KIF14過表達與胃腸癌患者預后的關系

陳 萍，金向明，劉新蘭，王寧菊，王 權，彭志海，嚴東旺，周崇治

750004寧夏銀川市，寧夏醫科大學總醫院腫瘤醫院腫瘤內科(陳萍，金向明，劉新蘭，王寧菊)；上海交通大學附屬第一人民醫院普外科(王權，彭志海，嚴東旺，周崇治)

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·論著·

KIF14過表達與胃腸癌患者預后的關系

陳 萍，金向明，劉新蘭，王寧菊，王 權，彭志海，嚴東旺，周崇治

750004寧夏銀川市，寧夏醫科大學總醫院腫瘤醫院腫瘤內科(陳萍，金向明，劉新蘭，王寧菊)；上海交通大學附屬第一人民醫院普外科(王權，彭志海，嚴東旺，周崇治)

【摘要】目的 探討KIF14表達水平與胃腸癌患者預后的關系。方法選取2008年1月—2010年12月在寧夏醫科大學總醫院和上海交通大學附屬第一人民醫院經手術及術后病理學證實的胃腸癌患者112例。收集患者臨床特征資料，以患者病理診斷為起點，通過患者復診、電話及信函方式進行隨訪，分別以腫瘤復發轉移、死亡為觀察終點，隨訪截止日期為2015-03-31。術中切除的胃腸癌病灶及其癌旁組織，采用實時熒光聚合酶鏈反應(RT-PCR)檢測KIF14 mRNA相對表達量(RQ)；采用免疫組化檢測KIF14表達結果，由2位病理醫生獨立進行免疫組化結果評判。結果72例患者胃腸癌組織KIF14 mRNA高表達，RQ值為58.00(37.00，138.00)；40例患者胃腸癌組織KIF14 mRNA低表達，RQ值為0.68(0.46，0.79)。KIF14在胃腸癌組織中的陽性反應物定位于細胞核或胞質，呈棕黃色均質狀和顆粒狀，癌旁組織無表達或低表達。胃腸癌組織KIF14陽性表達率為61.6%(69/112)，高于癌旁組織的7.1%(8/112)，差異有統計學意義(χ2=76.557，P<0.001)。不同年齡、性別、民族、腫瘤部位、腫瘤直徑及分化程度患者KIF14 mRNA RQ比較，差異均無統計學意義(P>0.05)。不同浸潤深度和臨床分期、有無淋巴結轉移和遠處轉移患者KIF14 mRNA RQ比較，差異均有統計學意義(P<0.05)。112例患者5年總生存率(OS)為48.2%(54/112)，KIF14 mRNA高表達與低表達患者中位生存時間分別為52、67個月，兩者生存曲線比較，差異有統計學意義(χ2=8.210，P=0.004)。101例未發生遠處轉移的患者5年無病生存率(DFS)為38.6%(39/101)，KIF14 mRNA高表達與低表達患者中位無病生存時間分別為41、62個月，兩者生存曲線比較，差異有統計學意義(χ2=17.281，P<0.001)。KIF14 mRNA高表達患者出現復發轉移的風險高于低表達者〔AR=6.9，95%CI(2.8，16.8)，P<0.001〕。多因素Cox回歸分析顯示，浸潤深度、淋巴結轉移、遠處轉移及KIF14 mRNA是胃腸癌患者5年內死亡的獨立影響因素(P<0.05)；浸潤深度、淋巴結轉移及KIF14 mRNA是胃腸癌患者5年內轉移復發的獨立影響因素(P<0.05)。結論KIF14 mRNA和蛋白在胃腸癌組織中表達上調，參與胃腸癌的發生發展、侵襲轉移等生物學行為，可作為預測胃腸癌患者根治術后預后的分子生物學指標之一。

【關鍵詞】胃腸腫瘤；KIF14；預后；生物學標記

陳萍，金向明，劉新蘭，等.KIF14過表達與胃腸癌患者預后的關系[J].中國全科醫學，2016，19(8)：931-935，940.[www.chinagp.net]

Chen P，Jin XM，Liu XL，et al.Correlation between the overexpression of KIF14 and the prognosis of gastroenteric tumor[J].Chinese General Practice，2016，19(8)：931-935，940.

胃腸道癌的復發轉移是導致患者治療失敗及死亡的主要原因，探索特異性腫瘤分子生物學標志物對早期診斷腫瘤的復發轉移、判斷預后及發現新的治療靶點具有重要臨床意義。本課題組前期應用高通量全基因組表達譜芯片結合生物信息學對人胃癌癌組織和癌旁正常組織差異進行研究，發現一組新的候選胃癌基因和標志物[1]，其中KIF14在胃癌組織中高表達，在正常組織中低表達。目前關于KIF14在胃腸癌中表達的臨床意義罕見報道。本研究旨在檢測KIF14在胃腸癌組織中的表達，研究其與胃腸癌患者臨床病理特征及預后的關系，為進一步研究KIF14在胃腸癌侵襲、復發轉移等過程中的機制奠定基礎。

1資料與方法

1.1臨床資料選取2008年1月—2010年12月在寧夏醫科大學總醫院和上海交通大學附屬第一人民醫院經手術及術后病理學證實的胃腸癌患者112例，其中男49例，女63例；年齡25～75歲，中位年齡62歲；胃癌42例，結直腸癌70例；采用美國癌癥聯合委員會(AJCC)標準[2]進行TNM分期，Ⅰ期16例，Ⅱ期39例，Ⅲ期46例，Ⅳ期11例。患者術前均未行放化療等抗腫瘤治療，術后予4～6個周期的以氟尿嘧啶為主的化療。本研究征得患者知情同意，并取得寧夏醫科大學總醫院和上海交通大學附屬第一人民醫院倫理委員會批準。

1.2方法

1.2.1臨床資料收集收集患者臨床特征資料，包括腫瘤部位、直徑、分化程度、浸潤深度、有無淋巴結轉移及遠處轉移、臨床分期。以患者病理學診斷為起點，通過患者復診、電話及信函方式進行隨訪，分別以腫瘤復發轉移、死亡為觀察終點，隨訪截至2015-03-31。

1.2.2KIF14 mRNA相對表達量取術中切除的胃腸癌病灶及癌旁組織，以Trizol提取液(Invitrogen，USA)提取總RNA。取2 μg RNA在ABI PRISM 7900HT machine(Applied Biosystems，USA)儀器上按照說明書進行反轉錄。取1 μl cDNA在SYBR Green assay(Bio-Rad，USA)儀器上行實時熒光聚合酶鏈反應(RT-PCR)。內參β-actin上游引物：5′-GTGGGGCGCCCCAGGCACCA-3′，下游引物：5′-CTCCTTAATGTCACGCACGATTTC-3′；KIF14上游引物：5′-TGGAACACCCTGACACGA-3′，下游引物：5′-GAGCCAGTCTGACCATAAGC-3′。應用Realplex RT-PCR System反應儀(Eppendorf，Germany)進行擴增，95 ℃預變性2 min，循環條件為：95 ℃變性20 s，54 ℃退火15 s，72 ℃延伸20 s，共40個循環。計算胃腸癌組織KIF14 mRNA相對表達量(RQ)=2-ΔΔCt，其中ΔΔCt=(胃腸癌組織KIF14 Ct值-胃腸癌組織β-actin Ct值)-(癌旁組織KIF14 Ct值-癌旁組織β-actin Ct值)[3-4]。

1.2.3KIF14蛋白表達按照試劑盒說明書提取胃腸癌組織及癌旁組織總蛋白，采用BCA法計算蛋白濃度，用12% SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳分離蛋白，隨后轉膜至PVDF膜，5%脫脂奶粉室溫下對膜封閉2 h，封閉后的膜加入一抗(KIF14，1∶1 000；BL358；Bethyl Laboratories Inc或β-actin，1∶1 000；Cell Signaling Technology，USA)，4 ℃孵育過夜。PBST清洗蛋白膜，加入二抗(IgG-HRP，1∶200；Santa Cruz Biotechnology，USA)，洗膜，采用增強化學發光法檢測蛋白，并利用X線膠片曝光記錄結果。

1.2.4免疫組化取經甲醛固定、石蠟包埋的標本于組織切片機上連續切片，切片厚度2 μm。將切片放入0.01 mmol/L檸檬酸中進行抗原修復7 min。一抗孵育(KIF14，1∶200；BL358；Bethyl Laboratories Inc)，4 ℃過夜，加入生物素標記的羊抗鼠兔通用型二抗，37 ℃孵育30 min。PBS漂洗10 min，重復3次。辣根過氧化氫酶(DAB)顯色1 min，蘇木精復染、脫水干燥。用PBS代替一抗為陰性對照。

由2位病理醫生在不知曉患者任何臨床和病理資料情況下獨立進行免疫組化評分。染色強度評分0～3分，分別表示陰性染色、弱染色、中等強度染色及強染色。陽性細胞所占百分比評分：0分(0)，1分(1%～25%)，2分(26%～50%)，3分(51%～75%)，4分(76%～100%)。各標本取2位病理醫生染色強度評分和陽性細胞所占百分比評分之和的平均值，最終免疫組化結果為陰性(0分)，弱陽性(1～4分)，強陽性(5～7分)。

1.3統計學方法采用SPSS 13.0統計軟件進行統計分析，非正態分布的計量資料以M(QR)表示，兩組間比較采用Wilcoxon秩和檢驗，多組間比較采用Kruskal-Wallis檢驗；計數資料以相對數表示，組間比較采用χ2檢驗；采用Kaplan-Meier法計算總生存率(OS)、無病生存率(DFS)，生存曲線的比較采用Log-rank檢驗；分別采用單因素及多因素Cox回歸分析患者預后的影響因素。以P<0.05為差異有統計學意義。

2結果

2.1KIF14 mRNA及蛋白在胃腸癌組織中的表達

2.1.1KIF14 mRNA表達72例患者胃腸癌組織KIF14 mRNA高表達，RQ值1.60～268.00，中位RQ值為58.00(37.00，138.00)；40例患者胃腸癌組織KIF14 mRNA低表達，RQ值為0.18～0.94，中位RQ值為0.68(0.46，0.79)。

2.1.2免疫組化KIF14在胃腸癌組織中的陽性反應物定位于細胞核或胞質，呈棕黃色均質狀和顆粒狀，癌旁組織無表達或低表達(見圖1，本文彩圖見本刊網站www.chinagp.net)。112例患者胃腸癌組織KIF14表達強陽性36例(32.1%)，弱陽性33例(29.5%)，陰性43例(38.4%)；癌旁組織KIF14表達弱陽性8例(7.1%)，陰性104例(92.7%)。胃腸癌組織KIF14陽性表達率高于癌旁組織，差異有統計學意義(χ2=76.557，P<0.001)。

注：圖A為胃癌組織，圖B為大腸癌組織；T表示KIF14在胃腸癌組織中陽性表達，N表示KIF14在癌旁組織中陰性表達

圖1KIF14蛋白在胃腸癌組織和癌旁組織中的表達(DAB，×400)

Figure 1Expression of KIF14 protein in gastric carcinoma tissue and para-carcinoma tissue

2.1.3蛋白免疫印跡法采用蛋白免疫印跡法對免疫組化呈強陽性的4例標本進行蛋白定量分析，結果顯示其表達水平均明顯升高，與免疫組化結果一致(見圖2)。

注：T1、T2為胃癌組織，T3、T4為大腸癌組織，N為對應癌旁組織

圖2蛋白免疫印跡法檢測KIF14在胃腸癌組織和癌旁組織中的表達

Figure 2Expression of KIF14 in gastrointestinal cancer tissue and para-carcinoma tissue by western blotting method

2.2胃腸癌組織KIF14 mRNA與蛋白表達的關系胃腸癌組織中KIF14 mRNA與蛋白檢測結果一致，差異無統計學意義(χ2=0.267，P>0.05)。正確率為86.6%(97/112)，Kappa值為0.713(見表1)。

表1胃腸癌組織中KIF14 mRNA與蛋白表達的關系(例)

Table 1Association between KIF14 mRNA and KIF14 protein in gastrointestinal cancer tissue

KIF14蛋白KIF14mRNA高表達 低表達陽性63 6 陰性 9 34

2.3胃腸癌組織中KIF14 mRNA的表達與臨床病理特征的關系不同年齡、性別、民族、腫瘤部位、腫瘤直徑及分化程度患者KIF14 mRNA RQ比較，差異均無統計學意義(P>0.05)。不同浸潤深度和臨床分期、有無淋巴結轉移和遠處轉移患者KIF14 mRNA RQ比較，差異均有統計學意義(P<0.05，見表2)。

表2不同臨床特征患者胃腸癌組織KIF14 mRNA表達水平比較

〔M(QR)，n=112〕

Table 2Comparison of KIF14 mRNA among patients with different clinical features

臨床特征例數RQU(χ2)值P值年齡(歲)1317.5000.259 ≤604360.72(36.36,74.22) >606953.66(46.87,80.64)性別1372.0000.314 男6359.22(38.18,70.11) 女4953.00(50.88,91.20)民族1223.0000.366 漢族7654.59(45.57,76.83) 回族3660.53(36.82,78.95)腫瘤部位1360.0000.682 胃4259.15(30.60,72.23) 結腸3953.59(31.58,74.86) 直腸3157.61(38.07,86.47)腫瘤直徑(cm)1493.0000.800 ≤56455.83(44.87,78.59) >54857.40(40.28,78.21)分化程度2.164a0.339 高分化2750.30(44.03,101.99) 中分化5155.79(36.31,74.20) 低分化3462.49(21.21,73.53)浸潤深度19.592a<0.001 T11528.90(13.35,40.71) T22650.10(21.20,62.92) T34759.45(38.04,79.05) T42474.52(57.01,101.17)淋巴結轉移975.0000.001 無5045.00(22.31,52.41) 有6265.77(42.93,71.58)遠處轉移94.500<0.001 無10151.94(25.92,55.06) 有1198.41(94.56,164.44)臨床分期43.548a<0.001 Ⅰ期1626.91(12.25,36.21) Ⅱ期3940.37(13.26,53.89) Ⅲ期4673.95(51.66,85.11) Ⅳ期1179.94(69.47,117.41)

注：RQ=相對表達量；a為χ2值

2.4生存分析112例患者5年OS為48.2%(54/112)，隨訪期間58例死亡。KIF14 mRNA高表達與低表達患者中位生存時間分別為52、67個月。兩者生存曲線比較，差異有統計學意義(χ2=8.210，P=0.004，見圖3)。101例未發生遠處轉移的患者5年DFS為38.6%(39/101)，62例出現復發轉移。KIF14 mRNA高表達與低表達患者中位無病生存時間分別為41、62個月。兩者生存曲線比較，差異有統計學意義(χ2=17.281，P<0.001，見圖4)。KIF14 mRNA高表達患者出現復發轉移的風險高于低表達者〔AR=6.9，95%CI(2.8，16.8)，P<0.001〕。

圖3　KIF14 mRNA高表達與低表達患者OS比較的生存曲線

Figure 3Survivorship curve of the comparison of OS between patients with high KIF14 mRNA expression and low KIF14 mRNA expression

圖4　KIF14 mRNA高表達與低表達患者DFS比較的生存曲線

Figure 4Survivorship curve of the comparison of DFS between patients with high KIF14 mRNA expression and low KIF14 mRNA expression

2.5Cox回歸分析分別以民族、浸潤深度、淋巴結轉移、遠處轉移、臨床分期及KIF14 mRNA為自變量，以5年內是否死亡、發生復發轉移為因變量行單因素Cox回歸分析，變量賦值見表3。單因素Cox回歸分析顯示，民族、浸潤深度、淋巴結轉移、遠處轉移及KIF14 mRNA是胃腸癌患者5年內死亡的影響因素，民族、浸潤深度、淋巴結轉移及KIF14 mRNA是胃腸癌患者5年內復發轉移的影響因素(P<0.05，見表4)。

表3胃腸癌患者預后影響因素Cox回歸分析的變量賦值

Table 3Variable assignment of Cox regression analysis of influencing factors for the prognosis of gastrointestinal cancer patients

變量賦值民族漢族=1,回族=2浸潤深度T1=1,T2=2,T3=3,T4=4淋巴結轉移無=0,有=1遠處轉移無=0,有=1臨床分期Ⅰ期=1,Ⅱ期=2,Ⅲ期=3,Ⅳ期=4KIF14mRNA低表達=0,高表達=1

表4胃腸癌患者預后影響因素的單因素Cox回歸分析

Table 4Univariate Cox regression analysis of influencing factors for the prognosis of gastrointestinal cancer patients

變量βWaldχ2值HR值(95%CI)P值死亡 民族0.5373.9971.71(1.01,2.90)0.043 浸潤深度0.3475.2451.42(1.11,3.05)0.022 淋巴結轉移0.4194.7811.57(1.08,3.33)0.023 遠處轉移-1.39716.8670.25(0.13,0.48)<0.001 KIF14mR-NA-0.8497.6210.43(0.23,0.78)0.006復發轉移 民族0.5334.1001.70(1.02,2.86)0.043 浸潤深度0.3275.0941.39(1.04,1.84)0.023 淋巴結轉移-0.3423.9980.71(0.32,0.95)0.041 KIF14mR-NA-1.19015.1800.30(0.17,0.55)<0.001

進一步行多因素Cox回歸分析顯示，浸潤深度、淋巴結轉移、遠處轉移及KIF14 mRNA是胃腸癌患者5年內死亡的獨立影響因素(P<0.05)；浸潤深度、淋巴結轉移及KIF14 mRNA是胃腸癌患者5年內復發轉移的獨立影響因素(P<0.05，見表5)。

表5胃腸癌患者預后影響因素的多因素Cox回歸分析

Table 5Multivariate Cox regression analysis of influencing factors for the prognosis of gastrointestinal cancer patients

變量βWaldχ2值HR值(95%CI)P值死亡 浸潤深度-0.4622.3140.63(0.38,0.88)0.036 淋巴結轉移0.1943.5191.13(1.01,2.03)0.028 遠處轉移0.8426.6862.32(1.16,3.63)0.001 KIF14mR-NA0.0494.3581.05(1.01,1.96)0.030轉移復發 浸潤深度0.1923.8751.08(1.01,1.88)0.039 淋巴結轉移0.7184.8572.05(1.77,3.78)0.041 KIF14mR-NA0.2629.8741.30(1.17,2.55)0.039

3討論

KIF14是1994年發現的驅動蛋白超家族成員，定位于人染色體1q32.1，堿基長6 586 bp，編碼蛋白包含1 648個氨基酸殘基[5]，參與細胞的有絲分裂、減數分裂及遷移過程，是細胞周期進程中的重要調節因子。KIF14及其相關配體CIT和PIC1在細胞分裂過程中發揮調控作用，KIF14表達升高可增強細胞增殖能力，加快腫瘤生長[6-7]。研究發現，KIF14表達增強可加快腫瘤相關通路中某些生長因子的穿梭運動，便于其逃避凋亡，并增強其不依賴底物的獨立生長能力，最終導致腫瘤的發生發展[8]。

本研究采用免疫組化技術顯示KIF14定位于細胞胞核和胞質，證實Nomura等[5]發現的細胞周期中KIF14在細胞中的定位，其在胃腸癌中的表達水平顯著高于癌旁組織，與陳宗營等[9]報道一致。本研究發現KIF14 mRNA和蛋白在胃腸癌組織中表達均升高，分別為64.3%(72/112)和61.6%(69/112)，正確率為86.6%(97/112)，與Corson等[10]報道的乳腺癌細胞中KIF14 mRNA和蛋白的表達一致。

KIF14基因是經過發生在轉錄水平的寡核苷酸芯片技術篩選出來，RT-PCR方法是在轉錄水平上定量檢測基因表達，具有高度敏感性及客觀性[11]。本研究結果顯示，胃腸癌組織中KIF14 mRNA的表達與臨床分期、淋巴結轉移、浸潤深度、遠處轉移相關，提示KIF14參與胃腸癌的發生發展，有望成為判斷胃腸癌浸潤、侵襲和轉移等惡性生物學行為的標志物，與Corson等[12]對肺癌的研究結果一致。

復發轉移是導致胃腸癌患者死亡的主要原因，KIF14高表達的肺癌患者無病生存時間短[12]。本研究表明，KIF14 mRNA是預測胃腸癌患者發生轉移、判斷預后的重要指標。KIF14 mRNA高表達者較低表達者惡性度更高，發生復發轉移的風險是低表達者的6.9倍，與在乳腺癌[10]、肺癌[12]、腎癌[13]中的研究結果一致。KIF14 mRNA高表達者預后較差，且KIF14 mRNA高表達是胃腸癌患者預后不良的獨立影響因素，提示KIF14對于制定個體化治療方案、術后隨訪具有指導意義，針對KIF14的靶向治療可能為臨床預防胃腸癌的復發轉移提供新的思路。

綜上所述，KIF14 mRNA和蛋白在胃腸癌組織中表達上調，參與胃腸癌的發生發展、侵襲轉移等生物學行為，可作為預測胃腸癌患者根治術后預后的分子生物學指標之一。關于KIF14的功能研究及其能否作為治療的靶點尚需進一步深入探索。

作者貢獻：陳萍進行課題設計與實施、資料收集整理、撰寫論文、成文并對文章負責；金向明、劉新蘭、王寧菊、王權、嚴東旺、周崇治進行課題實施、評估、資料收集；彭志海進行質量控制及審校。

本文無利益沖突。

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(本文編輯：吳立波)

Correlation Between the Overexpression of KIF14 and the Prognosis of Gastroenteric Tumor

CHENPing，JINXiang-ming，LIUXin-lan，etal.

DepartmentofOncology，GeneralHospitalofNingxiaMedicalUniversity，Yinchuan750004，China

【Abstract】ObjectiveTo investigate the relation between the expression of KIF14 and the prognosis of gastroenteric tumor.MethodsWe enrolled 112 patients who were confirmed with gastroenteric tumor by surgery and postoperative pathology in the General Hospital of Ningxia Medical University and the First People′s Hospital Affiliated to Shanghai Jiaotong University from January 2008 to December 2010.The clinical features of patients were collected;follow-up was conducted by further consultation，telephone and letters，with pathological diagnosis as the starting point and tumor relapse and metastasis and death as the end points;the follow-up ended on March 31，2015.The focus of gastroenteric tumor and para-carcinoma tissue were excised during surgery;the relative quantity(RQ) of KIF14 mRNA was detected by RT-PCR，and the expression results of KIF14 was detected by immunohistochemistry;immunohistochemical results were confirmed by two pathological doctors separately.ResultsWe observed that the expression of KIF14 mRNA was high in 72 samples of gastrointestinal cancerous tissues，and RQ was 58.00(37.00，138.00).However，KIF14 mRNA expression was low in 40 samples of the patients，and RQ was 0.68(0.46，0.79).The positive reactants of KIF14 protein in gastrointestinal cancer tissues were localized in the cell nucleus or cytoplasm of cancer cells，taking on the color of claybank and the shape of homogeneity and granules.The expression of KIF14 mRNA was weak or negative in para-carcinoma tissues.The KIF14 positive rate was 61.6%(69/112)，more than that of para-carcinoma tissues which was 7.1%(8/112)，and the difference was significant (χ2=76.557，P<0.001).The KIF14 mRNA RQ was not statistically different by age，gender，tumor location，tumor size and differentiation degree(P>0.05).KIF14 mRNA RQ was significantly by depth of infiltration，clinical stage，presence of lymph node metastasis and the distant metastasis(P<0.05).The 5-year overall survival(OS) rate of the 112 gastrointestinal cancer patients was 48.2%(54/112).The median survival time of patients with KIF14 mRNA high expression and low expression was 52 and 67 months respectively，and the two kinds of patients were significantly different in survivorship curve (χ2=8.210，P=0.004).The 5-year DFS rate was 38.6%(39/101) among 101 patients without metastasis after surgery，and the median survival time of patients with KIF14 mRNA high expression and low expression was 41 and 62 months respectively;the two kinds of patients were significantly different in survivolship curve (χ2=17.281，P<0.001).Patients with high KIF14 mRNA expression were higher than patients with low KIF14 mRNA expression in the risk of relapse and metastasis〔AR=6.9，95%CI(2.8，16.8)，P<0.001〕.Multivariate Cox regression analysis showed that depth of infiltration，lymphatic metastasis，distant metastisis and KIF14 mRNA were independent influencing factors for death within 5 years，and depth of infiltration，lymphatic metastasis and KIF14 mRNA were independent influencing factors for the metastasis and recurrence within 5 years (P<0.05).ConclusionGastrointestinal cancer tissues have higher expression of KIF14 mRNA and protein，and participate in the occurrence，progress，invasion，metastasis and other biological behaviors of gastroenteric tumor.KIF14 mRNA can be used as one of molecular biological markers for the prognosis of patients with gastrointestinal cancer who have received radical resection.

【Key words】Gastrointestinal tumor；KIF14；Prognosis；Biological markers

(收稿日期：2015-09-05；修回日期：2016-01-20)

【中圖分類號】R 735

【文獻標識碼】A

doi：10.3969/j.issn.1007-9572.2016.08.014

通信作者：彭志海，200080 上海市，上海交通大學附屬第一人民醫院普外科；E-mail：pengpzh@hotmail.com

基金項目：上海市醫學領軍人才項目(LJ06024)；寧夏自然科學基金資助項目(NZ13166)