XE-2100光學法測血小板在大血小板測定中的應用

解學龍，張利仁

(1.宜賓市第二人民醫院檢驗科，四川宜賓 644000；2.瀘州醫學院，四川瀘州 646000)

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·臨床研究·

XE-2100光學法測血小板在大血小板測定中的應用

解學龍1，張利仁2

(1.宜賓市第二人民醫院檢驗科，四川宜賓 644000；2.瀘州醫學院，四川瀘州 646000)

摘要:目的探討SYEMEX XE-2100光學法檢測含大血小板比例高的標本血小板計數的準確性。方法用手工計數法、電阻抗法、光學法同時測定同一標本中血小板數，以手工計數法為標準，對收集數據進行配對t檢驗和相關分析。結果SYEMEX XE-2100光學法對含大血小板比例高的標本血小板計數測定重復性好，在對380例標本相關分析結果顯示光學法測定結果比電阻抗法更接近參考方法。結論在血小板計數結果疑似有大血小板時使用SYEMEX XE-2100光學法測定血小板結果更準確。

關鍵詞:電阻抗法；光學法；大血小板

血小板計數對血液系統疾病的診斷與治療有重要的參考價值。準確計數血小板(PLT)在PLT減少性疾病的診斷和治療過程中非常重要。血小板計數的準確性是臨床醫生和檢驗人員共同關注的問題，尤其是大血小板的準確計數，孕婦、心血管疾病、血液病等患者血液中含大血小板較多，大多數血細胞分析儀測定血小板因采用電阻抗法受限于其功能，多無法準確計數，從而使血小板假性降低[1-2]。因此，準確計數血小板尤為重要。日本希森美康公司Sysmex XE-2100型全自動血液分析儀采用電阻抗和流式細胞激光技術．其計數血小板采用了電阻法及二維激光散兩種方法來測定血小板[3-5]。為了探討光學法檢測大血小板的應用價值．分別用XE-2100血液分析儀的電阻抗法和光學法以及手工鏡檢計數法對380例涂片鏡檢有大血小板且血小板計數小于100×109/L標本和80例無大血小板的對照標本進行血小板計數，現報道如下。

1材料與方法

1.1標本來源380例樣本均為本院患者血小板數量小于100×109/L(大血小板組)，均經涂片、染色、鏡檢證實，其血標本含較多大血小板且無血小板聚集，電阻抗法測定結果均顯示直方圖異常，建議復查。80例樣本均為本院患者血小板數量小于100×109/L(對照組)，均經涂片、染色、鏡檢證實，其血標本無大血小板和血小板聚集，電阻抗法測定結果均顯示直方圖正常。本院住院患者靜脈血標本用EDTA-K2抗凝，抗凝抽靜脈血2 mL。

1.2儀器與試劑日本希森美康公司Sysmex XE-2100全自動血液分析儀，用配套校正品校正，原裝配套試劑。

1.3方法分別用Sysmex XE-2100的電阻抗法(PLT-I)和光學法(PLT-0)及手工鏡檢法(PLT-M)，3種方法分別對上述380例含有大血小板的標本和80例無大血小板的對照標本進行血小板計數。電阻抗法(PLT-I)檢測采用儀器第3檢測模式(CBC+DIFF)進行檢測；光學法(PLT-0)檢測用儀器第4檢測模式(CBC+DIFF+RET)進行檢測；以手工鏡檢法為標準，判斷Sysmex XE-2100計數血小板結果的準確性，手工計數采用顯微鏡法:草酸銨稀釋液0.38 mL 加20 μL 血液，混勻，充分溶血后吸取PLT懸液注入牛鮑計數池，由兩名中級職稱技術人員鏡檢計數PLT，每份標本計數2 次，取平均值。實驗在采血后4 h內完成。鏡檢法PLT稀釋液，按《全國臨床檢驗操作規程(第3版)》配制[6]，OLYMPUS顯微鏡。方法為世界衛生組織(WHO)推薦的草酸銨稀釋液法。

2結果

2.1電阻抗法與手工法檢測結果比較大血小板組電阻抗法與手工鏡檢法兩種方法比較差異有統計學意義(P<0.05)，對照組電阻抗法與手工鏡檢法兩種方法比較差異無統計學意義(P>0.05),檢測結果及數據見表1。

表1　電阻抗法和手工鏡檢PLT檢測結果

2.2光學法與手工鏡檢法檢測結果比較大血小板組光學法與手工鏡檢法兩種方法比較差異無統計學意義(P>0.05)，對照組電阻抗法與手工鏡檢法兩種方法比較差異無統計學意義(P>0.05),檢測結果及數據見表2。

2.3電阻抗法與光學法檢測結果比較大血小板組電阻抗法與光學法兩種方法比較差異有統計學意義(P<0.05)，對照組電阻抗法與光學法兩種方法比較差異無統計學意義(P>0.05),檢測結果及數據見表3。

表2　光學法和手工鏡檢PLT檢測結果

表3　電阻抗法與光學法PLT檢測結果

3討論

準確計數外周血的血小板一直都是醫學界關注的重要話題[7-9]。血細胞分析儀測定紅細胞血小板在同一通道中使用電阻抗法，根據顆粒大小來區分紅細胞血小板[10]，小紅細胞的存在便會干擾PLT計數的準確性，從而導致PLT結果假性增高；而當血液標本中PLT顆粒大于30 fL時，儀器便會把PLT當成紅細胞計數從而導致PLT結果假性減少[11]。WHO推薦的血小板計數參考方法，也存在血小板在計數板上的分布誤差，充池是否均勻等眾多因素的影響。而最大的缺點是計數的血小板太少，檢測速度慢，重復性較差[7]。而衛生部行業標準規定的PLT計數參考方法為熒光標記PLT特異抗體流式細胞術[12]。此法煩瑣且價格昂貴，難以推廣應用，僅適用于特殊病例和用于建立參考方法和校準儀器[13-14]。

本研究380例涂片鏡檢有大血小板且血小板計數小于100×109/L標本的電阻抗法血小板計數結果低于光學法和人工鏡檢法，電阻抗法測定結果與光學法和人工鏡檢法比較差異有統計學意義(P<0.05)，而光學法與WHO推薦的人工鏡檢法比較差異無統計學意義(P>0.05)。在80例無大血小板的對照組中電阻抗法血小板計數結果與光學法和人工鏡檢法較差異無統計學意義(P>0.05)。分析其主要原因是SYEMEX XE-2100測定血小板光學原理為半導體激光流式細胞檢測，在血小板進行熒光染色后，對每個血小板從高低角度二維激光掃描，即用前向散射光檢測血小板體積，側向熒光對血小板內部RNA和DNA成分進行鑒別計數。在流式細胞儀通道被熒光物質標記后用熒光識別，由于紅細胞(包括小紅細胞和紅細胞碎片不會對熒光著色，根據細胞大小和熒光強度可以把小紅細胞及其他雜質與血小板區分開，從而排除干擾，得到更可靠的血小板結果。該法可對大血小板、小紅細胞、細胞碎片、脂類與蛋白的聚合體、免疫復合物等進行有效鑒別，提供一個更為準確血小板計數的結果[15-17]。

總之,Sysmex XE-2100光學法血小板測定可以較為準確的測定混有大血小板的異常血液標本的血小板數，為檢測血小板數提供一個準確而客觀的重要手段。

參考文獻

[1]曾令軍，王保龍，馬筱玲，等．XE-2100血細胞分析儀對巨大血小板計數的評價[J]．罕少疾病雜志，2012，6(3)：22-25．

[2]薛飛平，孫瑞雪，吳禮鋒．三種方法對巨大血小板的檢測分析[J]．檢驗醫學，2010，25(5)：398-400．

[3]閉雄杰．Sysmex XE-2100血液分析儀光學法計數血小板在血小板直方圖異常時的應用價值[J]．臨床和實驗醫學雜志，2006，23(12)：1949-1950．

[4]元幼紅，徐衛益，陳保德．XE-2100血液分析儀光學法血小板計數的臨床應用[J]．中國衛生檢驗雜志，2010(10)：2526-2528．

[5]華江，潘揚．不同檢測方法計數血小板的準確性評價[J]．臨床檢驗雜志，2015(1)：12-13．

[6]葉應嫵，王毓三，申子瑜．全國臨床檢驗操作規則[M]．3版．南京：東南大學出版社，2006：136．

[7]曾婷婷，左成華，郭曼英，等．光學法血小板計數作為低血小板標本復檢方法的可行性研究[J]．現代檢驗醫學雜志，2007(6)：39-41．

[8]李果，高兵，彭政，等．光學法計數在低值血小板檢測中的研究應用[J]．臨床血液學雜志:輸血與檢驗版，2009(2)：189-190．

[9]劉非，高秀蓉，曾蘭蘭，等．大血小板影響光學法與電阻抗法血小板計數差異的比較分析[J]．國際檢驗醫學雜志，2014，35(13)：1766-1767．

[10]劉美玲，曾穎．XT-4000i血液分析儀血小板兩種測定方法與血涂片復檢的對比分析[J]．中國衛生產業，2014，20(11)：156-158．

[11]馮光．電阻抗法和光學法檢測血小板數的比較評價[J]．廣州醫藥，2012，22(3)：47-49．

[12] 中華人民共和國衛生行業標準.WS/T 244-2005 PLT計數參考方法[S]．北京：中華人民共和國衛生行業標準，2005.

[13]朱忠勇．準確計數血小板方法學研究進展[J]．國外醫學臨床生物化學與檢驗學分冊，2002，23(3)：131-132．

[14]王建中，屈晨雪．三種流式細胞術計數血小板方法的比較研究[J]．中華檢驗醫學雜志，2003，26(1)：7-11．

[15]羅麗貞，葉金鋒，劉偉陽．XE-5000血細胞分析儀血小板計數性能評價[J]．檢驗醫學與臨床，2011，8(4)：400-402．

[16]劉非，楊紅玲，梁綺華，等．紅細胞體積分布寬度引起光學法和電阻抗法血小板計數的差異分析[J]．國際檢驗醫學雜志，2012，33(14)：1750-1752．

[17]范小斌，羅燕飛．兩種血小板計數方法的比較及評價[J]．廣州醫學院學報，2012，40(5)：59-61．

(收稿日期：2016-01-25)

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.09.063

文獻標識碼：A

文章編號：1673-4130(2016)09-1288-03