備股份有限公司，魚躍710，悅準(zhǔn)TMI型；大小鼠開場活動實驗系統(tǒng)：成都泰盟軟件有限公司，OFT-100；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀：上海愛朗儀器有限公司，EYELA，N-1100；TDL-40B臺式離心機：上海安亭科學(xué)儀器廠；BS210S型電子天平：北京塞多利斯天平有限公司；XK96-B快速混勻器：姜堰市新康醫(yī)療器械有限公司；FW-100高速萬能粉碎機：北京中興偉業(yè)儀器有限公司。

1.4方法

1.4.1降糖解郁茶飲制備將降糖解郁茶用50倍(W/V=1∶50)開水浸泡6次，每次5 min，合并每次浸泡液(用離心機分離上清液，4 000 r/min，離心10 min)，減壓回收水，使藥液濃度以生藥計含降糖解郁茶1 g/ml。

1.4.2動物處理及血糖測試用0.1 mol/L枸櫞酸鈉緩沖液(pH4.2)配制STZ注射液，小鼠在禁食16 h后(不禁水)一次性腹腔注射(ip) STZ(150 mg/kg)造糖尿病模型〔3〕；造模后的小鼠經(jīng)過72 h的自由飲食后，于尾靜脈取血用血糖儀測定血糖值(血糖>11.1 mmol/L為糖尿病模型制作成功)。篩選血糖>11.1 mmol/L的小鼠再予慢性不可預(yù)知溫和應(yīng)激(CUMS)〔4〕，每天隨機給予一種應(yīng)激。CUMS主要包括夾尾3 min(距尾尖1 cm)、禁水24 h(8∶00~8∶00)、潮濕飼養(yǎng)24 h(將200 ml水加入有鋸末的籠底，24 h)、禁食24 h(8∶00~8∶00)、束縛(5 min)、搖晃(1次/s，15 min)和冷水(8℃)游泳7 min；陽性藥(DMBG-FH)組采用DMBG 100 mg/kg和FH 10 mg/kg聯(lián)合用藥連續(xù)灌胃(ig)，降糖解郁茶低、中、高劑量分別為1、2、4 g/kg。模型組和正常組只ig給予等量溶媒(0.5%CMC-Na)，其中正常組不給予造模。每天CUMS的同時，給予各受試藥物或溶媒，連續(xù)21 d，末次給藥后1 h進行行為學(xué)測試；行為學(xué)測試結(jié)束后立即尾靜脈取血，測試血糖值。陽性藥及各受試保健茶均用0.5% CMC-Na溶解或混懸至所需給藥濃度。

1.4.3糖水消耗試驗(SCT)小鼠于實驗前24 h訓(xùn)練適應(yīng)含糖飲水，在禁食禁水12 h后進行SCT。測試時，所有小鼠單籠飼養(yǎng)，在安靜的房間進行，每籠即每只小鼠放兩個水瓶(內(nèi)分別裝入清水和1%蔗糖水，體積均為100 ml，兩水瓶位置隨機放置)，2 h后取走水瓶并測量體積(測試前后瓶中水量之差)，測定2 h內(nèi)小鼠1%蔗糖水?dāng)z入體積及清水?dāng)z入體積，按公式計算每只動物的糖水偏愛。計算公式：糖水偏愛=〔糖水?dāng)z入體積/(糖水?dāng)z入體積+清水?dāng)z入體積)×100%〕。

1.4.4開場試驗(OFT)采用大小鼠開場活動實驗系統(tǒng)OFT-100進行實驗。實驗時將小鼠放入中心方格內(nèi)，記錄小鼠在5 min內(nèi)的運動距離和站立次數(shù)。

1.4.5強迫游泳實驗(FST) 參考Porsolt等〔5〕報道的方法，將小鼠單獨放入高20 cm、直徑14 cm的圓柱形玻璃缸中，缸內(nèi)水深10 cm，水溫(25±2)℃，從小鼠入水后計時6 min，記錄后4 min內(nèi)游泳累計不動時間(指小鼠在水中停止掙扎，或顯示漂浮狀態(tài)，僅有微小的肢體運動以保持頭部浮在水面)。

2結(jié)果

2.1降糖解郁茶飲對糖尿病并發(fā)抑郁癥小鼠空腹血糖的影響與正常組〔(5.9±1.2)mmol/L〕比較，模型組小鼠空腹血糖〔(14.9±2.9)mmol/L〕顯著升高(P<0.01)，表明STZ造糖尿病模型成功。與模型組比較，在給予受試藥物3 w后，降糖解郁茶飲低、中、高劑量和陽性藥DMBG-FH均可使高血糖小鼠血糖顯著降低〔分別為(9.9±1.8)、(8.6±1.7)、(8.1±1.6)、(8.3±1.6)mmol/L〕(均P<0.01)，且降糖解郁茶飲與DMBG-FH相比均無明顯差異(P>0.05)，提示降糖解郁茶飲具有降血糖作用，且與陽性藥DMBG-FH作用相當(dāng)。

2.2降糖解郁茶飲對糖尿病并發(fā)抑郁癥小鼠糖水偏愛的影響與正常組〔(58.3±14.5)%〕比較，模型組小鼠糖水偏愛〔(37.7±9.2)%〕顯著降低(P<0.01)。與模型組比較，在給予受試藥物3 w后，降糖解郁茶飲中、高劑量和陽性藥DMBG-FH均可使小鼠糖水偏愛升高〔分別為(50.9±12.6)%、(54.6±13.3)%、(49.8%±12.1)%,〕(分別P<0.05、P<0.01、P<0.01)，且降糖解郁茶飲(2、4 g/kg)與DMBG-FH相比無明顯差異。降糖解郁茶飲低劑量組為(42.4±10.8)%。

2.3降糖解郁茶飲對糖尿病并發(fā)抑郁癥小鼠OFT中運動時間和站立次數(shù)的影響與正常組比較〔(219.9±17.5)s、(19.5±7.5)次〕，模型組小鼠在OFT運動時間〔(188.7±15.2)s〕和站立次數(shù)〔(10.9±3.5)次〕均顯著降低(均P<0.01)。與模型組比較，在給予受試藥物3 w后，降糖解郁茶飲中、高劑量和陽性藥DMBG-FH均可使小鼠在OFT運動時間〔(213.6±26.6)、(217.3±27.4)、(216.5±14.5)s〕(分別P<0.05、P<0.01、P<0.01)和站立次數(shù)〔(18.0±5.8)、(18.3±6.3)、(17.9±5.7)次〕(均P<0.01)顯著升高，且降糖解郁茶飲與DMBG-FH相比無明顯差異(P>0.05)；此外，降糖解郁茶飲低劑量(1 g/kg)亦可顯著升高小鼠在OFT的站立次數(shù)〔(16.2±5.0)次〕(P<0.05)。運動時間(205.2±19.6)s無明顯變化。

2.4降糖解郁茶飲對糖尿病并發(fā)抑郁癥小鼠FST不動時間的影響與正常組〔(98.1±21.3)s〕比較，模型組小鼠在FST游泳不動時間〔(59.2±28.8)s〕顯著升高(P<0.01)。與模型組比較，在給予受試藥物3 w后，降糖解郁茶飲低、中、高劑量和陽性藥DMBG-FH均可使小鼠在FST不動時間顯著降低〔分別為(129.9±25.5)、(112.6±18.5)、(105.7±14.3)、(115.5±18.9)s〕(分別P<0.05、P<0.01、P<0.01、P<0.01)，且降糖解郁茶飲與DMBG-FH相比無明顯差異(P>0.05)。

3討論

本研究組在中醫(yī)藥理論的指導(dǎo)下，將毛冬青、合歡花、牡丹皮和梔子配方組成降糖解郁茶。其中，毛冬青為冬青科植物毛冬青IlexpubescensHook.etArn.的干燥根，味甘、微苦，性平，歸肺、肝、大腸經(jīng)，具活血通絡(luò)、清熱解毒、利水滲濕之功效，具有降壓、抗凝、抗腦組織缺血缺氧損傷、抗炎、調(diào)節(jié)免疫功能等廣泛的藥理作用；合歡花為豆科植物合歡AlbizziajulibrissinDurazz.的干燥花序，具有安神解郁、滋陰補陽、活血、消癰腫之功效，適用于忿怒憂郁、虛煩不安、健忘失眠等癥；梔子為茜草科植物梔子GardeniajasminoidesEllis的干燥成熟果實，藥性苦、寒，歸心、肺、三焦經(jīng)，具有瀉火除煩、清熱利濕、涼血解毒、外用消腫止痛之功效，用于熱病心煩、濕熱黃疸、淋證澀痛、血熱吐衄、目赤腫痛、火毒瘡瘍、外治扭挫傷痛等癥的治療；牡丹皮為毛茛科植物牡丹PaeoniasuffruticosaAndr.的干燥根皮，藥性苦、辛、微寒，歸心、肝、腎經(jīng)，清熱涼血、活血化瘀，用于熱入營血、溫毒發(fā)斑、吐血衄血、夜熱早涼、無汗骨蒸、經(jīng)閉痛經(jīng)、跌撲傷痛、癰腫瘡毒等癥的治療。以上四藥為主要原料組成的降糖解郁茶飲，具有清熱、涼血、活血、利濕、疏肝解郁、瀉火除煩、滋陰等多種功效，有望用于臨床中多種類型的糖尿病并發(fā)抑郁癥的防治。本研究結(jié)果顯示，STZ引起了小鼠血糖顯著升高，進一步通過CUMS引起了小鼠的抑郁樣行為，綜合提示小鼠糖尿病抑郁癥模型復(fù)制成功；給予降糖解郁茶飲和陽性藥DMBG-FH 21 d后，過高血糖被顯著降低、糖水偏愛顯著升高、游泳不動時間顯著減少、OFT運動時間和站立次數(shù)均被顯著升高，且本保健茶飲與DMBG-FH各指標(biāo)相比均無明顯差異，綜合提示降糖解郁茶飲具有防治糖尿病并發(fā)抑郁癥作用，且與DMBG-FH作用相當(dāng)?，F(xiàn)代研究表明，毛冬青煎劑和毛冬青甲素具有防治糖尿病并發(fā)癥作用〔6,7〕，合歡花總黃酮具有抗抑郁作用〔8〕，梔子中梔子苷具有降糖〔9〕、京尼平具有抗抑郁作用〔10〕，牡丹皮中丹皮酚具有降糖〔11〕、水提物具有抗抑郁作用〔12〕。降糖解郁茶飲防治糖尿病并發(fā)抑郁癥的作用，可能與其組成藥物毛冬青、合歡花、梔子和牡丹皮中多種活性成分綜合作用有關(guān)。

4參考文獻

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〔2015-08-03修回〕

(編輯曲莉)

Hypoglycemic and antidepressant-like effects of jiangtang jieyu tea

WANG Jun-Ming,WANG Yue,WANG Sha-Sha,etal.

Collaborative Innovation Center for Respiratory Disease Diagnosis and Treatment & Chinese Medicine Development of Henan Province,Henan University of Traditional Chinese Medicine,Zhengzhou 450046,Henan,China

【Abstract】ObjectiveTo investigate the hypoglycemic and antidepressant-like effects of jiangtang jieyu tea(JTJYT).MethodsMale mice were divided into normal,model control,DMBG-FH as positive control,low,middle and high doses of JTJYT groups.Mice were treated with DMBG-FH,JTJYT or solvent 0.5% CMC-Na everyday for 21 days by intragastric administration(ig).Mouse sugar consumption test(SCT),forced swim test(FST),open field test(OFT) and blood glucose test(BGT) were used to observe the hypoglycemic and antidepressant-like effects of JTJYT,respectively,at 1 h after the last administration.ResultsCompared with those of normal group,blood sugar and immobility time of FST were significantly increased,and sucrose preference,moving time and standing times were all significantly decreased.Compared with those of model group,above abnormal parameters were all significantly ameliorated.ConclusionsJTJYT exerts hypoglycemic and antidepressant-like effects equal to DMBG-FH.

【Key words】Jiangtang jieyu tea;Diabetes complicated by depression;Sucrose preference;Forced swim test;Open field test

〔中圖分類號〕R587

〔文獻標(biāo)識碼〕A

〔文章編號〕1005-9202(2016)07-1542-03；

doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2016.07.003

基金項目：國家自然科學(xué)基金資助項目(81473368)；河南省高等學(xué)校青年骨干教師資助計劃項目(2014GGJS-072)；鄭州市科技領(lǐng)軍人才項目(121PLJRC534)；鄭州市科技攻關(guān)計劃項目(20150309)；河南中醫(yī)學(xué)院大學(xué)生創(chuàng)新學(xué)習(xí)項目(YXCX〔2014〕19)；河南中醫(yī)學(xué)院省屬高?；究蒲袠I(yè)務(wù)專項人才培養(yǎng)項目(2014KYYWF-QN01)

1河南中醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院

第一作者：王君明(1980-)，男，博士、博士后，副教授，主要從事中藥藥性藥效作用機制及保健品開發(fā)研究。