兩種重量法測細菌濃度的比較

【摘 要】采用烘干法和凍干法對細菌進行干燥至恒重，測定細菌濃度，比較兩者差異，篩選出適合不同實驗需要的理想方法。

【關鍵詞】干燥失重；細菌濃度；冷凍干燥

細菌的基本形態有球形、桿形、螺旋形等，大小以微米計，直徑一般為0.5～1微米。細菌濃度在細菌的研究和生產中，經常需要測定培養液的細菌濃度，測定細菌濃度的方法有很多，比如重量法、平板計數法、比濁法、電導率法等。其中重量法精確度高，重現性好，是精確分析細菌濃度的經典方法。而測定菌體重量又可以使用烘干法干燥和低溫冷凍干燥兩種方法，二者主要是干燥菌體的溫度不同。文章著重分析在液體培養基中細菌用兩種方法測定的菌體濃度是否有所差別，以及哪種方法更適合我們研究需要。

一、實驗材料

（一）實驗儀器及材料

電子天平：MS205，METTLER TQLEDO

真空冷凍干燥機：minifast04，MBE5070，東富龍

離心機：低速自動平衡型，LDZ4-1.2

電熱恒溫干燥箱：GZX-DH202，上海精密儀器儀表廠

發酵液：流行性腦膜炎球菌

以上材料均由成都康華生物制品有限公司提供

（二）菌液的制備

由于流行性腦膜炎球菌屬于乙類傳染病原，所以使用之前需要先做滅活處理。取流行性腦膜炎球菌發酵液200ml，加入甲醛溶液2ml，混合攪拌三十分鐘殺菌。

二、實驗方法

（一）烘干法測菌濃

將五只離心試管置于干燥箱中烘干至恒重，自然冷卻后用電子天平稱其重量。分別準確量取10ml制備好的發酵液，分別加入準備好的五支離心試管中，送入離心機進行離心（3500rpm，10min），倒去上清液，加入無菌注射用水，再次離心，倒去上清液，將菌體送至電熱恒溫干燥箱烘干至恒重（105℃，12h），自然冷卻后取出稱重，利用差量法求得發酵液中菌體濃度?！?br>