蜂王漿酶解產物特性及生理功能研究進展

陳靜 謝小花 戴緣緣 安曉婷

摘 要：蜂王漿營養豐富，是傳統的滋補佳品，具有多項生理保健功效，其生理活性與干重中含量最高的蛋白質關系密切，但蜂王漿中蛋白質不穩定，儲藏過程中容易發生變化，影響其生理活性的發揮。該文主要綜述了蜂王漿酶解產物的穩定性等特性及生理功能，為蜂王漿在食品、藥品、化妝品等領域的應用提供一定的參考。

關鍵詞：蜂王漿；酶解產物；特性；生理功能

中圖分類號 S896.3 文獻標識碼 A 文章編號 1007-7731（2016）13-0044-03

蜂王漿又名蜂王乳、蜂皇漿等，由5～15日齡工蜂舌腺和上顎腺分泌，呈乳白色或淡黃色，是一種專門用來喂養蜂王及3日齡幼蜂的特殊漿狀物質。蜂王漿是介于食品和藥品之間的天然保健食品，營養價值極高且沒有任何毒副作用[1-2]。新鮮蜂王漿中水分含量占62.5%～70%，干物質含量占30.0%～37.5%，蛋白質在其干重中所占比例最高，另外還含有脂類、糖類、游離氨基酸、維生素、礦物質、活性蛋白酶等物質，具有延緩衰老、增強機體免疫力、抗氧化、抗腫瘤、抗菌、抗高血壓等多項生理保健功效[3-4]。但是蜂王漿很不穩定，尤其是其中含量較高且與其生理功效關系密切的蛋白質在儲藏的過程中很容易發生變化，從而影響了蜂王漿生理功效的發揮并使其營養價值降低。本文主要介紹蜂王漿酶解產物的特性及其生理保健功效，為蜂王漿儲藏、產品開發、功能性研究提供參考。

1 蜂王漿蛋白質穩定性的研究

新鮮蜂王漿中蛋白質含量占12%～15%，由水溶性蛋白和水不溶性蛋白組成，含量在46%～89%的水溶性蛋白是蜂王漿蛋白的主要組成成分。蜂王漿成分復雜，含有多種生理活性成分，其對儲藏條件要求較高，一般在低溫條件下冷凍保藏，其中的蛋白質隨著溫度和時間等條件的變化會發生降解[5]。

張紅城等通過SDS-PAGE凝膠電泳法對在常溫下貯存5個月的蜂王漿品質進行研究，結果表明，蜂王漿中的兩種水溶性蛋白（相對分子質量分別為85.2kD和60.7kD）發生了降解，且比57kD的蛋白降解更明顯[6]。張娟等研究表明，在-20℃儲存條件下，蜂王漿水溶性蛋白較穩定，在40d后P1（分子量為88kDa）譜帶開始降解，且降解速度較慢；而在4℃條件下，5d內P1譜帶就迅速降解；20℃條件下，P1譜帶的降解速度更快，而水溶性蛋白中P1譜帶變化可在一定程度上代表蜂王漿的新鮮度[7]。孫曉軍等研究了35d內蜂王漿在不同的儲藏溫度下（-18℃、4℃及25℃）品質的變化，發現隨著溫度升高及貯存時間的延長，蜂王漿的穩定性漸漸變差，水溶性蛋白含量也逐漸下降[8]。

我國是蜂王漿的生產大國，研制出了很多的蜂王漿產品，如凍干粉、口服液、膠囊等。由于蜂王漿尤其是其中蛋白質的不穩定性，使蜂王漿產品的應用推廣受到了一定的限制，有時候也會將其中蛋白質去除后再添加進各類食品中去，但這樣會造成資源浪費和營養損失。通過酶法對蛋白質進行改性后，不僅可使蛋白質的消化吸收率和穩定性得到了提高，而且改善了其持水性、溶解性等功能特性[9]。

2 蜂王漿酶解產物特性及生理功能研究

2.1 穩定性 程尚等選用蛋白酶K對蜂王漿進行酶解，并研究了在優化水解條件下獲得的酶解產物經過酸（pH4.0）、堿（pH10.0）和熱（70℃）處理30min后的穩定性，結果表明該酶解產物在酸、堿及熱的條件下穩定性均較高[10]。戚向陽分別采用4種蛋白酶對蜂王漿進行酶解，發現酶解產物的對熱和酸穩定性與原漿相比明顯增強，其中復合蛋白酶酶解效果最好，對復合蛋白酶水解條件優化后制備出的酶解產物酸、熱穩定性和水溶性提高很多[9]。劉佳霖等選用4種不同蛋白酶（木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、菠蘿蛋白酶和無花果蛋白酶）對蜂王漿進行酶解，發現中性蛋白酶酶解產物中水溶性蛋白質提取率明顯高于其余3種酶解產物，且與對照組比較，水溶性蛋白總量差異不顯著，酶解產物在酸堿及熱的環境下穩定性較強[11]。

2.2 吸濕保濕性 季文靜等采用木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和胰蛋白酶對蜂王漿進行水解，發現在20℃、相對濕度分別為81%、43%條件下，胰蛋白酶的吸濕保濕性能較好。在優化后的胰蛋白酶酶解條件下制備的酶解物與原漿和骨膠原相比表現出更好的吸濕保濕性能，且具有分子量小、溶解性好等優點[12]。李英華等采用堿性蛋白酶對蜂王漿進行水解，并以蜂王漿凍干粉及骨膠原為參照，測定了酶解產物在25℃、相對濕度分別為20%、50%及65%條件下吸濕及保濕性能，結果表明，在優化后的酶解條件下，酶解產物與凍干粉及骨膠原相比吸濕保濕性明顯提高[13]。

2.3 抗氧化作用 Hang Guo等選用6種蛋白酶對對蜂王漿進行酶解，并分別比較了不同酶解物對亞油酸過氧化的抑制作用，結果表明，與鮮漿相比酶解物抑制亞油酸過氧化的作用顯著提高，且蛋白酶N的活性最高，其酶解物中小于1kDa的組分抗氧化活性優于其他組分[14]。許建香等采用胃蛋白酶、胰蛋白酶以及胃-胰蛋白酶對蜂王漿進行水解，分別測定蜂王漿水溶性蛋白和各酶解產物的抗氧化活性，結果表明，蜂王漿水溶性蛋白本身抗氧化活性非常弱，但是酶解以后抗氧化活性明顯增強，且胃-胰酶解產物活性最強，采用膜分離技術對該產物分離后發現，其小于1kDa的酶解物表現出最強的清除DPPH、抑制亞油酸氧化以及總抗氧化能力[15]。

2.4 降血壓作用 近年來，隨著經濟的高速發展和生活水平的快速提高，高血壓已經成為人們危害健康的一類多發疾病，對健康危害極大。血管緊張素轉化酶（簡稱ACE）能使血管緊張素I結構改變，轉化為具有較強升血壓作用的血管緊張素II，而且ACE還能使舒緩激肽失去降血壓作用[16]，因此能抑制ACE活性的物質都有顯著的降血壓活性。Toshiro Matsui等采用胃蛋白酶、胰凝乳蛋白酶和胰蛋白酶三種蛋白酶共同對蜂王漿進行水解，制備的酶解物對ACE的 IC50達0.099mg/mL，表現出很高的降血壓活性，而鮮漿及蜂王漿蛋白組分則未表現出ACE抑制活性，對自發性高血壓大鼠飼喂酶解物，發現其心臟收縮壓明顯降低[17]。許建香等運用RP-HPLC法分別測定了蜂王漿水溶性蛋白及兩種純化蛋白、酶解產物、水溶性蛋白質及酶解產物分離物的ACE抑制活性，結果表明，水溶性蛋白及純化蛋白ACE抑制活性較弱，而酶解產物ACE抑制活性顯著增強，且分子量小于1kDa的分離物ACE抑制活性最強[18]。Katsu-hiko T等用蛋白酶N對蜂王漿進行酶解，從酶解產物中分離得到3種小肽，其體內外試驗結果均表明其具有很強的降血壓活性[19]。張偉光等研究表明，采用胃-胰蛋白酶對蜂王漿進行酶解后制備的酶解物與原漿相比表現出很強的ACE抑制活性，其中分子量小于1kDa的分離物活性最強，IC50為0.33mg/mL[20]。

2.5 其他生理活性 季文靜研究發現蜂王漿酶解產物有一定的抗衰老和提高免疫力的作用。在優化的胰蛋白酶水解條件下，制備出的蜂王漿酶解產物低劑量時，可干預由D-半乳糖誘導的小鼠體重降低狀況，高劑量能改善抗衰老小鼠的活動能力下降情況。同時，與衰老小鼠相比，低劑量蜂王漿酶解物表現出顯著的對脂多糖刺激下小鼠的脾臟B淋巴細胞轉化的促進作用，高劑量效果更顯著，且與原漿相比差異顯著[21]。勵建榮等采用胃蛋白酶、胰蛋白酶以及胃-胰蛋白酶對蜂王漿進行酶解，比較了蜂王漿水溶性蛋白以及不同酶解產物對α-葡萄糖苷酶和胰脂肪酶的抑制活性，結果表明，胃蛋白酶酶解產物與原漿及其他酶解產物相比抑制活性最強，且分子量在650Da以下的組分抑制活性最強，說明酶解產物可能對肥胖、Ⅱ型糖尿病患者以及潛在人群健康有利[22]。

3 結語

蜂王漿中蛋白質含量豐富，且與其生理功效密切相關，但由于蛋白質在儲藏過程中不穩定，容易發生變化，嚴重影響蜂王漿的品質，通過對蜂王漿進行酶法修飾以后，制備出的酶解物多肽含量高，且由于多肽分子量較小，酶解物消化吸收率和穩定性都得到了明顯提高。本文主要介紹了目前有關蜂王漿酶解產物的特性及生理功效的研究進展，為蜂王漿產品的開發利用提供一定的借鑒。

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