國產注射用阿莫西林鈉中主要雜質分析

高波

哈藥集團制藥總廠 150000

國產注射用阿莫西林鈉中主要雜質分析

高波

哈藥集團制藥總廠 150000

目的：本文主要對國產注射使用的阿莫西林鈉里面所含有的雜質進行研究。方法：使用高效液相色譜法，將WatersNova－pakC18(250mm×4.6mm，5μm)作為主要色譜柱，并且該設備所檢測的波長大概在254nm左右，采取梯度洗脫的手段對105批樣品中所含有的物質進行檢查。結果：在國產注射所使用的阿莫西林鈉里面檢查出多種雜質，主要含有阿莫西林青霉氧酸、相應的阿莫西林三聚體等在雜質。而單個雜質所含有的數量都不大于3%，總共存在的雜質數量都不大于6%。結論：在本次實驗中所得到的結果對進行加以指導該品種生產有著重要的意義。

阿莫西林鈉；雜質；分析

在臨床醫學界注射使用的阿莫西林鈉是利用無菌阿莫西林鈉的有關原料在處于無菌的狀態下制成的無菌粉針劑，當前在我國市場中已經實現大量的生產，能夠起到預防感染的作用。所以對該藥物里面含有的雜質進行分析有著重要的意義。對此，本次實驗主要依據我國相關藥典所記載的方式，將色譜條件加以完善，并隨機在我國廠家中將105批該藥物進行詳細的研究，采取相應的阿莫西林系統所產生的對照品以及國外雜質對照品進行準確的定位，對獲得的雜質譜進行總結，將該藥物里面所含有的雜質種類以及含量找出來。

1、儀器與試藥

色譜儀；包括 P680泵；ASI－100自動進樣器；PDA－100二極管陣列檢測器；色譜工作站。阿莫西林雜質對照品:6－氨基青霉烷酸(;阿莫西林系統適用性對照品；二酮哌嗪阿莫西林、阿莫西林青霉氧酸、阿莫西林青霉噻唑酸、3－(4－羥基苯基)吡嗪－2－醇、(2R)－2－［(2，2－二甲基異丙醇)氨基］－2－(4－羥基苯基)乙酸(批號:0232.08)、(2R)－2－氨基－2－(4－羥基苯基)乙酸;乙腈為色譜純;磷酸二氫鉀為分析純。

2、溶液的制備

2.1 供試品溶液

（1）相關人員選擇適量的105批樣品，采取精密的手段進行測量，在使用的前期階段需要使用流動相A進行溶解并稀釋城相應等量的溶液即可。

（2）對照溶液精密量取供試品溶液1mL，置100mL量瓶中，用流動相A稀釋至刻度，搖勻，即得。

（3）對照品混合溶液。取各阿莫西林雜質對照品各約5mg，置5mL量瓶中，用流動相A定容，搖勻，即得。

（4）酸破壞供試品溶液。取樣品40mg，加0.1mol·L-1鹽酸溶液0.5mL，放置20min后，加水制成2mg·mL-1的溶液，即得。

（5）堿破壞供試品溶液。取樣品40mg，加0.1mol·L-1氫氧化鈉溶液0.5mL，放置20min后，加水制成2mg·mL-1的溶液，即得。

（6）氧化破壞供試。品溶液取樣品40mg，加0.05%過氧化氫溶液0.5mL，放置30min后，加水制成2mg·mL-1的溶液，即得。

（7）光照破壞供試品溶液取樣品，置254nm光照24h后，加水制成2mg·mL-1的溶液，即得。

（8）高溫破壞供試品溶液取樣品，80℃下加熱1h，加水制成2mg·mL-1的溶液，即可得。

3、方法與結果

3.1 線性關系及檢出限、定量限的考察

稱取購得的7個雜質對照品適量，配制成100，50，10，5，0.5μg·mL-1的溶液，依次注入液相色譜儀，以進樣濃度(X，μg·mL－1)為橫坐標，相應的雜質峰面積(Y)為縱坐標，進行線性分析。6－氨基青霉烷酸、二酮哌嗪阿莫西林、阿莫西林青霉氧酸、阿莫西林青霉噻唑酸峰1、阿莫西林青霉噻唑酸峰2、3－(4－羥基苯基)吡嗪－2－醇、(2R)－2－［(2，2－二甲基異丙醇)氨基］－2－(4－羥基苯基)乙酸、(2R)－2－氨基－2－(4－羥基苯基)乙酸回歸方程分別為:

線性范圍均為100～0.50μg·mL－1，檢出限(S/N=3)分別為0.06，0.08，0.03，0.14，0.10，0.01，0.05，0.05μg·mL-1;定量限(S/N=10)分別為0.20，0.28，0.10，0.45，0.34，0.03，0.16，0.17 μg·mL-1。

3.2 精密度

取各雜質對照品，加流動相A制成50μg·mL-1的溶液，注入液相色譜儀，重復6次，結果6－氨基青霉烷酸、二酮哌嗪阿莫西林、阿莫西林青霉氧酸、阿莫西林青霉噻唑酸、3－(4－羥基苯基)吡嗪－2－醇、(2R)－2－［(2，2－二甲基異丙醇)氨基］－2－(4－羥基苯基)乙酸、(2R)－2－氨基－2－(4－羥基苯基)乙酸峰面積的RSD分別為0.23%，0.31%，0.32%，0.24%，0.15%，0.39%。取供試品溶液注入液相色譜儀，重復6次，結果阿莫西林二聚體(相對于主峰的保留時間為 4.1)和阿莫西林三聚體(相對于主峰的保留時間為4.6)峰面積的RSD分別為0.18%，0.10%?？梢姺椒ň芏攘己?。

3.3 測定結果

取105批樣品適量，精密稱定，臨用前用流動相A溶解并定量稀釋成每1mL中含2mg的溶液，立即進樣，共檢出19個雜質，歸納其雜質譜并統計分析各雜質的含量變化。6－氨基青霉烷酸、二酮哌嗪阿莫西林、阿莫西林青霉氧酸、阿莫西林青霉噻唑酸、3－(4－羥基苯基)吡嗪－2－醇、(2R)－2－［(2，2－二甲基異丙醇)氨基］－2－(4－羥基苯基)乙酸、(2R)－2－氨基－2－(4－羥基苯基)乙酸這 7個雜質的量用雜質對照品按外標法以峰面積計算，其他雜質均采用主成分自身對照法計算，結果見圖1，其中，柱狀圖表示105批各雜質的平均含量;偏差線表示105批次中該雜質的2倍標準偏差(2SD)。

圖1 供試品溶液的典型HPLC色譜圖及雜質含量

4、討論

通常情況下，正式的雜事對照品通常要花費大量的成本，并且在實際操作中也不容易得到。因此，普遍可以使用適當的色譜柱當作實驗的對象，并且在色譜條件允許的情況下進行試驗。這里值得注意的是，這種實驗所得到的結果無法獲得顯著的效果，然而盡可能和真實的實驗結果相吻合。相關人員依據對實驗所獲得的有關數據進行分析得知，注射使用的阿莫西林鈉中包含諸多的物質，如阿莫西林、阿莫西林二聚體等，而且這些物質可以在人的身體里面存在一定的時間，而這些時間的存在可以當作定位雜質的重要參照物。

對于該藥物自身的屬性而言，具備不耐熱的特點，倘若在實驗室中發生高溫的現象，那么就會知識該藥物產生不穩定的情況，對實驗所得到的結果帶來諸多的影響。在我國相關的藥典中沒有對該藥物的控制進行明確規定，這樣就在一定程度上致使各個地方的廠家在對藥物進行運輸亦或是存儲的過程中，沒有對環境溫度引起高度的重視，進而促使該藥物在運輸亦或是存儲時發生質變的情況，就會倒在雜質中所含有的種類以及相應的含量也同樣發生轉變，這樣就致使該藥物不能發揮出最大的價值，嚴重的可能還會帶來一定的危險性。在本文中主要對溫度因素引起了高度重視，所得到的實驗結果具有一定的公正性，對各種因素所產生的影響加以分析，特別是全面分析溫度因素以后，對該藥物里面所含有的雜質進行了探索。當相關人員將可能出現的因素考慮以后，采取隨機的方式抽取了105批藥物，并將這些藥物當作主要的研究對象。

而在本次抽樣工作開展的過程中，主要包含數十個省，都是經過0-18個月的儲存時間。經過相關實驗可以得知：由于生產廠家以及地區抽取的樣品不同，所產生雜質的種類以及相關的含量也是不同的，出現這種情況的原因可能因為諸多因素，比如生產工藝、存儲方式等。

[1]李佳寧,李貴林.注射用阿莫西林鈉含量測定方法探討[J].貴州醫藥.2005(07)

[2]王國新.阿莫西林鈉注射劑致血尿1例[J].藥物流行病學雜志.2005(01)

[3]楊濱,吳培平,丁波.注射用阿莫西林鈉穩定性考察[J].黑龍江醫藥.2004(05)

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1672-5018（2016）11-319-02