栽培尼泊爾菊三七中的木脂素類化合物

張志輝 陸瑤 鄧安珺 馬林 吳豐 李志宏 秦海林

[摘要]采用溶劑提取、萃取粗分離、硅膠和Sephadex LH20凝膠柱色譜以及制備HPLC等純化技術，從采自北京郊區的尼泊爾菊三七栽培品中分離得到4個化合物，通過波譜分析并參考文獻數據鑒定其結構分別為7S，8R9′O乙基去氫雙松柏醇9乙酸酯（1）、9′O乙基去氫雙松柏醇（2）、去氫雙松柏醇9，9′二乙酸酯（3）和（+）梣皮樹脂醇（4）。1為新的2，3二氫苯并呋喃8，3′新木脂素型化合物，2～4均為首次從尼泊爾菊三七中分離得到的木脂素類化合物。對4個化合物在DMSOd6溶劑中的1H和13CNMR數據進行了全歸屬。

[關鍵詞]尼泊爾菊三七；菊科；木脂素；7S，8R9′O乙基去氫雙松柏醇9乙酸酯；結構鑒定

[Abstract]Taking application of some isolation and purification technologies， including solvent extraction， rude solvent isolation， column chromatographies on silica gel and Sephadex LH20 ， and preparative HPLC ， 4 compounds were obtained from Gynuranepalensiscultivated in a suburban area of Beijing. Their structures were identified by spectroscopic methods in conjunction with comparison of the NMR data with literature values as 7S，8R9′Oethyldehydrodiconiferyl9acetate （1）， 9′Oethyldehydrodiconiferyl alcohol （2）， dehydrodiconiferyl9，9′diacetate（3）， and （+）medioresinol（4）， respectively. 1 is a new 2，3dihydrobenzofuran8，3′neolignane type compound， and 24 were isolated from G.nepalensis for the first time. The complete assignment of the 1H and 13CNMR spectroscopic data of the four compounds recorded in DMSOd6 was achieved.

[Key words]Gynuranepalensis； Compositae； lignans； 7S，8R9′Oethyldehydrodiconiferyl9acetate； structure elucidation

doi：10.4268/cjcmm20160815

尼泊爾菊三七Gynura nepalensis DC為菊科Compositae菊三七屬多年生草本植物，在國內西南個別地區有零星野生分布，偶有栽培品[12]。據文獻記載，包括尼泊爾菊三七在內的菊三七屬植物有藥用功效，民間用其治療支氣管炎、肺結核、崩漏、臃腫、燙傷、跌打損傷、刀傷出血、身體創傷等多種疾病[35]。雖然已有一些文獻報道了從菊三七屬植物中分離鑒定了生物堿、黃酮、氨基酸、揮發油、萜烯等多種類型化合物[68]，但有關尼泊爾菊三七的化學成分研究還很少，僅有本課題組報道從其地上部分分離鑒定了10個化合物，主要為7個增碳環香葉烷型單萜（其中6個化合物也可分類為大柱香波龍烷型C13降倍半萜），其他3個化合物分屬有機酸酯和吲哚生物堿[2]。鑒于這些化合物的較豐富的結構多樣性以及文獻對尼泊爾菊三七的民間藥用記載等，本課題組繼續開展了對該植物化學成分的研究。從采自北京郊區的栽培尼泊爾菊三七的地上部分進一步獲得4個化合物，包括1個新的苯并呋喃型新木脂素和3個首次從尼泊爾菊三七中分離得到的木脂素類化合物。本文報道這些化合物的分離和結構鑒定。

1材料

Varian Mercury400型和Bruker AvanceⅢ600型核磁共振波譜儀；Nicolet 5700型傅里葉變換紅外光譜儀；PerkinElmer 241型旋光測定儀；JASCO J810型CD光譜儀；Agilent 1100 LC/MSD Trap SL型液相色譜質譜聯用儀；LC6AD制備型高效液相色譜儀（配有SPD20A紫外檢測器， 20 mm×250 mm PRCODS色譜柱）；柱色譜硅膠（200～300目）和薄層色譜用硅膠預制板均為青島海洋化工廠產品；Sephadex LH20為Pharmacia公司產品；色譜純試劑為Fisher公司產品；水為市售純凈水；其他試劑均為分析純產品。

實驗用尼泊爾菊三七的植物原料采集、基原鑒定和標本保存見文獻[2]。

2提取分離

干燥的尼泊爾菊三七莖和葉67 kg的前處理、溶劑提取、溶劑萃取粗分離和乙酸乙酯萃取物的硅膠柱色譜法粗分離見文獻描述[2]。前文硅膠柱色譜分離后獲得的Fr3 （15 g，石油醚乙酸乙酯4∶1）洗脫組分再經硅膠柱色譜，以石油醚乙酸乙酯混合洗脫劑系統梯度洗脫分成3個洗脫組分（Fr31～Fr33），Fr32（297 mg，石油醚乙酸乙酯10∶1）經凝膠柱色譜，以甲醇洗脫分成3個洗脫組分（Fr321～Fr323）；Fr323 （98 mg）經制備高效液相色譜分離（以水甲醇 20∶80為流動相，流速6 mL·min-1，以210 nm作為UV檢測波長）得到化合物1（4 mg）和3（3 mg）。前文Fr4洗脫組分（1 g，石油醚乙酸乙酯3∶1）再經硅膠柱色譜，以石油醚乙酸乙酯混合洗脫劑系統梯度洗脫分成7個洗脫組分（Fr41～Fr47）；Fr45 （163 mg，石油醚乙酸乙酯5∶1）經凝膠柱色譜，以甲醇洗脫分成4個洗脫組分（Fr451～Fr454）；Fr452 （62 mg）用制備高效液相色譜（以水甲醇 20∶80為流動相，流速6 mL·min-1，以210 nm作為UV檢測波長）分離得到化合物2（4 mg）和4（3 mg）（圖1）。

3結構鑒定

化合物1白色無定形粉末，[α]20D-385

化合物2白色無定形粉末；其正離子模式高分辨ESIMS給出質子加合的準分子離子峰m/z 387180 3（C22H27O6計算值為387180 2）、鈉加合的準分子離子峰m/z 409163 1（C22H26NaO6計算值為409162 2），結合其13CNMR數據，確定其分子式為C22H26O6，不飽和度為10。對化合物2進行了1HNMR，13CNMR，DEPT，1H1H COSY，HSQC，HMBC和1D NOE差譜等波譜學實驗，其1H和13CNMR數據與化合物1非常相似，主要區別在于化合物2中不存在化合物1的乙酰基信號δH197 （3H，s），δC1703 （s）和206 （q），且H9a，H9b和H8的化學位移分別向高場位移了Δδ-066，-064和-028，C9的化學位移向高場位移了Δδ-19，C8的化學位移向低場位移了Δδ+37。經深入的數據分析及歸屬，鑒定其為已知化合物9′O乙基去氫雙松柏醇[11]。鑒于文獻已報道了丙酮為測試溶劑的數據歸屬，本研究中化合物2以DMSOd6為測試溶劑的1H和13CNMR數據見表1。

化合物3白色無定形粉末；其正離子模式高分辨ESIMS給出鈉加合的準分子離子峰m/z 465156 2（C24H26NaO8計算值為465152 0），結合其13CNMR數據，確定其分子式為C24H26O8，不飽和度為12。對化合物3進行了1HNMR，13CNMR，DEPT，1H1H COSY，HSQC，HMBC和1D NOE差譜等波譜學實驗，經深入的數據分析及歸屬，鑒定其為已知化合物去氫雙松柏醇9，9′二乙酸酯。鑒于文獻已報道了氯仿為測試溶劑的數據歸屬，本研究中化合物3以DMSOd6為測試溶劑的1H和13CNMR數據見表1。

化合物4淡黃色粉末；1HNMR（DMSOd6，400 MHz）δ：889（1H，s，OH4′），824（1H，s，OH4），688（1H，d，J=18 Hz，H2′），674（1H，dd，J=84，18 Hz，H6′），671（1H，d，J=84 Hz，H5′），658（2H，s，H2，6），459（2H，m，H7，7′），412（2H，m，H9a，9′a），375（3H，s，OMe3′），374（6H，s，OMe3，5），373（2H，m，H9b，9′b），303（2H，m，H8，8′）；13CNMR（DMSOd6，150 MHz）δ：1478（s，C3，5），1474（s，C3′），1458（s，C4′），1347（s，C4），1321（s，C1′），1313（s，C1），1185（d，C6′），1150（d，C5′），1103（d，C2′），1035（d，C2，6），852（d，C7），850（d，C7′），709（t，C9′），708（t，C9），559（q，OMe3，5），555（q，OMe3′），536（d，C8），534（d，C8′）。ESIMS m/z 389[M+H]+。數據與文獻[1213]報道的（+）梣皮樹脂醇一致。

[參考文獻]

[1]中國科學院中國植物志編委會. 中國植物志. 第77卷 [M]. 北京：科學出版社，1999：314.

[2]陸瑤，李志宏，馬林，等. 栽培尼泊爾菊三七化學成分的研究[J]. 中國中藥雜志，2014，39（19）：3777.

[3]Zhang X F， Tan B K H. Effects of an ethanolic extract of Gynura procumbens on serum glucose， cholesterol and triglyceride levels in normal and streptozotocininduced diabetic rats[J]. Singapore Med J， 2000， 41（1）：9.

[4]胡勇，李維林，林厚文，等. 白背三七地上部分降血糖作用研究[J]. 西南林學院學報，2007，27（1）：55.

[5]劉杭，俞堅，童芬美. 菊三七不同提取部位體外抗腫瘤實驗研究[J]. 醫學研究雜志，2006，35（5）：66.

[6]袁珊琴，顧國明，魏同泰. 菊葉三七生物堿成分的研究[J]. 藥學學報，1990，25（3）：191.

[7]蔣娟娟，徐德然，濮社班，等. 菊三七地下部分的化學成分[J]. 藥學與臨床研究，2008，16（3）：178.

[8]胡勇，李維林，林厚文，等. 白背三七地上部分的化學成分[J]. 中國天然藥物，2006，4（2）：156.

[9]Duarte N， Lage H， Ferreira M J U. Three new Jatrophane polyesters and antiproliferative constituents from Euphorbia tuckeyana[J]. Planta Med， 2008，74（1）：61.

[10]Yoshikawa M， Morikawa T， Xu F， et al. （7R，8S）and（7S，8R）85′ linked neolignans from Egyptian herbal medicine Anastatica hierochuntica and inhibitory activities of lignans on nitric oxide production[J]. Heterocycles， 2003， 60（8）：1787.

[11]Xiong L， Zhu C， Li Y. Lignans and neolignans from Sinocalamus affinis and their absolute configurations[J]. J Nat Prod， 2011， 74：1188.

[12]Tsukamoto H， Hisada S， Nishibe S. Lignans from bark of Fraxinus mandshurica var. japonica and F. japonica[J]. Chem Pharm Bull， 1984， 32（11）：4482.

[13]張修朋，秦輝，楊芳，等. 黃素馨化學成分及其抗氧化活性[J]. 中國中藥雜志， 2014， 39（11）：2029.

[責任編輯丁廣治]