紫蘇子油對(duì)衰老小鼠記憶力和對(duì)正常小鼠鎮(zhèn)靜作用的影響

王亞萍　陳　鍇　符兆英　秦妮娜　白　娜

(延安大學(xué)醫(yī)學(xué)院，陜西　延安　716000)

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紫蘇子油對(duì)衰老小鼠記憶力和對(duì)正常小鼠鎮(zhèn)靜作用的影響

王亞萍陳鍇1符兆英秦妮娜1白娜

(延安大學(xué)醫(yī)學(xué)院，陜西延安716000)

〔摘要〕目的探討紫蘇子油對(duì)衰老小鼠記憶力的增強(qiáng)作用和對(duì)正常小鼠的鎮(zhèn)靜作用。方法昆明種雌性小鼠，用D-半乳糖建立亞急性衰老模型，隨機(jī)分為紫蘇子油高、中和低劑量組，每組10只，用Morris水迷宮研究紫蘇子油對(duì)小鼠記憶力的影響，用光電管法測(cè)定紫蘇子油對(duì)小鼠自主活動(dòng)的影響。結(jié)果紫蘇子油能縮短衰老小鼠水迷宮登臺(tái)潛伏期，并隨用藥時(shí)間的延長(zhǎng)作用逐漸明顯。紫蘇子油還能減低正常小鼠的自主活動(dòng)(即有鎮(zhèn)靜作用)，并無(wú)耐受現(xiàn)象。紫蘇子油還有對(duì)抗中樞神經(jīng)系統(tǒng)興奮劑和增強(qiáng)中樞神經(jīng)系統(tǒng)抑制劑的作用。結(jié)論紫蘇子油具有增強(qiáng)衰老小鼠記憶力的作用并對(duì)正常小鼠有鎮(zhèn)靜作用。

〔關(guān)鍵詞〕紫蘇子油；記憶力；自主活動(dòng)；衰老

紫蘇子油(Perilla oil)是從唇形科藥用植物紫蘇(Perilla frutesccns)的種子中提取得到的一種天然油脂，含α-亞麻酸、亞油酸、油酸、棕櫚酸、維生素E及多種微量元素，其中α-亞麻酸含量最高，達(dá)60%以上〔1〕。α-亞麻酸是人體必需脂肪酸，有“陸地上的深海魚(yú)油”之稱，在體內(nèi)可轉(zhuǎn)化為生命活性因子EPA和DHA，后者大量存在于大腦皮層和視網(wǎng)膜中，能促進(jìn)腦神經(jīng)細(xì)胞突觸生長(zhǎng)，改善記憶力〔2〕。本文研究紫蘇子油對(duì)衰老模型小鼠記憶力的影響和對(duì)正常小鼠的鎮(zhèn)靜作用。

1材料與方法

1.2水迷宮試驗(yàn)檢測(cè)紫蘇子油對(duì)衰老小鼠記憶力的影響健康雌性昆明種小鼠50只，按體重分層，隨機(jī)分組，共分為5組，每組10只，分別為：紫蘇子油高劑量組(5 ml/kg)、紫蘇子油中劑量組(2.5 ml/kg)、紫蘇子油低劑量組(1.25 ml/kg)、模型組和對(duì)照組(給藥組和模型組在實(shí)驗(yàn)前1個(gè)月即開(kāi)始注射D-半乳糖120 mg/kg)。均行灌胃給藥(模型組和對(duì)照組給予相應(yīng)體積的生理鹽水)，每日1次，連續(xù)給藥30 d。 在給藥前1 d(D0)和第19天(D19)開(kāi)始的每隔3 d，在給藥60 min后做Morris水迷宮訓(xùn)練/試驗(yàn)(注意水迷宮期間給藥不間斷)。將水迷宮水池分為4個(gè)象限，在第1象限正中離池壁33 cm處，放入直徑10 cm、高15 cm的一個(gè)站臺(tái)，站臺(tái)頂比水面低1 cm。迷宮帶有攝像機(jī)，同步記錄小鼠運(yùn)動(dòng)軌跡。每只小鼠每天訓(xùn)練4次，整個(gè)訓(xùn)練期迷宮室內(nèi)墻上和迷宮壁上有參照物，參照物位置在試驗(yàn)全程保持不變。每次將小鼠從不同象限放入水池，觀察小鼠從入水開(kāi)始至找到并登上站臺(tái)所需時(shí)間(登臺(tái)潛伏期)，小鼠找到站臺(tái)后容許其在站臺(tái)上停留15 s。如果超過(guò)了80 s小鼠仍找不到站臺(tái)，則將其引導(dǎo)到站臺(tái)上，并容許停留15 s。記錄登臺(tái)潛伏期。

1.3光電管法測(cè)定紫蘇子油對(duì)小鼠自主活動(dòng)的影響健康雌性昆明種小鼠50只，按體重分層，隨機(jī)分組，共分為5組，每組10只。分別為：紫蘇子油高劑量組(5 ml/kg)、中劑量組(2.5 ml/kg)、低劑量組(1.25 ml/kg)、安定注射液組(3 ml/kg)和對(duì)照組(等體積的生理鹽水)。均行灌胃給藥，實(shí)驗(yàn)的第1、2、3、6、10天(D1、D2、D3、D6、D10)每日給藥1次，用光電管法測(cè)定紫蘇子油對(duì)小鼠自主活動(dòng)的影響。在固定時(shí)間(上午9∶00，給藥60 min后)用YLS-1A小鼠自主活動(dòng)記錄儀記錄各組小鼠15 min內(nèi)的自主活動(dòng)次數(shù)。

1.4紫蘇子油對(duì)中樞興奮或抑制小鼠的自主活動(dòng)的影響雌性小鼠50只，按體重分層，隨機(jī)分組，共分為5組，每組10只。紫蘇子油高、中、低劑量組給藥方法與劑量同1.2；對(duì)照組、模型組給予等體積生理鹽水。60 min后除對(duì)照組小鼠腹腔注射生理鹽水外，其余各組分別給予腹腔注射硫酸苯丙胺注射液3 mg/kg、安鈉咖注射液8.6 mg/kg、苯巴比妥鈉注射液40 mg/kg，注射后30 min用YLS-1A小鼠自主活動(dòng)記錄儀分別記錄各組小鼠在15 min內(nèi)的自主活動(dòng)次數(shù)。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行方差分析、LSD-t檢驗(yàn)。

2結(jié)果

2.1紫蘇子油對(duì)衰老小鼠記憶力的保護(hù)與改善作用用藥前紫蘇子油各劑量組與模型組小鼠登臺(tái)潛伏期比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，但與對(duì)照組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，說(shuō)明小鼠衰老模型造模成功。隨著紫蘇子油給藥天數(shù)進(jìn)展，紫蘇子油縮短各給藥劑量組小鼠登臺(tái)潛伏期的作用逐漸顯現(xiàn)，與模型組比較有顯著差異，從第21天(D21)以后與對(duì)照組相比亦有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。紫蘇子油各用藥組隨用藥時(shí)間的延長(zhǎng)，登臺(tái)潛伏期逐漸縮短，以用藥后第30天(D30)作用最明顯，在低、中、高3種劑量組中，以中、高劑量組的作用較好，說(shuō)明紫蘇子油對(duì)衰老小鼠的空間學(xué)習(xí)與記憶能力有保護(hù)或改善作用，并有時(shí)間和劑量的依賴性(P<0.05,P<0.01)。見(jiàn)表1。

2.2紫蘇子油與安定注射液比較對(duì)小鼠的鎮(zhèn)靜作用安定注射液組小鼠與對(duì)照組相比，用藥第1天自主活動(dòng)減少最為明顯，但連續(xù)用藥2 d后，其作用效果即開(kāi)始明顯減弱，表示小鼠對(duì)安定注射液出現(xiàn)了耐受。紫蘇子油中劑量組與高劑量組小鼠從用藥第2天開(kāi)始均出現(xiàn)自主活動(dòng)減少，于用藥第6天以后作用更為明顯。紫蘇子油使小鼠自主活動(dòng)減少的作用不僅沒(méi)有耐受現(xiàn)象，而且效果隨用藥時(shí)間的延長(zhǎng)而增強(qiáng)，說(shuō)明紫蘇子油對(duì)正常小鼠有鎮(zhèn)靜安神作用，而且其效果優(yōu)于安定注射液(P<0.05,P<0.01)。見(jiàn)表2。

表1　紫蘇子油對(duì)衰老小鼠水迷宮登臺(tái)潛伏期的影響±s,s，n=10)

與同時(shí)點(diǎn)對(duì)照組比較：1)P<0.05；與同時(shí)點(diǎn)模型組比較：2)P<0.05，3)P<0.01

表2　紫蘇子油對(duì)小鼠自主活動(dòng)的影響，次/15 min)

與同時(shí)點(diǎn)對(duì)照組比較：1)P<0.05，2)P<0.01；與同組D0比較：3)P<0.05，4)P<0.01；與安定注射液組D1比較：5)P<0.05，6)P<0.01

2.3紫蘇子油對(duì)中樞興奮或抑制小鼠自主活動(dòng)的影響苯丙胺和安鈉咖都有中樞神經(jīng)系統(tǒng)興奮作用，可以使小鼠的自主活動(dòng)增加，但應(yīng)用了紫蘇子油的小鼠的自主活動(dòng)次數(shù)均顯著減少，說(shuō)明紫蘇子油具有對(duì)抗中樞神經(jīng)系統(tǒng)興奮劑的作用；苯巴比妥鈉是中樞抑制藥，它可使小鼠的自主活動(dòng)減少，而應(yīng)用了紫蘇子油的小鼠的自主活動(dòng)更加減少，說(shuō)明紫蘇子油能使中樞神經(jīng)系統(tǒng)抑制藥的鎮(zhèn)靜作用增強(qiáng)(P<0.05,P<0.01)，見(jiàn)表3。

表3　紫蘇子油對(duì)中樞興奮或抑制小鼠自主活動(dòng)的

與對(duì)照組比較：1)P<0.05，2)P<0.01；與模型組比較：3)P<0.05，4)P<0.01

3討論

紫蘇又名白蘇、赤蘇、香蘇、蘇麻等，是唇形科一年生草本植物，在我國(guó)各地均有分布，是我國(guó)傳統(tǒng)的藥、食兩用植物，是國(guó)家首批批準(zhǔn)的藥、食兩用植物。紫蘇子油中不飽和脂肪酸含量可達(dá)90%以上，其中以亞麻酸為主，含量最高可達(dá)65%，是目前已知植物油類中α-亞麻酸含量最高的植物油，其次為亞油酸和油酸，含量均為16%~17%〔3〕。紫蘇子油具有多種藥理作用和保健功效〔4〕，有文獻(xiàn)報(bào)道哺乳動(dòng)物發(fā)育期補(bǔ)充紫蘇子油有助于提高動(dòng)物的學(xué)習(xí)與記憶能力〔5〕。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，紫蘇子油能提高衰老小鼠記憶能力，并能降低正常小鼠自主活動(dòng)(即有鎮(zhèn)靜作用)，還能對(duì)抗中樞神經(jīng)系統(tǒng)興奮劑和中樞神經(jīng)系統(tǒng)抑制劑的作用。

紫蘇子油提高小鼠記憶力的機(jī)制可能與其所含的大量α-亞麻酸以及維生素E有關(guān)。α-亞麻酸是人體必需脂肪酸，在體內(nèi)可轉(zhuǎn)化為生命活性因子DHA，后者大量存在于大腦皮層和視網(wǎng)膜中，能促進(jìn)腦神經(jīng)細(xì)胞突觸生長(zhǎng)，能增加乙酸膽堿的釋放，參與調(diào)節(jié)LTP和突觸可塑性，故可改善學(xué)習(xí)與記憶能力〔5,6〕。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物表明，DHA為腦發(fā)育和學(xué)習(xí)記憶功能所必需〔2,7~9〕。維生素E是定位于膜上的非酶性抗氧化劑，是體內(nèi)主要的抗氧化劑〔10〕，其作用機(jī)制是：①捕獲和清除體內(nèi)各種反應(yīng)產(chǎn)生的活性自由基，降低脂質(zhì)過(guò)氧化，防止不飽和脂肪酸被氧化成氫過(guò)氧化物，從而保護(hù)細(xì)胞膜免受氧化損傷〔11,12〕。②自由基可誘導(dǎo)神經(jīng)細(xì)胞發(fā)生凋亡，而維生素E能對(duì)抗自由基引起損傷，減少神經(jīng)細(xì)胞的凋亡〔13〕。③維持細(xì)胞膜脂質(zhì)雙分子層的穩(wěn)定，維護(hù)細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)。文獻(xiàn)報(bào)道，維生素E可以改善慢性間斷性缺氧和阿爾茨海默病所導(dǎo)致的認(rèn)知障礙和記憶力障礙〔14,15〕。

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〔2014-12-30修回〕

(編輯安冉冉/曹夢(mèng)園)

〔中圖分類號(hào)〕R962

〔文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼〕A

〔文章編號(hào)〕1005-9202(2016)07-1544-03；

doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2016.07.004

通訊作者：陳鍇(1975-)，男，碩士，副主任醫(yī)師，主要從事基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床病理研究。

1延安大學(xué)附屬醫(yī)院

第一作者：王亞萍(1975-)，女，碩士，講師，主要從事基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床病理研究。