淺談國產注射用氨芐西林鈉雜質譜及生產工藝

成佳興

哈藥集團制藥總廠科研開發中心 150000

淺談國產注射用氨芐西林鈉雜質譜及生產工藝

成佳興

哈藥集團制藥總廠科研開發中心 150000

目的：對不同地區所生產的氨芐西林鈉雜質譜以及生產手段進行詳細的比較。方法：相關實驗人員應當針對氨芐西林鈉相關性質測定手段，進行相應的破壞試驗，從而對不同雜質的由來進行研究。將190批次的用氨芐西林鈉有關物質所得到的監測結論當做主要依據，對各種工藝手段的雜質狀況進行考察。結果：所得到的溶媒結晶樣所含有的雜質數量最少，并且所產生的雜質品質比采取其他2種樣品要低些，而噴霧干燥樣品所產生的雜質數量最多。結論：所獲得的原料藥生產工藝標準以及樣品中含有的雜質譜有著相關的聯系，對產品雜質有著一定的影響。

注射用氨芐西林鈉;雜質譜;生產工藝

在臨床應用過程中，主要應用氨芐西林鈉作為青霉素類的抗生素，這一抗生素主要是通過廣譜半合成的方式實現的，通過氨芐西林鈉的治療，可以保證患有胃腸道以及尿路感染的患者的病癥得到有效的緩解，這與一般的青霉素類藥物相比具有更加顯著的臨床功效。在工業生產氨芐西林鈉的過程中，主要采用的方式是溶媒結晶法、噴霧干燥以及冷凍干燥的方法。通過對相關研究的顯示，采用溶媒結晶的方法是上述三種方法中最具有成效的，可以有效的保證自身的質量。本文重點對不同批次的氨芐西林鈉進行雜質譜差異方面的探究。

1、器與試藥

氨芐西林對照品(批號130410－200706，含量85.7%)、氨芐西林系統適用性對照品(批號130618－201001)和苯甘氨酸對照品(批號130415－200904)由中國食品藥品檢定研究院提供。190批次注射用氨芐西林鈉(其中溶媒結晶樣品46批次，冷凍干燥樣品84批次，噴霧干燥樣品60批次)均為2011年國家藥品評價抽驗樣品，分別由國內15家企業生產。乙腈為色譜純，水為超純水，其余試劑均為分析純。

2、實驗方法

依據我國相關藥典對氨芐西林鈉的有關物質所記載的測定手段，將190批次樣品作為主要測定對象，相關實驗人員采取氨芐西林系統將相應的藥物當做參照物，應用質譜技術來對未知雜質進行判斷，將所得到的雜質譜進行總結；相關實驗人員通過對各種工藝樣品中所存在的雜質數量進行比較，與此同時還應當將不同雜質的由來做好相應的破壞試驗。

液相色譜條件:色譜柱為C18柱(自裝，日本產富士填料);流動相A為12%醋酸溶液－0.2mol?L－1磷酸二氫鉀溶液－乙腈－水(0.5∶50∶50∶900)，流動相B為12%醋酸溶液－0.2mol?L－1磷酸二氫鉀溶液－乙腈－水(0.5∶50∶400∶550);檢測波長：254nm;進樣量20μL;流速:1.0mL?min－1。

質譜條件:電噴霧離子源(ESI)，噴霧電壓為3.5kV，加熱毛細管溫度為350℃，鞘氣(N2)壓力7MPa，輔助氣(N2)壓力3MPa，正離子方式檢測。

3、實驗結果

190批次樣品共檢出14種雜質，按保留時間分別命名為雜質1至雜質14。3種工藝樣品的雜質譜基本相同，但噴霧干燥樣品中無8號雜質;冷凍干燥樣品中無2號和4號雜質;溶媒結晶樣品中的雜質最少，僅發現有10個雜質，無2、4、9和14號雜質。

檢出的雜質與氨芐西林系統適用性對照品色譜圖進行對比，結構已知的雜質有氨芐西林噻唑酸(雜質5)、二酮哌嗪－2(R)氨芐西林(雜質7)、氨芐西林開環二聚體(雜質8)、氨芐西林閉環二聚體(雜質10)和氨芐西林開環三聚體(雜質13);通過與苯甘氨酸對照品的保留時間和UV光譜特性的比較，證明噴霧干燥產品中獨有的2號雜質為苯甘氨酸;但樣品中的另一較大雜質(雜質12)并非系統適用性對照品中標注的已知雜質。鑒于其極性較小、保留時間大于二聚物等特征，初步推斷為氨芐西林三聚物。收集該色譜峰的流出液、經固相萃取小柱濃縮洗脫后注入質譜儀進行確證，可見［M+H］+為1048的分子離子峰及［M+H］+為350的碎片離子峰。1048為閉環三聚體的分子離子峰，350為氨芐西林的分子離子峰，一分子閉環三聚體由一分子氨芐西林和兩分子氨芐西林噻唑酸組成，根據青霉素類抗生素的質譜裂解規律，可以確證該色譜峰為氨芐西林閉環三聚體峰。

對3種不同工藝樣品中的各雜質的含量進行比較，發現批號相近的溶媒結晶樣品中的雜質量遠小于其他 2種工藝樣品;不同工藝樣品中最大雜質均為10號氨芐西林閉環二聚體，冷凍干燥樣品的閉環二聚體最大;國產氨芐西林鈉中的其他較大雜質還有氨芐西林噻唑酸、二酮哌嗪氨芐西林、閉環三聚體等。

通過對酸、堿、光、氧化和熱加速試驗樣品及放置24h的溶液的檢測表明，氨芐西林鈉中14個雜質中的10個可在不同的條件下降解產生（表1）1、3、6和11號雜質在各種加速實驗條件下均無明顯變化，推測為工藝雜質;2、4、5、7、8、9、10、12、13和14號雜質為降解雜質。

表1 氨芐西林鈉破壞試驗雜質變化結果

相關實驗人員將190批次樣品中所含有的氨芐西林二聚物、其他相關物質所得到的檢驗結果都可以采取恰當的統計軟件對不同因素加以研究（表2），所得到的結果顯示：原料藥生產手段和相關物質都有著顯著的效果(P＜0.01)，表明原料藥生產手段對產品是否存在雜質存在密切的聯系。

表2 生產工藝與雜質的多因素相關分析

4、討論

相關實驗人員在對雜質譜進行分析以后得知：在氨芐西林鈉噴霧干燥樣品中所含有的雜質數量最多，并且雜質量也最大，其主要因素大概和生產時所存在的氨芐西林處于一定的條件下而產生變化；由于冷凍干燥樣品里面還有較多的閉環二聚體，大部分原因和凍干的流程存在密切的關系，致使氨芐西林能夠在相應的堿性水溶液中達到聚合的狀態；當溶媒結晶樣品里面所含有的雜質數量最小，所含有的雜志量也最低，就可以在結晶時能夠將相應的原料放入到其中進行反應，并將所得到的雜質清理干凈。

通過以上內容可以看出，溶媒結晶工藝樣品的整體品質要比經過冷凍亦或是噴霧干燥樣品都好些。

通過相關實驗人員通過加速實驗手段與雜質結構相結合的方式可以得知：當氨芐西林處于堿性的狀態下很容易產生聚合的現象。因此，在不同工藝中所產生的最大雜質就是閉環二聚體。由于氨芐西林噻唑酸屬于相應物質的水解物，隨著樣品中含有的一些水分可以將其速度加快，從而形成相應的物質，因此其所具有的數量較大；而氨芐西林閉環聚合物所存在的數量都比開環聚合物要大一些，其主要因素是相關開環聚合物都是通過閉環聚合物而形成的。除此之外，樣品中所存在的二聚物數量都比三聚物要大些，很好表明聚合物的形成屬于一種聚合的過程。

總而言之，當前國內所生產的氨芐西林鈉原料有很多種，而生產手段以及產品的整體品質都有著很大的差距，因此筆者依據多年經驗提出自己的一些觀點，建議相關企業應當生產出高品質的溶媒結晶工藝產品。

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R927

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1672-5018（2016）11-297-02