程序性死亡4基因和5基因在卵巢上皮性癌中的表達*

潘　玲, 何　常*

(貴州醫科大學附院 病理科， 貴州 貴陽　550004)

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程序性死亡4基因和5基因在卵巢上皮性癌中的表達*

潘玲**, 何常***

(貴州醫科大學附院 病理科， 貴州 貴陽550004)

[摘要]目的： 探討程序性死亡4基因(PDCD4)、5基因(PDCD5)蛋白在卵巢上皮性癌組織中的表達。方法： 113例卵巢上皮性癌患者，根據國際婦產科聯盟(FIGO)標準分為Ⅰ期42例、Ⅱ期28例、Ⅲ期30例及Ⅳ期13例，應用免疫組化Envision法檢測所有上皮性癌組織、40例卵巢囊腺瘤組織及20例正常卵巢組織中的PDCD4、PDCD5蛋白的表達陽性率，比較2種蛋白表達陽性率在不同FIGO分期的卵巢上皮性癌組織、卵巢囊腺瘤組織及正常卵巢組織的表達。結果： 卵巢上皮性癌組織中PDCD4、PDCD5蛋白表達陽性率明顯低于卵巢囊腺瘤和正常卵巢組織(P<0.05)；PDCD4、PDCD5蛋白在卵巢上皮性癌組織Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期及Ⅳ期癌組織中的表達陽性率逐漸降低，差異有統計學意義(P<0.05)。結論： 卵巢上皮性癌的發生、發展與PDCD4、PDCD5蛋白表達降低有關。

[關鍵詞]程序性死亡； 卵巢腫瘤，上皮性； 免疫組織化學； 染色法； 基因表達

程序性細胞死亡因子(programmed cell death，PDCD) 4與PDCD5基因是近年新發現的一類抑癌基因[1-2]，PDCD4表達產物通過抑制相關基因的轉錄和翻譯抑制腫瘤生成，在多種人腫瘤組織細胞中表達缺失或低表達[1]；PDCD5基因是由北京大學人類疾病基因中心克隆得到的我國擁有自主知識產權的新功能基因，在多種疾病(腫瘤或白血病等)中表達下調，對腫瘤的早期發現、早期診斷、早期治療有很大的應用價值[2]。目前，雖然卵巢癌的發病率還次于子宮頸癌和子宮體癌，但卵巢上皮癌死亡率卻占各類婦科腫瘤的首位[3]。本研究探討PDCD4、PDCD5蛋白在卵巢腫瘤中的表達，分析PDCD4、PDCD5蛋白表達陽性率與卵巢上皮性腫瘤國際婦產科聯盟(FIGO)分期的關系。

1對象與方法

1.1臨床資料

收集2012年1月～2014年12月經病理確診為卵巢上皮性癌的113例患者手術標本，患者年齡41～71歲，平均(60.28±7.57)歲；病程2～7年，平均(4.07±1.55)年。參照2013年FIGO卵巢癌分期標準進行臨床分期[4]：Ⅰ期42例、Ⅱ期28例、Ⅲ期30例及Ⅳ期13例；有淋巴結轉移43例、未轉移70例，其中黏液性66例、漿液性47例，所有患者排除過往患有腫瘤、白血病等疾病，術前未行放、化療。選取同年齡段正常卵巢組織20例(正常組)及卵巢囊腺瘤組織40例(卵巢囊腺瘤組，包括黏液性25例、漿液性15例)作為研究對照。

1.2方法

所有組織標本經4%多聚福爾馬林固定，常規處理，石蠟包埋，4 μm連續切片。PDCD4與PDCD5兔抗人多克隆抗體及Envision試劑盒均購自武漢博士德公司。采用免疫組織化學(Envision)法檢測PDCD4與PDCD5蛋白表達，染色過程按試劑盒說明書進行。 PDCD4與PDCD5在細胞質、細胞核中均有表達，出現棕黃色顆粒記為陽性細胞，在油鏡(×100)下綜合染色強度和陽性細胞所占比例進行半定量測定[5]，記錄PDCD4、PDCD5蛋白的表達陽性率。

1.3觀察指標

觀察卵巢上皮性癌組織、正常卵巢組織及卵巢囊腺瘤組織切片的染色程度，記錄PDCD4、PDCD5蛋白在正常卵巢組織、卵巢囊腺瘤組織及Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期卵巢上皮性癌組織中的表達陽性率，分析PDCD4、PDCD5蛋白表達與卵巢上皮性癌FIGO分期的關系。

1.4統計學方法

應用 SPSS 15.0軟件分析，計數資料采用百分比(%)表示，數據比較采取χ2檢驗，以P<0.05為差異有統計學意義。

2結果

卵巢癌上皮性組織中PDCD4、PDCD5蛋白表達陽性率明顯低于卵巢囊腺瘤和正常組織，差異具有統計學意義(P<0.05)，見表1。卵巢上皮性癌Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期及Ⅳ期癌組織中的PDCD4、PDCD5蛋白表達陽性率逐漸降低，兩兩比較差異有統計學意義(P<0.05)，見表2。

表1　PDCD4及PDCD5蛋白在正常卵巢、

(1)與正常組織比較，P<0.05；(2)與卵巢囊腺瘤比較，P<0.05

表2　PDCD4、PDCD5蛋白在Ⅰ～Ⅳ期卵巢

(1)與Ⅳ期比較，P<0.05；(2)與Ⅲ期比較，P<0.05;(3)與Ⅱ期比較，P<0.05

3討論

PDCD4與PDCD5是近年新興的抑癌基因，PDCD4通過促進肝癌、乳腺癌、膠質瘤、腎癌等腫瘤細胞的凋亡[6-7]，在多種惡性腫瘤組織包括肺癌、結腸癌、肝癌、胰腺癌等組織中的表達下調甚至缺失, 且與腫瘤潛在惡性程度密切相關[8]。PDCD5是由北京大學人類疾病基因中心在國際上首先報道的一個新的人類凋亡相關基因，該基因編碼的蛋白由125 個氨基酸組成，定位于胞質和胞核，在機體多種組織中呈現中高水平的表達[2,9]。PDCD5 表達異常與多種疾病的發生有關， 在腫瘤細胞的表達明顯低于正常細胞[10]，PDCD5 在腫瘤的發生發展過程中發揮一定作用[10]。但有關PDCD4、PDCD5 與卵巢腫瘤關系的研究報道較少，其在卵巢腫瘤的表達水平及作用尚不明確[11-12]。

本組研究發現卵巢癌上皮性組織中PDCD4、PDCD5蛋白表達陽性率明顯低于卵巢囊腺瘤和正常組織，差異有統計學意義(P<0.05)。卵巢上皮性癌Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期及Ⅳ期癌組織中的PDCD4、PDCD5蛋白表達陽性率逐漸降低，兩兩比較差異有統計學意義(P<0.05)。提示卵巢上皮性癌患者病情的發生、發展與PDCD4、PDCD5蛋白表達水水平降低有關。

4參考文獻

[1] 曹春明，孫震曉. 抑癌基因PDCD4 的表達調控及產物泛素化研究進展[J]. 生物化學與生物物理進展, 2010 (4): 353-357.

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(2015-12-03收稿，2016-02-20修回)

中文編輯： 吳昌學； 英文編輯： 趙毅

Expression of Apoptosis Related PDCD5 Gene and PDCD4 Gene in Ovarian Cancer

PAN Lin， HE Chang

(DepartmentofPathology,AffiliatedHospitalofGuizhouMedicalUniversity,Guiyang550004,Guizhou,China)

[Abstract]Objective: To investigate the PDCD4 and PDCD5 expression in epithelial ovarian cancer and its clinical significance. Methods: Adopting envision immunohistochemical detection of 113 patients with ovarian cancer (42 Phase Ⅰ, 28 Phase Ⅱ, 30 Phase Ⅲ and 13 phase Ⅳ according to FIGO standard) and 20 normal ovarian tissue in 40 cases of ovarian cyst adenoma and expression positive rate of PDCD4 and PDCD5, comparing expression condition of expression positive rate of both proteins on various FIGO phases epithelial ovarian cancer tissue, ovarian cystadenoma tissue and healthy ovarian tissue. Results: PDCD4 and PDCD5 protein expression positive rate of epithelial ovarian cancer were obviously lower than ovarian cystadenoma and healthy ovarian tissue (P<0.05); PDCD4 and PDCD5 protein expression positive rate in epithelial ovarian cancer tissue phase Ⅰ, phase Ⅱ, phase Ⅲ and phase Ⅳ cancer tissue were gradually decreasing, differences were statistical significant (P<0.05). Conclusion: Decreasing of PDCD4 and PDCD5 protein expression in epithelial ovarian cancer is closely related to the occurrence and development of ovarian cancer.

[Key words]apoptosis; ovarian tumor, epithelial; immunohistochemistry; staining method; gene expression

[中圖分類號]R737.31

[文獻標識碼]A

[文章編號]1000-2707(2016)03-0307-03

*[基金項目]貴州省科技廳基金(E2010-4)

**貴州醫科大學病理科2012級碩士研究生，現在安順市人民醫院工作

***通信作者 E-mail:2077166911@qq.com

網絡出版時間：2016-03-17網絡出版地址：http://www.cnki.net/kcms/detail/52.5012.R.20160317.1107.060.html