歐洲藥典法測定非洛地平含量

張建紅，丁永英，張小紅

(1.武漢市漢口醫(yī)院藥劑科，武漢　430012；2.武漢婦幼保健院，武漢　430000)

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歐洲藥典法測定非洛地平含量

張建紅1，丁永英1，張小紅2

(1.武漢市漢口醫(yī)院藥劑科，武漢430012；2.武漢婦幼保健院，武漢430000)

摘要：目的建立非洛地平的含量測定方法。方法使用硫代硫酸鈉標(biāo)定的硫酸鈰滴定液(0.1 mol·L-1)對非洛地平含量進(jìn)行測定，與《中國藥典》中使用三氧化二砷標(biāo)定的測定方法進(jìn)行結(jié)果比較分析，這是該方法首次應(yīng)用于非洛地平含量測定。結(jié)果在80%～120%范圍內(nèi)，校正體積與稱樣量呈良好線性關(guān)系，V=51.782 m+0.033 4(r=0.999 9)。2種方法測量值無顯著性差異(P>0.05)。結(jié)論該方法簡便、安全、快速、準(zhǔn)確，適用于該產(chǎn)品的質(zhì)量控制。

關(guān)鍵詞：非洛地平；準(zhǔn)確性；含量測定

高血壓病是最常見的心血管病，是全球范圍內(nèi)的重大公共衛(wèi)生問題之一。全世界高血壓病患者大約有10億人[1]。二氫吡啶類鈣拮抗劑(CCB)早在20世紀(jì)90年代就被ISH和WHO推薦為一線降壓藥，非洛地平則是二氫吡啶類鈣拮抗劑(CCB)中較為常用的一種抗高血壓藥。對于治療老年高血壓伴腎功能損害患者，非洛地平是一種安全、有效的降壓藥[2]，但《中國藥典》2010年版對非洛地平原料藥含量測定中的滴定液硫酸鈰是用三氧化二砷來標(biāo)定，砷對人體有害，砷劑可引起消化道反應(yīng)、泌尿系統(tǒng)反應(yīng)、神經(jīng)皮膚反應(yīng)[3]，因此參考?xì)W洲藥典(Ph.Eur.7.4)的含量分析方法，在確保藥品安全、有效、質(zhì)量可控的基礎(chǔ)上，改用硫代硫酸鈉標(biāo)定硫酸鈰，對非洛地平進(jìn)行含量測定，并進(jìn)行方法驗(yàn)證。結(jié)果表明，此法對人體無害、操作簡便、對設(shè)備要求低、用時(shí)短，便于實(shí)驗(yàn)的進(jìn)行。

1儀器與試藥

1.1儀器鼓風(fēng)干燥箱(上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司)；電子天平(梅特勒-托利多儀器有限公司)。

1.2試藥叔丁醇(HPLC，天津科密歐化學(xué)試劑有限公司)；高氯酸(AR，天津政成化學(xué)試劑有限公司)；硫酸鈰滴定液(0.1 mol·L-1，濃度因子：1.002)；鄰二氮菲指示劑(天津科密歐化學(xué)試劑有限公司)。

2方法與結(jié)果

2.1溶液的配制與標(biāo)定

2.1.1淀粉溶液的配制取可溶性淀粉1.0 g，置于5 mL的水中，溶解混勻后，將此混合物加到含10 mg碘化汞的100 mL沸水中，混勻，即得。

2.1.2硫代硫酸鈉滴定液的配制與標(biāo)定配制：取硫代硫酸鈉25 g，碳酸鈉0.2 g，加無二氧化碳的水溶解，并稀釋至1 000 mL，搖勻，放置1個(gè)月后過濾，標(biāo)定，即得。標(biāo)定：量取0.33 mol·L-1溴酸鉀溶液10.0 mL，加入水40 mL，碘化鉀溶液10 mL及鹽酸溶液15 mL。用硫代硫酸鈉滴定液滴定至近終點(diǎn)時(shí)，加入淀粉溶液1 mL作為指示劑，繼續(xù)滴定至藍(lán)色消失[4]。

2.1.3硫酸鈰滴定液的配制與標(biāo)定配制：取硫酸鈰0.4 g，溶解于含水500 mL和硫酸50 mL的混合溶液中，放冷，加水稀釋至1 000 mL，即得。標(biāo)定：用硫代硫酸鈉(0.1 mol·L-1)滴定至接近終點(diǎn)時(shí)，加入淀粉溶液0.8 mL作為指示劑，繼續(xù)滴定至藍(lán)色消失。

2.1.4鄰二氮菲指示劑的配制取0.7 g硫酸亞鐵和1.76 g鄰二氮菲，溶解于70 mL的新沸放冷至室溫的純化水中，并用新沸放冷至室溫的純化水稀釋至100 mL，即得。

2.1.5其他溶液的配制高氯酸溶液：量取高氯酸8.5 mL，加純化水稀釋至100 mL，混勻，即得?？瞻兹芤海汉宥〈?5 mL和高氯酸25 mL的混合溶液。供試品溶液：取供試品0.160 g，精密稱定，置于碘量瓶中，加入叔丁醇和高氯酸各25 mL的混合溶液，超聲使其完全溶解，即得。

2.1.6操作取供試品溶液，加入0.05 mL鄰二氮菲指示液，用硫酸鈰滴定液(0.1 mol·L-1)滴定至粉色消失，并將滴定結(jié)果用空白實(shí)驗(yàn)校正，每1 mL硫酸鈰滴定液(0.1 mol·L-1)相當(dāng)于19.21 mg的C18H19Cl2NO4?？瞻兹芤?份，測定1次；供試品溶液3份，各測定1次。

2.2干燥質(zhì)量測定取恒質(zhì)量的空瓶，分別稱取樣品30.458 85和31.255 00 g；干燥后的質(zhì)量分別為30.456 92和31.253 16 g；干燥失質(zhì)量分別為0.019 30%和0.018 40%。非洛地平2次干燥失質(zhì)量值均≤0.2%，符合歐洲藥典規(guī)定[5]。

2.3專屬性該方法基于非洛地平二氫吡啶環(huán)上活潑氫具有還原性，因此選擇在酸性介質(zhì)中，通過鈰量法測定其含量。

2.3.1溶液配制空白溶液：配制方法見2.1.5，平行配制2份。

2.3.2空白滴定分析分別量取空白溶液0.03和0.04 mL，按照2.1.6項(xiàng)下描述的滴定條件，平行測定2次，得均值0.035 mL，空白消耗體積不超過0.15 mL，小于可接受標(biāo)準(zhǔn)，符合專屬性要求。

2.4精密度

2.4.1空白溶液、供試品溶液配制方法見2.1.5，空白溶液配制1份，供試品溶液平行配制6份；取上述空白溶液和6份供試品溶液，加入0.05 mL鄰二氮菲指示液，用硫酸鈰滴定液(0.1 mol·L-1)滴定至粉色消失，并將滴定結(jié)果用空白實(shí)驗(yàn)校正。計(jì)算供試品中C18H19Cl2NO4的含量，并報(bào)告結(jié)果的RSD值。

2.4.2可接受標(biāo)準(zhǔn)重復(fù)測定6份供試品溶液，C18H19Cl2NO4的含量在99.0%～101.0%范圍內(nèi)，RSD<0.5%。

2.4.3實(shí)驗(yàn)結(jié)果所測6個(gè)樣品的RSD值為0.01%，小于可接受標(biāo)準(zhǔn)，符合重復(fù)性要求。見表1～3。

表1重復(fù)性實(shí)驗(yàn)測定

Tab.1 Results of repeatability test

測定次數(shù)稱樣量/g消耗體積/mL空白溶液體積/mL1-S/%含量/%平均含量/%RSD/%10.16048.340.0499.9899.6299.620.0120.16028.330.0499.9899.6230.16088.360.0499.9899.6140.16008.320.0499.9899.6350.16068.350.0499.9899.6260.15968.300.0499.9899.64

注：1-S為干燥質(zhì)量測定后非洛地平的真實(shí)質(zhì)量。

表2重復(fù)性實(shí)驗(yàn)結(jié)果

Tab.2 Results of repeatability test

測定次數(shù)稱樣量/g消耗體積/mL空白溶液體積/mL1-S/%含量/%平均含量/%RSD/%10.16058.340.0399.9899.6899.690.1220.16098.380.0399.9899.9130.15988.300.0399.9899.6440.16018.310.0399.9899.5750.16028.320.0399.9899.6360.15068.350.0399.9899.74

注：1-S為干燥質(zhì)量測定后非洛地平的真實(shí)質(zhì)量。

表3重復(fù)性與中間精密度實(shí)驗(yàn)

Tab.3 Repeatability and precision tests

結(jié)果分析人A結(jié)果/%分析人B結(jié)果/%199.6299.68299.6299.91399.6199.64499.6399.57599.6299.63699.6499.74平均值/%99.66RSD/%0.09

結(jié)果顯示，所測12個(gè)樣品的RSD值為0.09%，符合規(guī)定(由重復(fù)性和中間精密度得到的12個(gè)結(jié)果的RSD應(yīng)≤0.5%)，符合重復(fù)性要求。

2.5溶液穩(wěn)定性取非洛地平0.160 g，精密稱定，置于碘量瓶中，分別加入25 mL的叔丁醇與高氯酸溶液，超聲使其完全溶解。配制時(shí)間為0 h，分別在配制后0，0.5，1.0，1.5，2.0和3.0 h(可根據(jù)實(shí)際操作延長或更改時(shí)間)，加入0.05 mL鄰二氮菲指示液，用硫酸鈰滴定液(0.1 mol·L-1)滴定至粉色消失，并將滴定結(jié)果用空白實(shí)驗(yàn)校正；計(jì)算放置后不同時(shí)間點(diǎn)非洛地平的含量，并將結(jié)果與0 h比較，其比值應(yīng)在0.990～1.010之間。結(jié)果表明，各個(gè)時(shí)間點(diǎn)非洛地平的含量與0 h相比，其比值在均在0.990～1.010之間，非洛地平溶液在該段時(shí)間內(nèi)穩(wěn)定。見表4。

表4穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)結(jié)果

Tab.4 Results of stability tests

時(shí)間/h稱樣量/g消耗體積/mL空白溶液體積/mL1-S/%含量/%與0h的比值0 0.16098.380.0499.9899.790.50.16078.380.0499.9899.921.00121.00.16058.390.0499.98100.161.00361.50.15998.310.0499.9899.579.97802.00.16088.390.0499.9899.971.00183.00.15108.400.0499.9899.971.0018

注：1-S為干燥質(zhì)量測定后非洛地平的真實(shí)質(zhì)量。

2.6線性與范圍精密稱定非洛地平0.127 0，0.142 8，0.158 6，0.175 1和0.190 3 g；0.129 4，0.145 6，0.161 7，0.178 3和0.193 9 g，分別置于碘量瓶中，各加入25 mL叔丁醇與高氯酸溶液，超聲使其完全溶解，制成含非洛地平80%～120%的2組線性溶液。取空白溶液和80%～120%線性溶液，加入0.05 mL鄰二氮菲指示液，用硫酸鈰滴定液(0.1 mol·L-1)滴定至粉色消失，并將滴定結(jié)果用空白實(shí)驗(yàn)校正。以其每個(gè)濃度點(diǎn)的2次稱樣量的平均值(X)對校正后消耗滴定液的平均體積(Y)進(jìn)行二元線性回歸，見表5。

表5滴定實(shí)驗(yàn)結(jié)果

Tab.5 Results of titration test

體積分?jǐn)?shù)/%稱樣量平均值/g消耗平均體積/mL空白溶液體積/mL含量/%800.12826.720.04100.32900.14427.540.04100.131000.16028.340.0499.681100.17679.240.04100.241200.192110.010.04100.32

線性方程:V=51.782m+0.033 4(V為校正體積，m為稱樣量)，r=0.999 9。表明樣品在80%～120%范圍內(nèi)，校正體積與稱樣量線性關(guān)系良好。

表62種方法測定3批樣品含量結(jié)果

Tab.6 Comparison of content determination of 3 batches of samples by 2 methods

制劑批號(hào)樣品編號(hào)EP法測定含量/%Ch.P法測定含量/%130121199.3299.31299.3699.33399.4499.34130122499.4699.50599.4499.41699.6399.71130123799.8399.81899.8499.73999.7799.82x±s99.56±0.2099.55±0.22t測0.610.54F測0.020.90

由表6可知，2種不同檢測方法，對同一樣品檢測結(jié)果不存在顯著性差異，所以2種方法可以互相替代(P≥0.05)。

3結(jié)論

非洛地平為選擇性鈣離子拮抗藥，由阿斯利康公司開發(fā)和推出，是一種對血管有高度選擇性的二氫吡啶類鈣離子拮抗劑，本品化學(xué)名稱為4-(2，3-二氯苯基)-1，4-二氫-2，6-二甲基-3，5-吡啶二羧基乙基甲基酯[6]。二氫吡啶類鈣拮抗劑是通過減少細(xì)胞內(nèi)鈣離子的含量，舒張血管平滑肌，從而達(dá)到降低血壓的目的。近年來，通過不斷研究發(fā)現(xiàn)，非洛地平藥物治療慢性充血性心力衰竭效果明顯[7]。本文在質(zhì)量控制方面，也做了一些方法改進(jìn)，《中國藥典》對非洛地平含量測定是用三氧化二砷標(biāo)定的硫酸鈰滴定液，但砷對人體有害，因此本法參考Ph.Eur.7.4中非洛地平的含量測定方法，改用硫代硫酸鈉標(biāo)定的硫酸鈰滴定液(0.1 mol·L-1)對非洛地平進(jìn)行含量測定，避免了砷離子在質(zhì)量檢測中的應(yīng)用，為確保檢驗(yàn)數(shù)據(jù)的科學(xué)性、準(zhǔn)確性和真實(shí)性，對該方法進(jìn)行驗(yàn)證，經(jīng)過驗(yàn)證比較，該方法專屬性強(qiáng)，精密度(RSD<0.5%)和穩(wěn)定性都符合要求，在80%～120%范圍內(nèi)，校正體積與稱樣量線性關(guān)系良好(r=0.999 9)，最后通過比較2種方法測定3批樣品含量結(jié)果，采用F檢驗(yàn)和配對t檢驗(yàn)，結(jié)果顯示，2種不同檢測方法對同一樣品檢測結(jié)果不存在顯著性差異(P≥0.05)，所以2種方法可以互相替代。此方法只是將標(biāo)定液做了改進(jìn)，但這是該方法首次應(yīng)用于國內(nèi)該仿制藥的檢測，選用比較安全無害的硫代硫酸鈉，操作簡便、用時(shí)短、提高了質(zhì)檢員的依從性，便于實(shí)驗(yàn)的進(jìn)行。

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Content determination for felodipine by using European Pharmacopoeia method

ZHANG Jianhong1，DING Yongying1，ZHANG Xiaohong2

(1.Department of Pharmacy，the Hankou Hospital，Wuhan 430012，China；2.Wuhan Maternity and Child Health Care Hospital， Wuhan 430000，China)

Abstract:Objective To establish a method for the content determination of felodipine. Methods Cerous sulfate standard solution demarcated by sodium thiosulfate was used to measure the content of felodipine，and compared with the results obtained by the method of Ch.P. Results The titration volume and the drug ammount showed a good linear relationship in the range of 80%-120%.The regression equation was V=51.782 m+0.033 4(r=0.999 9).There was no significant difference between the results obtained from the two methods(P>0.05).Conclusion The method is simple，safe，quick and accurate.It is suitable for the quality control of the product.

Key words:felodipine；accuracy；content determination

(收稿日期：2015-08-01)

中圖分類號(hào)：R927.2

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

文章編號(hào)：1004-2407(2016)03-0257-03

doi:10.3969/j.issn.1004-2407.2016.03.011