改良NAP活性檢測在慢性阻塞性肺疾病急性加重期診治中的應用價值

張金彪，胡海濤，劉玉欣，劉剛，張玉枝(滄州中西醫結合醫院，河北滄州0600；滄州市人民醫院)

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改良NAP活性檢測在慢性阻塞性肺疾病急性加重期診治中的應用價值

張金彪1，胡海濤1，劉玉欣1，劉剛1，張玉枝2(1滄州中西醫結合醫院，河北滄州061001；2滄州市人民醫院)

摘要：目的探討改良中性粒細胞堿性磷酸酶(NAP)活性檢測在慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)合并細菌感染診斷、治療及預后評估中的應用價值。方法以AECOPD患者121例作為觀察組，其中細菌培養結果陽性50例、陰性71例，細菌培養陽性者給予常規抗炎治療兩周；另選慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者100例作為對照組。比較兩組血清降鈣素原(PCT)、NAP陽性率及NAP積分。結果觀察組入院時NAP陽性率、NAP積分均高于對照組(P均<0.05)。觀察組入院時細菌培養陽性患者NAP陽性率、NAP積分及血清PCT水平均高于陰性者(P均<0.05)；細菌培養陽性患者給予常規抗炎治療期間死亡11例，完成抗炎治療兩周的患者治療后NAP陽性率、NAP積分及血清PCT水平均低于治療前(P均<0.05)。死亡者入院時NAP積分高于存活者(P<0.05)。結論AECOPD患者NAP活性增高，檢測NAP活性有助于判斷細菌感染及感染程度，并可用于評估預后。

關鍵詞：慢性阻塞性肺疾病；慢性阻塞性肺疾病急性加重期；中性粒細胞堿性磷酸酶；降鈣素原

慢性阻塞性肺疾病(COPD)是一種以持續性氣流受限為主要特征的慢性氣道炎癥性疾病，臨床多見，老年人患病率高，但發病有年輕化趨勢。慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)是COPD患者入院治療及死亡的主要原因。AECOPD患者多為高齡，易合并細菌感染，增加臨床診斷及治療難度[1]。中性粒細胞堿性磷酸酶(NAP)主要存在于成熟的中性粒細胞胞質內，可以通過偶氮偶聯染色法檢測NAP活性；當細菌感染時其活性明顯增加，在感染性疾病的診斷及預后判斷方面有一定的價值。但由于染色步驟繁瑣，耗時長，NAP檢測在感染性疾病中的應用較少。本研究探討改良NAP活性檢測在AECOPD 合并細菌感染的診斷、治療及預后評估中的應用價值。

1資料與方法

1.1臨床資料選擇2014年1～12月在滄州中西醫結合醫院ICU內住院治療的AECOPD患者121例作為觀察組，均符合《慢性阻塞性肺疾病診治指南》[2]診斷標準。其中男77例、女44例，年齡38～88(67.5±4.0)歲；有吸煙史61例，納入研究前均已停止吸煙≥6個月。本研究通過本院倫理委員會批準，患者均簽訂知情同意書。排除標準：①病程>5天；②胸部平片(X線)提示肺炎；③納入本研究前1個月內使用抗生素類藥物；④合并其他部位感染、其他慢性呼吸道疾病、需要機械通氣支持的肺性腦病、腫瘤、免疫缺陷及器官功能不全。另選COPD患者100例作為對照組，男60例、女40例，年齡33～81(66.5±6.5)歲，均無吸煙史。兩組性別、年齡具有可比性。

1.2細菌培養入院后采集痰標本，嚴格按照《全國臨床檢驗操作規程》進行常規痰細菌培養，采用西門子MicroScan Walkaway 96plus全自動細菌鑒定藥敏分析儀進行細菌鑒定及藥物敏感試驗。痰培養連續≥2次為同一細菌，定義為細菌感染陽性。細菌感染陽性50例、陰性71例。細菌培養陽性患者給予常規抗炎(注射用頭孢曲松，2 g/24 h)治療兩周。

1.3相關指標觀察①血清PCT：采集靜脈血，采用酶聯免疫熒光法檢測血清PCT，操作步驟嚴格參照試劑盒說明書(深圳市新產業生物醫學工程股份有限公司)。血清PCT>0.5 mg/L為陽性。② NAP陽性率及NAP積分：采集指尖血，涂片，采用NAP偶氮偶聯快速改良方法進行NAP染色，計算NAP陽性率及積分[3]。NAP陽性率正常參考范圍為60%～78%，積分正常參考范圍為150～190。

2結果

觀察組入院時NAP陽性率、NAP積分均高于對照組(P均<0.05)，見表1。觀察組入院時細菌培養陽性患者NAP陽性率、NAP積分及血清PCT水平均高于陰性者(P均<0.05)；細菌感染陽性患者給予常規抗炎治療期間死亡11例(病情發展快速，救治無效，抗炎1周后死亡)，完成兩周抗炎治療的細菌培養陽性患者NAP陽性率、NAP積分及血清PCT水平均低于治療前(P均<0.05)；見表2。死亡者入院時NAP積分高于存活者(P<0.05)，NAP陽性率及血清PCT水平比較差異無統計學意義(P均>0.05)，見表3。

表1　　　　兩組NAP陽性率、NAP積分及血清

注：與對照組比較，*P<0.05。

表2　　　　細菌感染陽性、陰性患者NAP陽性率、NAP積分

注：與細菌感染陰性者比較，*P<0.05；與治療前比較，△P<0.05。

表3　　　　死亡與存活患者NAP陽性率、NAP積分

注：與存活患者比較，*P<0.05。

3討論

AECOPD患者多為老年人，機體免疫功能及反應能力均下降，易受細菌入侵，引發感染，加重病情，增加病死率。有研究報道，80%的AECOPD由感染引起，其中70%為細菌感染[4]。判斷細菌感染的指標較多，目前臨床主要應用的是血常規、CRP、PCT等。其中PCT對診斷細菌感染具有特異性強、靈敏度高的特點，目前已廣泛應用于臨床細菌感染性疾病診斷及療效判斷[5～9]。研究發現，AECOPD患者細菌感染程度與血清PCT水平呈正相關[10]，可用于AECOPD等感染性疾病的診斷及病情判斷[11～14]，但關于PCT對疾病預后判斷方面的報道較少。

通過偶氮偶聯染色法染色，NAP陽性物質呈濃藍色、顆粒狀。但是，常規NAP染色步驟復雜，限制其臨床應用。本研究采用的NAP染色技術為NAP快速改良方法[15]，是對傳統染色步驟進行一系列改良，具有省時、方便、效果好的優點。NAP染色可以鑒別診斷細菌或病毒感染，細菌感染時NAP活性增高，且染色強度與細菌感染程度呈正相關；病毒感染時NAP活性減低[16]。NAP陽性率及NAP積分是反映NAP活性的兩項指標，當機體被細菌感染時，NAP陽性率及積分均升高，且后者對細菌感染診斷及病情評估更有意義[17]。

本研究結果顯示，觀察組入院時NAP陽性率、NAP積分均明顯高于對照組；血清PCT水平亦高于對照組，但差異無統計學意義；說明NAP活性反映AECOPD患者細菌感染的敏感性強于PCT。細菌感染陽性的AECOPD患者NAP陽性率、NAP積分及血清PCT水平均明顯高于細菌感染陰性者；經兩周抗炎治療后，NAP陽性率和NAP積分雖有明顯下降，但仍高于正常值范圍，而PCT水平幾乎下降到正常范圍；說明NAP、PCT均能反映細菌感染病情變化，但病情好轉后NAP恢復較PCT慢，機制可能與NAP細胞質內顆粒酶的變性一直保持高水平有關[18]。

細菌感染陽性的AECOPD患者常規抗炎治療期間死亡11例，死亡患者入院時NAP陽性率、NAP積分及血清PCT水平均高于存活患者，但僅NAP積分比較差異有統計學意義；說明NAP積分在判斷預后方面具有重要參考價值。NAP積分越高，提示患者細菌感染程度越重或既往感染次數越多，因為細菌感染會導致中性粒細胞胞質內顆粒酶蛋白變性，變性的酶蛋白可通過染色方法檢測出來。當細菌感染越嚴重或感染次數越多，酶蛋白變性越嚴重，NAP活性越強，患者預后不良。

總之，AECOPD患者NAP活性增高，檢測NAP活性有助于判斷其是否合并細菌感染及感染程度，并可用于評估預后。

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(收稿日期：2015-08-05)

中圖分類號：R563

文獻標志碼：B

文章編號：1002-266X(2016)12-0065-03

doi:10.3969/j.issn.1002-266X.2016.12.023

基金項目：河北省滄州市科技局計劃項目(141302064)。