尿液中腦源性神經生長因子的表達與膀胱過度活動癥的相關性研究

陳楚紅　伊慶同　陳長青　胡巍　李思敏　龔旻

摘要：目的 研究尿液中腦源性神經生長因子（BDNF）的表達水平，同時研究腦源性神經生長因子與膀胱過度活動癥（OAB）的關系。方法 選擇OAB患者及健康志愿者各60例，其中1/2為男性，1/2為女性。通過收集健康志愿者晨間第一次尿液，測定其BDGF濃度（ELISA法，結果用同一標本的Cr值標準化），分析其BDGF的表達及男女差異，并用此作為對照；應用OAB癥狀評分（OABSS），對OAB患者進行診斷和分度（輕、中、重度），通過收集晨間第一次尿液，測定OAB患者BDGF濃度（ELISA法，結果用同一標本的Cr值標準化），比較OAB患者BDNF的表達與健康志愿者表達的差異，并對其濃度的改變與OAB癥狀評分（OABSS）嚴重程度進行比較，研究BDGF的表達與OAB癥狀評分（OABSS）的相關性；同時，對OAB患者服用M受體阻滯劑，并監測服藥前后尿液中BDNF濃度的變化，并將其與OABSS評分進行比較。結果 健康志愿者中，尿液BDNF的表達穩定，男女無差異。OAB患者中BDNF的表達存在顯著性差異（平均628.1±590.5vs110.4±159.5，P<0.001），差異有顯著性意義。OAB患者服用M受體阻滯劑前后，尿液中BDNF濃度的變化較顯著，治療前后有統計學意義。結論 與健康志愿者相比，OAB患者中BDNF表達水平顯著增高，且濃度越高，癥狀越重，OABSS得分越高。OAB患者服用M受體阻滯劑前后，尿液中BDNF濃度的變化顯著，這一發現，能幫助我們提高OAB的診斷水平，并對其輕重程度做出客觀評價，同時能作為療效判斷的客觀指標。

關鍵詞：膀胱過度活動癥；OAB；神經生長因子；M受體阻滯劑；腦源性

膀胱過度活動癥（Overactive Bladder，OAB）是指尿急，伴有或不伴有急迫型尿失禁，常伴有尿頻和夜尿增多，尿動力學上可表現為逼尿肌過度活動，也可為其它形式的尿道-膀胱功能障礙，存在病理或代謝因素可以解釋這些癥狀。流行病學研究表明，其發病率為16.9%，全球有數百萬人患有OAB，而且隨著年齡的增長，OAB的發病率上升，并對患者的生活質量（QOL）造成嚴重的負面影響[1]。

目前OAB盡管能用尿急感覺評分或尿急嚴重程度評分（OABSS）[2]，這些都是基于患者的主觀報告。尿急-尿頻癥狀源于心理因素，排尿次數增加、不能節制的排尿沖動源于中樞神經系統的損害，以及逼尿肌的過度活動。因而，臨床診斷OAB存在很多的差異，需要找到一種更為客觀的診斷與評價治療OAB的結果的方法，尤其對于沒有經歷泌尿外科培訓的保健醫療提供者。

有研究表明，尿液中某些蛋白分子[3，4]，如神經生長因子（NGF）、PGE2等在OAB、BOO（膀胱出口梗阻）、逼尿肌過度活動以及間質性膀胱炎等疾病中表達明顯增高；而病理狀態下，OAB患者在其小的膀胱容量和感覺尿急時，尿NGF也會增加。在抗毒蕈堿治療后、難治性OAB肉毒素逼尿肌注射后，尿NGF水平降低。尿NGF水平，可能是一種潛在的診斷并評價抗毒蕈堿治療的效果OAB的生物標記物[3～6]。腦源性神經生長因子BDNF是另一種在下尿路功能中無處不在的神經生長因子，無論是在正常狀態還是病理狀態下。最近發現膀胱疼痛綜合征的患者尿液中BDNF濃度升高。本課題研究OAB患者尿液中BDNF的水平，將其與OAB癥狀的嚴重程度比較。同時還研究正常志愿者尿液中BDNF的表達及其性別差異，以及OAB患者應用藥物治療后BDGF的變化，從而了解BDGF在觀察OAB中的作用。

1 資料與方法

1.1入排標準 ①入組標準：尿急，伴有或不伴有急迫型尿失禁，常伴有尿頻和夜尿增多；所有患者均簽署術前同意書，愿意接受實驗研究。②排除標準：根據尿動力檢查，排除神經性功能障礙；急性膀胱炎、膀胱結石等疾?。荒虻廓M窄、膀胱腫瘤和前列腺癌等患者。

1.2方法 選擇膀胱過度活動癥（OAB）患者60例，健康志愿者60例（男、女各30例）；所有病例均符合OAB診斷的入選標準，均行經直腸超聲檢查，尿流率測定（急性尿儲留者除外），直腸指檢（DRE），國際前列腺癥狀評分（IPSS）及生活質量評分（QOL）；血電解質測定，血前列腺特異抗原（PSA）檢查，均診斷為OAB，排除膀胱癌、前列腺增生癥、前列腺癌、尿道狹窄、尿道腫瘤。根據嚴格的病例入組和排除標準，選擇膀胱過度活動癥（OAB）患者60例，其中男性19例，女性41例，年齡21～58歲，平均（33.4±7.8）歲，健康志愿者60例（男女各30例，平均年齡（32.7±6.7）歲）。

1.2.1研究健康志愿者中BDGF的表達：通過收集晨間第一次尿液，測定其BDGF濃度（ELISA法，結果用同一標本的Cr值標準化），分析其BDGF的表達及男女差異，并用此作為對照。

1.2.2應用OAB癥狀評分（OABSS），對OAB患者進行診斷和分度（輕、中、重度）；通過收集晨間第一次尿液，測定OAB患者BDGF濃度（ELISA法，結果用同一標本的Cr值標準化），并對其濃度的改變與OAB癥狀評分（OABSS）嚴重程度進行比較，研究BDGF的表達與OAB癥狀評分（OABSS）的相關性，從而找到一種用以診斷、評價OAB嚴重程度的評價指標。

1.2.3研究OAB患者服藥（M受體阻滯劑，琥珀酸索利那新片），并監測服藥前后尿液中BDNF濃度的變化，并將其與OABSS評分進行比較）前后，BDGF表達的變化，并對BDGF的表達與OAB癥狀評分做比較，觀察藥物的療效。

1.2.4 BDNF檢測操作步驟：嚴格按照操作說明書進行操作。同時，每個標本的結果均用同一標本的Cr值標準化，以消除尿量對BDGF濃度的影響。

1.3統計學方法 使用SPSS10.0統計軟件包，采用配對t檢驗，P<0.05為差異有統計學意義：正常人與OAB患者BDGF表達的差異性比較；評價OAB嚴重程度（癥狀評分）與BDGF表達的相關性；經過治療后，OAB服藥（M受體阻滯劑）后的療效與BDGF的相關性，評判BDGF是否可作為OAB療效判斷的指標。

2 結果

根據嚴格的病例入組和排除標準，選擇膀胱過度活動癥（OAB）患者60例，其中男性19例，女性41例，年齡21～58歲，平均（33.4±7.8）歲，健康志愿者60例（男女各30例，平均年齡（32.7±6.7）歲），60例患者與健康志愿者年齡無統計學差異。

在健康志愿者中，尿液中BDNF的表達穩定，且男女無明顯差異。而對于OAB患者中BDNF的表達與健康志愿者相比，存在顯著性差異（平均628.1±590.5vs110.4±159.5，P<0.001），且差異有顯著性意義。

在OAB患者中，尿液BDNF的表達與其癥狀呈顯著相關性，OABSS得分越高，BDNF表達越高，差異有顯著性統計學意義。

對于OAB患者，在服用M受體阻滯劑前后，BDNF的表達有顯著性差異，且其與OABSS評分呈負相關。

3 討論

膀胱過度活動癥（OAB）是指尿急[1，5]，伴有或不伴有急迫型尿失禁，常伴有尿頻和夜尿增多，尿動力學上可表現為逼尿肌過度活動，也可為其它形式的尿道-膀胱功能障礙，存在病理或代謝因素可以解釋這些癥狀。流行病學研究表明，其發病率為16.9%，全球有數百萬人患有OAB，而且隨著年齡的增長，OAB的發病率上升。因為這些癥狀會給患者造成極大的困擾，有證據顯示，OAB癥狀對患者的生活質量（QOL）造成嚴重的負面影響[5]。

目前OAB盡管能用尿急感覺評分或尿急嚴重程度評分（OABSS），這些都是基于患者的主觀報告。尿急-尿頻癥狀源于心理因素，排尿次數增加、不能節制的排尿沖動源于中樞神經系統的損害，以及逼尿肌的過度活動。因而，臨床診斷OAB存在很多的差異，需要找到一種更為客觀的診斷與評價治療OAB的結果的方法，尤其對于沒有經歷泌尿外科培訓的保健醫療提供者。

有研究表明，尿液中某些蛋白分子[5，6]，如神經生長因子（NGF）、PGE2等在OAB、BOO（膀胱出口梗阻）、逼尿肌過度活動以及間質性膀胱炎等疾病中表達明顯增高；而病理狀態下，OAB患者在其小的膀胱容量和感覺尿急時，尿NGF也會增加[2]。在抗毒蕈堿治療后、難治性OAB肉毒素逼尿肌注射后，尿NGF水平降低[7]。尿NGF水平，可能是一種潛在的診斷并評價抗毒蕈堿治療的效果OAB的生物標記物[7，8]。腦源性神經生長因子BDNF是另一種在下尿路功能中無處不在的神經生長因子，無論是在正常狀態還是病理狀態下。最近發現膀胱疼痛綜合征的患者尿液中BDNF濃度升高[2]。本課題研究了健康志愿者尿液中BDNF的表達，同時也研究了OAB患者尿液中BDNF的水平，并將其與OAB癥狀的嚴重程度比較以及患者服藥前后BDNF的表達進行比較，研究表明志愿者尿液中BDNF的表達與性別比較無差異。結果表明，OAB患者應用藥物治療后BDGF有顯著變化，表明BDGF在觀察OAB治療效果中能發揮一定作用。在OAB患者中，尿液BDNF的表達與其癥狀呈顯著相關性，OABSS得分越高，BDNF表達越高，差異有顯著性統計學意義。對于OAB患者，在服用M受體阻滯劑前后，BDNF的表達有顯著性差異，且其與OABSS評分呈負相關，表明尿液中BDNF表達的監測，可以作為治療OAB療效的判斷指標。

腦源性神經生長因子（BDNF）是另一種在下尿路功能中無處不在的神經生長因子[5，7]，無論是在正常狀態還是病理狀態下。然而，最近在膀胱疼痛綜合癥患者的尿液中發現含有高濃度的腦源性神經生長因子。本研究調查了OAB患者尿液中腦源性神經生長因子的水平以及它們與癥狀嚴重程度的相關性。

本研究表明，BDNF可以作為一種更為客觀的診斷OAB的標記物；且可以用來對OAB嚴重程度的做出客觀評價。同時，應用對OAB患者治療前后尿液中BDNF的監測，可以對OAB患者服藥后的療效做出客觀評價。

4 結論

OAB患者中BDNF表達水平明顯高于正常人群，且濃度越高，患者癥狀越重，癥狀評分（OABSS）得分也越高。這一發現表明，我們能夠應用尿液中BDNF的監測，提高臨床醫生對OAB的診斷水平，同時，還能對患者的病情嚴重程度進行客觀判讀。BDGF可能是一種潛在的、能對OAB做出客觀判斷的較好的客觀評價指標。同時，應用尿液中BDNF的監測，可以對OAB患者服藥后的療效，做出客觀評價。

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編輯/倪冰冰