富血小板血漿對人脂肪來源干細胞增殖率的影響

梁茜　潘福強　梁羽冰　黎凍

[摘要]目的：探討不同比例富血小板血漿（Platelet-rich plasma，PRP）對人脂肪來源干細胞（adipose-derived stemcells，ADSCs）的增殖及周期蛋白Cyclin D₁表達的影響。方法：分離培養(yǎng)ADSCs細胞，傳代至第3代，流式細胞儀鑒定。全血中分離PRP。采用隨機數字表法將將細胞分為4組（n=24）：C組不做任何處理，PRP₁₀組、PRP₂₀組和PRP₃₀組在ADSCs中加入PRP使其容積比分別為10%、20%和30%，于37℃、5%C02培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。應用MTT法檢測各組細胞的增殖率，蛋白免疫印跡法（Western blot）測細胞周期蛋白Cyclin D₁的表達。結果：與C組比較，PRP₁₀組、PRP₂₀組、PRP₃₀組ADSCs細胞增殖率及Cyclin D₁蛋白的表達明顯增高（P<0.05）；組間比較PRP₃₀組ADSCs細胞增殖率及cyclin D₁蛋白的表達高于PRP₁₀組和PRP₂₀組（P<0.05）。結論：PRP以濃度依賴性方式促進ADSCs細胞內周期蛋白Cyclin D₁的表達，從而促進ADSCs的增殖。

[關鍵詞]脂肪移植；脂肪來源干細胞；細胞增殖率；富血小板血漿；Cyclin D₁蛋白

[中圖分類號]Q813.1 [文獻標志碼]A [文章編號]1008-6455（2016）03-0036-03

臨床上常因畸形、外傷、術后及美容等的需要而行軟組織缺損修復術。目前常用的移植填充材料主要有人工材料和自體組織。由于人工材料移植后可能出現排除反應、感染及移位等并發(fā)癥，在臨床使用中受限。人體自身脂肪組織移植可避免上述并發(fā)癥，因其來源豐富，抽取脂肪后供區(qū)無明顯并發(fā)癥，理論上為最理想的填充材料。然而目前自體脂肪移植面臨最大的問題為移植后易被吸收，遠期成活率較低。研究報道脂肪細胞經體外培養(yǎng)后能獲得穩(wěn)定生長、增殖能力強，且具備定向分化的干細胞。ADSCs作為可大量增殖的主要干細胞群，成為近年來脂肪移植研究的熱點。富血小板血漿（platelet-rich plasma，PRP）為自體血小板的濃縮體，內含高濃度生長因子，包括PDGF、TGF-B、VEGF、b-FGF、IGF-1等。……