體液細胞計數自動化檢測影響因素的研究

滕士階，周　彥△，徐承來，劉小林，賈　嶸，夏正萍，王　琨

(連云港市第二人民醫院：1.檢驗科；2.呼吸內科，江蘇連云港 222023)

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體液細胞計數自動化檢測影響因素的研究

滕士階1，周彥1△，徐承來1，劉小林1，賈嶸2，夏正萍1，王琨1

(連云港市第二人民醫院：1.檢驗科；2.呼吸內科，江蘇連云港 222023)

摘要:目的研究體液標本采集后不同的因素對檢測結果的影響。方法比較同一體液標本采集后是否使用抗凝劑、抗凝劑種類的選擇、樣本采集后的保存溫度、放置不同時間后結果的穩定性，對結果進行分析，得出不同因素對檢測結果的影響。結果腦脊液標本是否選用抗凝劑對結果無明顯不同；胸腹腔積液采用EDTA-K2抗凝，所有的檢測項目結果都比較穩定，而未使用抗凝劑和使用肝素鋰抗凝的標本保存2 h后有核細胞計數結果降低，特別是單個核細胞計數值明顯降低；體液標本分別在室溫、4 ℃中保存1 h后，數據開始有變動，單個核細胞計數值有減少的趨勢，紅細胞計數不論在室溫還是4 ℃保存結果都很穩定。結論排除上述影響因素的干擾，體液常規檢查自動化可為臨床提供快速、可靠的數據。

關鍵詞:診斷儀器和設備；體液常規檢查；抗凝劑；保存溫度；保存時間

胸腹腔積液、腦脊液等體液標本在進行常規檢查時存在速度慢、重復性差、缺乏生物安全保護等缺點，之前有過關于用尿沉渣分析儀和血細胞分析儀進行體液細胞計數的報道[1-2]，現階段出現了具有專門針對體液細胞計數、分類功能的血細胞分析儀，實現了體液細胞計數、分類的自動化和標準化。本文將進一步了解體液樣本采集有無使用抗凝劑、抗凝劑種類的選擇、樣本采集后的保存溫度、放置不同時間結果的穩定性等方面因素對檢測結果的影響，從而將各影響因素降到最低，為臨床診療工作提供可靠數據[3]。

1材料與方法

1.1儀器Sysmex XT-4000i全自動血細胞分析儀(以下簡稱XT-4000i，日本希森美康株式會社)；真空采血管(成都普什醫藥塑料包裝有限公司)；三洋冰箱(日本原裝)。

1.2試劑XT-4000i所用試劑均由日本希森美康株式會社提供。稀釋液(EPK)批號為G0530，嗜堿細胞溶血劑(FB)批號為R0025，白細胞分類溶血劑(FFD)批號為R0034，血紅蛋白溶血劑(SLS)批號為A0036,染色液(FFS)批號為A0008，均為原裝配套試劑。

1.3方法

1.3.1標本采集由臨床醫師采集體液標本，分別注入未抗凝、EDTA-K2抗凝、肝素鋰抗凝的真空管至標定刻度，立即送檢。

1.3.2標本檢測體液標本采集時分為未抗凝、EDTA-K2抗凝、肝素鋰抗凝3管。標本采集后立即上機進行檢測，記錄細胞計數、分類結果，通過將3管結果的比較來發現標本有無使用抗凝劑、抗凝劑種類的選擇對檢測結果的影響；再將每管標本分成2份，1份于室溫保存，1份4 ℃保存，分別在1、2、3、4 h上機檢測，記錄結果，觀察同一標本在不同的保存溫度、放置不同的時間后結果的穩定性。

1.4統計學處理因細胞數在正常范圍內標本對本研究無意義，故選擇采用直線相關和回歸分析。

2結果

2.1抗凝劑的選擇對檢測結果的影響選取的26份腦脊液標本分為未使用抗凝劑、使用EDTA-K2抗凝、使用肝素鋰抗凝3管，采集后立即上機檢測，將測定的有核細胞計數、分類[單核細胞(MN)絕對值、MN百分比]及紅細胞計數結果進行比較，未發現結果有明顯不同，見表1；選取的50份胸腹腔積液標本經EDTA-K2抗凝保存后，所有的檢測項目結果都比較穩定，而未使用抗凝劑和使用肝素鋰抗凝的標本保存2 h后有核細胞計數[多核白細胞(PMN)絕對值、PMN百分比]結果降低，特別是多個核細胞計數結果明顯降低，見表2。

2.2不同保存溫度、不同時間對檢測結果的影響無論在室溫或4 ℃中保存1 h后，體液單個核細胞數及百分比有減少趨勢；相對的，多個核細胞數及百分比有增高趨勢。體液紅細胞計數不論在室溫還是4 ℃保存結果都很穩定,見表3。

表2　抗凝劑的選擇對胸腹腔積液檢測結果的影響(n=50)

表3　不同保存溫度、不同時間對檢測結果的影響

3討論

腦脊液是存在于腦室及蛛網膜下腔中的無色透明液體，主要功能是保護腦和脊髓免受外力震蕩損傷、調節顱內壓、運送營養物質并運出代謝產物等；漿膜腔積液是胸腔積液、腹腔積液、心包腔積液和關節腔積液的總稱，一般情況下，漿膜腔內僅含有少量的液體起潤滑作用，病理情況下，漿膜腔內有大量的液體潴留而形成漿膜腔積液。根據產生的原因及性質不同，將漿膜腔積液分為漏出液和滲出液。

體液的細胞計數及有核細胞分類對于相關疾病的診斷和治療有著十分重要的意義。腦脊液紅細胞計數增多常見于穿刺損傷或出血性病變；有核細胞計數增多一般見于各種類型的腦膜炎；腦脊液中發現腫瘤細胞對于中樞神經系統腫瘤有確診價值，其陽性率為15%～40%，轉移性腫瘤的陽性率高于原發性腫瘤；漿膜腔積液紅細胞計數對于鑒別漏出液和滲出液意義不大，但惡性腫瘤引起的積液中血性積液占50%～85%，如能排除外傷因素，漿膜腔積液紅細胞計數增多最常見的原因是惡性腫瘤；有核細胞計數對于鑒別漏出液和滲出液有一定參考價值，漏出液中有核細胞數量常在100×106/L以下，滲出液中有核細胞數量常在500×106/L以上。積液中嗜酸性粒細胞增多是指嗜酸性粒細胞計數超過白細胞總數10%以上。引起胸腔積液嗜酸性粒細胞增多的最常見原因是血胸和氣胸，以及寄生蟲感染、過敏綜合征等，引起腹腔積液嗜酸性粒細胞增多最常見的原因有慢性腹膜透析、充血性心力衰竭、血管炎、淋巴瘤等。間皮細胞在人工有核細胞分類時通常歸入“單個核細胞”中，主要出現在漏出液中，增多常提示漿膜受刺激或漿膜損傷。

對于胸腹腔積液、腦脊液等體液標本來說，一直以來都是沿用人工方法進行細胞計數、分類，檢測結果易受主觀因素的影響，結果的準確性、重復性是不容易保證的，而且存在速度慢、重復性差、操作人員缺乏生物安全保護等缺點。多功能血液體液分析一體機實現了體液細胞計數、分類的自動化和標準化，但是儀器必須在使用前，對由儀器、試劑、校準品、質控品共同組成的檢測系統進行充分和正確的應用評價[4-5]。對于XT-4000i所報告的“高熒光強度細胞”(HF-BF,即可疑幼稚細胞)不可輕易報告，應人工在顯微鏡下進行確認[6]。本文通過人為地設置一些影響因素來對XT-4000i在體液自動化檢測方面進行評價，得出“體液標本采集后必須用EDTA-K2抗凝(腦脊液標本可不使用抗凝劑)并立即進行檢驗”的結論。將可能影響分析前質量保證的因素(如體液樣本采集有無使用抗凝劑、抗凝劑種類的選擇、樣本采集后的保存溫度、不同時間結果的穩定性等)降到最低[7]，XT-4000i可以準確、快速地進行體液細胞計數及分類，為臨床診療工作提供快速、真實、可靠的數據。

參考文獻

[1]章文.UF-100尿沉渣分析儀在小兒腦脊液及漿膜腔積液檢查中的應用[J].國外醫學臨床生物化學與檢驗學分冊,2004，25(3)：281.

[2]胡曉衛，白雯.自動化分析儀在胸腹水細胞計數及分類中的應用[J].陜西醫學雜志,2009,20(7)：928-929.

[3]陳德東，陳燕，陳忠明.影響血液、體液常見臨床標本分析前質量的因素及控制措施[J].福建醫藥雜志,2006,28(4)：99-101.

[4]魏昊，叢玉隆.醫學實驗室質量管理與認可指南[M].北京：中國計量出版社，2004：59-63.

[5]徐承來，張麗.CD-3500型全自動血細胞分析儀性能評價[J].蚌埠醫學院學報,2011,36(11)：1257-1259.

[6]中華醫學會檢驗分會全國血液學復檢專家小組，中國檢驗醫學雜志編輯委員會.全國血液學復檢專家小組工作會議紀要暨血細胞自動計數復檢標準釋疑[J].中華檢驗醫學雜志，2008，31(4)：380-382.

[7]榮愛紅，余文波.影響臨床檢驗結果的常見因素及控制方法[J].中國實驗診斷學,2005,9(3)：469.

(收稿日期：2016-01-28)

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.09.064

文獻標識碼：A

文章編號：1673-4130(2016)09-1290-03

△通訊作者,E-mail：xclzlxch@163.com。

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