高效液相色譜法測定飲料中合成色素不確定度評估

王　蕾，任志彬

（1.邯鄲出入境檢驗檢疫局，河北邯鄲　056017；2.河北工程大學農學院，河北邯鄲　056038）

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高效液相色譜法測定飲料中合成色素不確定度評估

王蕾，任志彬

（1.邯鄲出入境檢驗檢疫局，河北邯鄲056017；2.河北工程大學農學院，河北邯鄲056038）

摘要：根據SN/T 1743-2006《食品中誘惑紅、酸性紅、亮藍、日落黃的含量檢測高效液相色譜法》方法，利用高效液相色譜測定飲料中合成色素的含量，通過分析不確定度來源，建立測量過程的數學模型。

關鍵詞：誘惑紅；亮藍；日落黃；不確定度

合成色素具有色澤鮮艷，著色力強，穩定性好，易溶于水，易調色，品質均一，成本低廉等優點，目前已得到廣泛應用。不確定度作為與檢測結果相聯系衡量檢測水平高低的參數，越來越受到世界各國的重視。本文根據SN/T 1743-2006［1］方法，利用配有紫外檢測器的高效液相色譜儀檢測飲料中的誘惑紅、亮藍、日落黃三種合成色素，進行加標回收實驗，建立數學模型，討論測定過程中各分量對檢測結果的不確定度貢獻［2-4］，通過不確定度評估［5］，發現對實驗結果影響較大的因素，通過改進減少誤差，提高檢測結果準確性。

1　材料與方法

1.1儀器與試劑

Waters e2695高效液相色譜儀配紫外檢測器，C18反相色譜柱。誘惑紅［GBW（E）100164］、亮藍［GBW（E）100162］、日落黃［GBW（E）100159］，由北京海岸鴻蒙標準物質技術有限責任公司提供。

1.2高效液相色譜分析條件

甲醇/乙酸銨（0.02mol/L）淋洗液梯度洗脫：甲醇20%～35%，3%/min；35%～98%，9%/min；98%～98%，繼續6min。進樣量：10uL；檢測波長：254nm；柱溫：室溫。

1.3樣品測定方法

依據SN/T 1743-2006［1］，取50g飲料樣品，加熱驅除二氧化碳，然后用水稀釋定容至50mL，經0.45um濾膜過濾后供液相色譜分析，外標法定量。

1.4計算公式

式中：

X——樣品中色素的含量，單位為克每千克或克每升（g/kg或g/L）；

m——樣液中色素的量，單位為微克（ug）；

M——樣品量，單位為克或毫升（g或mL）；

V1——樣品稀釋總體積，單位為毫升（mL）；

V2——進樣體積，單位為毫升（mL）。

1.5不確定度來源分析

（1）樣品處理時，稱量ure（m）和定容urel（V50mL）引入的不確定度。

（2）高效液相色譜儀引入的不確定度。

（3）標準溶液引入的不確定度。

（4）重復測量引入的不確定度。

2　不確定度評定

2.1稱量引入的不確定度urel（m）

應用分度值為10mg的分析天平，稱量樣品50.00g，查閱天平檢定證書，在0～50g范圍內，天平的誤差為0.005g，按照矩形分布，由天平稱量導致樣品質量的不確定度按均勻分布為：

2.2定容引入的不確定度urel（V）

樣品定容引入的不確定度因素主要包括50 mL容量瓶體積校準和溫度變化兩個方面。

根據JJG 196-2006［6］，A級50 mL容量瓶允許的最大允差為±0.05mL，假設為矩形分布，其相對不確定度為：

實驗中控制室溫為20℃±5℃，水的體積膨脹系數為2.1×10-4/℃，按照矩形分布則u（V2）=

2.3高效液相色譜儀引入的不確定度urel（Y）

實驗使用Waters e2695高效液相色譜儀，檢定證書給出在k=2時，標準不確定度為0.2%，其引起的相對標準不確定度分量為0.001。

2.4標準溶液引入的不確定度urel（C）

本實驗所用的三種標準品，誘惑紅［GBW（E）100164］、亮藍［GBW（E）100162］、日落黃［GBW（E）100159］的相對擴展不確定度均為1%（k=2），則由標準品純度引入的不確定度為0.005。

標準溶液原液濃度為1mg/mL，5mL/支，將其配制成濃度梯度為10ug/mL，20ug/mL，30ug/mL，40ug/mL，50ug/mL的標準溶液工作曲線。配置過程中的不確定度主要由20-200uL、100-1000uL移液器和10mL容量瓶引入。查儀器設備校準證書得移液器的擴展不確定度均為0.6%（k=2），根據JJG196-2006［6］，算法同2.2，10mL容量瓶引入的不確定度為0.00115，則由標準溶液配制引入的不確定度為：u（C2）=

標準溶液引入的相對不確定度urel（C）=

2.5重復測量引入的不確定度urel（S）

用濃度為1μg /mL人工色素標準溶液進行加標回收率的測定，其前處理及測定過程與實際飲料樣品一致，重復7次。由貝塞爾公式法得到：

表1　重復測量結果（n=7）

3　合成標準不確定度

相對標準不確定度：urel（X）=，則urel（X）紅=0.008007，urel（X）藍=0.008017，urel（X）黃= 0.008007。

取置信概率為95%，則k=2，擴展不確定度：U=u（X）×2

U紅=u（X）紅×2=0.0070×2=0.014（mg/kg），

U藍=u（X）藍×2=0.0090×2=0.018（mg/kg），

U黃=u（X）黃×2=0.0070×2=0.014（mg/kg）。

參考文獻：

［1］SN/T 1743-2006.食品中誘惑紅、酸性紅、亮藍、日落黃的含量檢測高效液相色譜法［S］.北京:中國標準出版社，2006.

［2］李錦，等.離子色譜法測定牛乳中硫氰酸鹽含量的不確定度評估［J］.食品安全質量檢測學報，2015，6，（10）:3810-3816.

［3］蘭淑惠，等.高效液相色譜法測定食品中甲醛的測量不確定度評定［J］.大眾科技，2014，16，（179）:56-57，68.

［4］李芳，等.氣相色譜法測定果蔬中毒死蜱的不確定度評定［J］.廣州化工，2014，42，（22）:136-138，180.

［5］JJF1059.1-2012.測量不確定度評定與表示［S］.北京:中國標準出版社，2012.

［6］JJG196-2006.常用玻璃量器檢定規程［S］.北京:中國計量出版社，2006.

［作者簡介］王蕾（1991-），女，河北邢臺人，河北工程大學研究生.

［收稿日期］2016-03-15

中圖分類號：O657.7

文獻標識碼：A

文章編號：1672-4658（2016）02-0191-02