HIV感染者和AIDS患者外周血T淋巴細胞活化亞群與病毒載量的相關性

李 強，李 杰，桑 鋒，劉 真，岳靜宇，沈俊嶺，錢潔玉，何書杰，徐立然

450000河南省鄭州市，河南中醫學院第一附屬醫院艾滋病臨床研究中心，河南省病毒性疾病中醫藥防治重點實驗室

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·論著·

HIV感染者和AIDS患者外周血T淋巴細胞活化亞群與病毒載量的相關性

李 強，李 杰，桑 鋒，劉 真，岳靜宇，沈俊嶺，錢潔玉，何書杰，徐立然

450000河南省鄭州市，河南中醫學院第一附屬醫院艾滋病臨床研究中心，河南省病毒性疾病中醫藥防治重點實驗室

【摘要】目的探討HIV感染者和AIDS患者外周血T淋巴細胞活化亞群與病毒載量相關性。方法2012年6—8月選擇河南省某AIDS高發地區HIV感染者322例和AIDS患者87例為研究對象，分別采用流式細胞儀和全自動病毒載量儀檢測HIV感染者和AIDS患者外周血T淋巴細胞及其活化亞群和血漿病毒載量，根據病毒載量水平將研究對象分為Ⅰ～Ⅳ組。結果HIV感染者與AIDS患者T細胞相對值比較，差異無統計學意義(P>0.05)。HIV感染者淋巴細胞絕對值和相對值T細胞絕對值T細胞絕對值T細胞絕對值和相對值T細胞絕對值均高于AIDS患者，T細胞相對值低于AIDS患者，輔助性T細胞與抑制性T細胞比值高于AIDS患者，低于AIDS患者，差異均有統計學意義(P<0.05)。各組淋巴細胞絕對值和相對值T細胞相對值T細胞相對值T細胞絕對值和相對值及比較，差異均有統計學意義T細胞相對值T細胞相對值及與病毒載量水平呈正相關(rs=0.128、0.291、0.409，P<0.05)；T細胞絕對值和相對值與病毒載量水平呈負相關(rs=-0.246、-0.318、-0.297、-0.184、-0.204，P<0.05)。結論HIV感染者和AIDS患者T淋巴細胞活化過程發生變化；隨著病毒載量水平變化，HIV感染者和AIDS患者的T淋巴細胞活化亞群水平也不同。

【關鍵詞】獲得性免疫缺陷綜合征；HIV；T淋巴細胞亞群；病毒載量

李強，李杰，桑鋒，等.HIV感染者和AIDS患者外周血T淋巴細胞活化亞群與病毒載量的相關性[J].中國全科醫學，2016，19(8)：869-872.[www.chinagp.net]

Li Q，Li J，Sang F，et al.Correlation between peripheral blood tlymphocyte activation subgroup and viral load in HIV/AIDS patients[J].Chinese General Practice，2016，19(8)：869-872.

淋巴細胞亞群的異常激活改變是反映HIV感染者和AIDS患者機體免疫狀態和病情進展的最重要指標。免疫系統的異常活化包括淋巴細胞亞群重新分配、細胞因子表達混亂、細胞功能障礙和異常死亡等，其中淋巴細胞協同共刺激分子CD28、T淋巴細胞激活分子CD38的表達水平可反映HIV感染者和AIDS患者免疫細胞的異常激活程度，是AIDS疾病進展和高效抗反轉錄病毒治療(HAART)效果監測的重要指標之一[1-2]。本研究對河南地區409例HIV感染者和AIDS患者病毒載量與T淋巴細胞亞群的相關性進行分析，以對臨床治療效果評價提供指導。

1對象與方法

1.1研究對象于2012年6—8月選擇河南省某AIDS高發地區HIV感染者322例和AIDS患者87例為研究對象，其中男283例，女126例；年齡18～65歲；感染途徑為有償獻血246例(60.2%)，輸血17例(4.2%)，性傳播114例(27.9%)，不詳32例(7.7%)。HIV感染者和AIDS患者均符合中華醫學會AIDS診療指南的診斷標準[3]。

1.2方法

1.2.1主要儀器與試劑FACS Calibur流式細胞儀、Trucount管(美國BD公司)；COBAS AmpliPrep/COBAS Taqman全自動病毒載量儀(德國Roche公司)；抗-FITC-CD3/抗-PE-CD4/抗-PerCP-CD45/抗-APC-CD8混合抗體、FITC-CD8抗體、PerCP-CD28、APC-CD38抗體、FITC-CD4抗體(美國BD公司)；HIV-Ⅰ型核酸定量檢測試劑盒(德國Roche公司)。

1.2.4血漿病毒載量測定取2～5 ml EDTAK3抗凝全血，室溫2 000 r/min離心10 min，將血漿分離移至無菌凍存管中，-76 ℃保存備用，待樣本收集完全后，37 ℃震蕩助融樣本，使用同批試劑上機檢測。取1 100 μl血漿，在全自動病毒載量儀上定量檢測血漿中HIV RNA，其步驟依次為：樣品制備并分離HIV-Ⅰ型RNA，RNA反轉錄形成cDNA，靶cDNA擴增以及裂解的、靶特異性的、雙標記寡核苷酸探針的檢測。儀器采用Real-time PCR(探針法)擴增HIV gag區，可檢測HIV-Ⅰ型M組的A-H亞型。實驗設陰性、弱陽性和強陽性質控品各一個，使用內標法對樣本進行定量檢測，檢測線性范圍為40～107copies/ml。根據病毒載量進行分組，未檢測到HIV RNA為Ⅰ組，低于檢測下限為Ⅱ組，40～103copies/ml為Ⅲ組，>103copies/ml為Ⅳ組。

2結果

2.2病毒載量AIDS患者病毒載量(lgcopies/ml)為2.71(4.71)，高于HIV感染者的病毒載量1.6(2.5)，差異有統計學意義(Z=-4.862，P<0.01)。

表1　HIV感染者與AIDS患者外周血T淋巴細胞活化亞群比較

注：a為Z值；H/S=輔助性T細胞與抑制性T細胞比值

表2　不同病毒載量水平患者外周血T淋巴細胞活化亞群比較

注：與Ⅰ組比較，aP<0.05；與Ⅱ組比較，bP<0.05；與Ⅲ組比較，cP<0.05；d為χ2值

3討論

作者貢獻：李強、徐立然進行課題設計與實施、資料收集整理、撰寫論文、成文并對文章負責；李杰、桑鋒、劉真、岳靜宇、沈俊嶺、錢潔玉、何書杰進行課題實施、評估、資料收集；李強、徐立然進行質量控制及審校。

本文無利益沖突。

參考文獻

[3]中華醫學會感染病學分會艾滋病學組.艾滋病診療指南(2011版)[J].中華臨床感染病雜志，2011，4(6):321-330.

[4]張曉梅，周靈玲，趙志鋼，等.艾滋病病毒感染者T淋巴細胞亞群的改變[J].現代中西醫結合雜志，2007，16(23)：3371.

(本文編輯：吳立波)

Correlation Between Peripheral Blood Tlymphocyte Activation Subgroup and Viral Load in HIV/AIDS Patients

LIQiang，LIJie，SANGFeng，etal.

DepartmentofAcquiredImmuneDeficiencySyndromeTreatmentandResearchCenter，theFirstAffiliatedHospitalofHenanUniversityofTCM，Zhengzhou450000，China

【Abstract】ObjectiveTo investigate the correlation between peripheral blood T lymphocyte activation subgroup expression and viral load in HIV/AIDS patients.MethodsFrom June to August in 2012，we selected 322 HIV-infected patients and 87 AIDS patients from an AIDS high-prevalence area in Henan Province.Peripheral blood T lymphocyte and its activation subgroup and plasma viral load of HIV-infected patients and AIDS patients were detected respectively using flow cytometry and full-automatic viral load instrument.According to viral load level，we divided the subjects into Ⅰ-Ⅳ group.ResultsHIV-infected patients and AIDS patients were not significantly different in the relative value of T cell and (P>0.05).HIV-infected patients were higher in the absolute and relative value of lymphocyte，the absolute value of T cell，the absolute value of T cell，the absolute and relative value of T cell and the absolute value of T cell and lower in the relative value of T than AIDS patients (P<0.05);HIV-infected patients were higher in the ratio of helper T cell and suppressor T cell (H/S) and and lower in than AIDS patients (P<0.05).The four groups were significantly different in the absolute value and relative value of lymphocyte，the relative value of T cell，the relative value of T cell，the absolute and relative value of T and (P<0.05).The relative value of T cell ，relative value of T cell and ，were positively correlated with the viral load level (rs=0.128，0.291，0.409；P<0.05).The absolute and relative value of T，and were negative correlated with the viral load level(rs=-0.246，-0.318，-0.297，-0.184，-0.204；P<0.05).ConclusionThere are changes in the activated process of T lymphocyte in HIV-infected and AIDS patients;with the change of viral load level，difference occurs between HIV-infected and AIDS patients in the level of T lymphocyte activation subgroup.

【Key words】Acquired immunodeficiency syndrome ；HIV；T-lymphocyte subsets；Viral load

(收稿日期：2015-05-16；修回日期：2015-12-08)

【中圖分類號】R 512.91

【文獻標識碼】A

doi：10.3969/j.issn.1007-9572.2016.08.001

通信作者：徐立然，450000河南省鄭州市，河南中醫學院第一附屬醫院艾滋病臨床研究中心，河南省病毒性疾病中醫藥防治重點實驗室；E-mail：strongmz@163.com

基金項目：國家“艾滋病和病毒性肝炎等重大傳染病防治”科技重大專項“十二五”計劃課題(2012ZX10004905-003-003，2012ZX10005010-001)；國家中醫藥管理局臨床科研基地科研專項(JDZX2012023)；河南省高等學校青年骨干教師資助計劃(2013GGJS-095)；河南省基礎與前沿計劃項目(132300413215)

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