hTERT反義寡聚核苷酸對子宮內(nèi)膜癌細胞Bcl-2蛋白含量的影響

楊蓉娟　宋春紅　許艷蕾　劉雪芹　李紅萍

050011　河北省石家莊市第四醫(yī)院

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·論著·

hTERT反義寡聚核苷酸對子宮內(nèi)膜癌細胞Bcl-2蛋白含量的影響

楊蓉娟宋春紅許艷蕾劉雪芹李紅萍

050011河北省石家莊市第四醫(yī)院

【摘要】目的觀察人端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶反義寡聚脫氧核苷酸對子宮內(nèi)膜癌Ishikawa細胞株Bcl-2蛋白表達含量的影響。方法將2.5 μmol/L、5 μmol/L及10 μmol/L人端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶反義寡聚脫氧核苷酸與Ishikawa細胞株共同培養(yǎng)，于24、48、72 h采用MTT法檢測細胞增殖，于48 h使用流式細胞儀檢測細胞凋亡和Bcl-2蛋白表達。結(jié)果人端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶反義寡聚脫氧核苷酸呈時間和劑量依賴性抑制Ishikawa細胞增殖，并可呈劑量依賴性誘導(dǎo)Ishikawa細胞凋亡、降低Bcl-2蛋白表達量。結(jié)論人端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶反義寡聚脫氧核苷酸可以誘導(dǎo)Ishikawa細胞凋亡、抑制腫瘤細胞增殖，該作用與降低Bcl-2蛋白表達量有關(guān)。

【關(guān)鍵詞】子宮內(nèi)膜腫瘤；人端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶；反義寡聚脫氧核苷酸；Bcl-2

子宮內(nèi)膜癌占女性生殖系統(tǒng)惡性腫瘤的20%～30%，85%以上子宮內(nèi)膜癌端粒酶陽性[1]。人端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)是端粒酶的核心組成部分，是其催化亞單位和激活限速因子。設(shè)計互補于hTERT的反義寡聚脫氧核苷酸(antisense oligodeoxynucleotide,ASODN)可抑制端粒酶合成端粒，從而使細胞退出細胞增殖周期、誘導(dǎo)細胞凋亡。Bcl-2蛋白是調(diào)控細胞凋亡的重要基因之一，參與了子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生、發(fā)展或演變[2]。本實驗觀察hTERT ASODN對子宮內(nèi)膜癌Ishikawa細胞株Bcl-2蛋白表達含量的影響。

1材料與方法

1.1hTERT ASODN的設(shè)計合成針對hTERT的mRNA序列，由起始密碼子上游6個堿基及后續(xù)的14個堿基作為的靶序列，設(shè)計出互補的反義片段。……