胱抑素C和NGAL與先天性心臟病患兒術后急性腎損傷的相關性研究

劉會瓊?范太兵?袁心剛

【摘要】 目的 探討胱抑素C和中性粒細胞明膠酶相關脂質運載蛋白（NGAL）與先天性心臟病患兒術后急性腎損傷的相關性。方法 100例接受先天性心臟病手術的患兒， 根據患兒術后是否發生急性腎損傷分為研究組（發生腎損傷）和對照組（未發生腎損傷）， 各50例。對比兩組手術時間、體外循環時間、術中尿量及手術前、手術后NGAL 及胱抑素 C水平。結果 兩組手術時間、體外循環時間及術中尿量比較， 差異無統計學意義（P>0.05）。兩組手術前NGAL 及胱抑素C水平比較， 差異無統計學意義（P>0.05）；兩組手術后NGAL 及胱抑素 C水平比較， 差異有統計學意義（P<0.05）。結論 胱抑素C和NGAL水平的測定對預測先天性心臟病患兒術后急性腎損傷有較好的診斷價值。

【關鍵詞】 胱抑素C；中性粒細胞明膠酶相關脂質運載蛋白；腎損傷

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2016.10.023

急性腎損傷是圍手術期一種常見的并發癥， 主要原因與腎臟血流低灌注氧供減少有關。病理上可以看到近端小管刷狀緣脫失， 導致管型形成、小管梗阻， 腎小球濾過率下降。目前還有學者指出急性腎損傷有炎癥機制、凝血功能異常的參與。急性腎損傷患者預后差， 死亡率高達24%～70%。有學者指出NGAL、胱抑素C是預測急性腎損傷理想的生物標志物[1]。因此作者擬收集接受先天性心臟病手術的患兒， 探討胱抑素C和NGAL測定的價值。現報告如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 收集2009年2月～2013年2月接受先天性心臟病手術的100例患兒， 手術類型為室間隔或房間隔缺損修補術、動脈導管封堵術等。根據患兒術后是否發生急性腎損傷分為研究組（發生腎損傷）和對照組（未發生腎損傷）， 每組50例。研究組年齡5個月～2歲， 男24例， 女26例。對照組年齡5個月～2歲， 男29例， 女21例。兩組患兒一般資料比較差異無統計學意義（P>0.05）， 具有可比性。

1. 2 入選及排除標準 納入標準： ①術前經多普勒超聲心動圖檢查確診為先天性心臟病， 年齡<14周歲；②心功能Ⅰ～Ⅲ級。排除標準：研究時腦、肝、腎等重要臟器功能不全者。

1. 3 觀察方法 對比兩組手術時間、體外循環時間、術中尿量及兩組手術前、手術后NGAL 和胱抑素 C水平。

1. 3. 1 NGAL 的測定方法 用純化的人NGAL抗體包被微孔板， 制成固相抗體， 加入TMB底物、酶標試劑50 μl， 酶標儀測定450 nm波長下的吸光度， 通過計算機測定NGAL濃度。

1. 3. 2 胱抑素C的測定方法 用純化的人半胱氨酸蛋白酶抑制蛋白C抗體包被微孔板， 制成固相抗體， 加入HRP酶、稀釋液50 μl， 在酸的作用下轉化成最終的黃色。用酶標儀在450 nm波長下測定吸光度， 通過計算機測定胱抑素 C濃度。

1. 4 統計學方法 采用 SPSS15.0統計學軟件進行統計分析。計量資料以均數±標準差（ x-±s）表示， 采用t檢驗；計數資料采用χ2檢驗。 P<0.05表示差異具有統計學意義。

2 結果

2. 1 兩組手術時間、體外循環時間及術中尿量比較 兩組手術時間、體外循環時間及術中尿量比較， 差異無統計學意義（P>0.05）。見表1。

2. 2 兩組手術前、手術后NGAL 及胱抑素 C水平比較 兩組手術前NGAL 及胱抑素 C水平比較， 差異無統計學意義（P>0.05）；手術后兩組NGAL 及胱抑素C水平比較， 差異有統計學意義（P<0.05）。見表2。

3 討論

急性腎損傷是心臟手術和心肺體外循環一種常見的嚴重并發癥。如果在剛出現腎損傷時即進行干預， 則可防止向腎損傷發展并延緩其發展速度， 因此早對急性腎損傷診斷非常重要。

有研究在1981年檢測了人胱氨酸蛋白酶抑制劑C的氨基酸系列， 經過20多年的研究， 人胱氨酸蛋白酶抑制劑家族目前已有明確11種蛋白組成。胱抑素C是一個13 kD的半胱氨酸蛋白酶抑制劑， 可在腎小球自由過濾。正常情況下胱抑素C通過腎小球濾過膜， 幾乎完全被腎小管重吸收且不被分泌。有學者指出胱抑素C比血肌酐能更敏感地反映腎功能受損的情況。還有學者指出胱抑素C是反映腎小球濾過率的主要標志， 在腎小球濾過率開始下降時胱抑素C血藥濃度會明顯上升[2]。當腎小球出現輕微損傷時血中胱抑素C濃度即可出現升高。一項薈萃分析顯示血清胱抑素C對臨界值各不相同（0.80～2.04 mg/L）。還有人應用免疫染色與免疫雜交法發現急性腎損傷的患者體內胱抑素C水平升高后， 可通過氧化應激誘導血管內皮細胞、單核細胞表達趨化因子， 而趨化因子在炎癥反應中起重要作用。目前胱抑素C的測定方法主要采用改良免疫比濁分析法， 其優勢為整個分析過程只需2～3 min， 而且不受標本是否溶血和脂血的影響。

NGAL是 lipocalin 超家族的一員， 分子量為25 kD， 其有類似于轉鐵蛋白的鐵轉運功能， 可被早期的原始腎小管上皮細胞攝取， 不受年齡、性別、攝食和炎癥等的影響。從中性粒細胞內提純出的低分子蛋白。有學者指出在早期急性腎功能損傷時血、尿NGAL濃度通常會迅速升高， 2 h最為明顯（ 比臨界值升高幾十至幾百倍） ， 血清肌酐、尿酶等傳統指標往往要在24～72 h后才明顯升高， 因而NGAL可用于急性腎功能的早期診斷。還有學者指出尿NGAL 每升高100 ng/ml， 腎移植患者發生腎功能延遲恢復的幾率就增加20%。研究顯示在急性腎損傷時NGAL會大量地出現在髓袢升支粗端和集合管[3]。除此之外還有學者指出心臟手術后， 靜脈注入造影劑后， 尿NGAL升高比血肌酐提前1.2 d， 而且術后2 h尿NGAL的受試者工作曲線為0.998。美國辛辛那提研究組發現心臟手術2 h尿中NGAL增加與體外循環時間、主動脈阻斷時間之間顯著相關[4]。還有學者認為兒童心臟術后發生急性腎衰竭的患兒在術后2 h血、尿NGAL水平可明顯升高， 表明血清NGAL水平與尿白蛋白排泄率相關， 與腎損害的嚴重程度相一致。

綜上所述， 胱抑素C和NGAL水平的測定對預測先天性心臟病患兒術后急性腎損傷有較好的診斷價值。

參考文獻

[1] 梁馨苓， 葉智明， 史偉， 等. 急性腎衰竭453例病因治療與預后關系分析. 新醫學， 2011， 36（9）：533-534.

[2] 徐美英， 朱文忠. 心臟手術中的腎臟保護. 國際麻醉學與復蘇雜志， 2000（2）：80-83.

[3] 王懷斌， 甄文俊， 佟宏峰， 等， 兩種冠狀動脈旁路手術方式對老年患者腎功能的影響. 中華老年醫學雜志， 2013， 25（6）：438-442.

[4] Pak O， Aldashev A， Welsh D， et al. The effects of hypoxia on the cells of the pulmonary vasculature. Eur Respir J， 2012， 30（2）：364-372.

[收稿日期：2015-11-25]