老年糖尿病腎病患者血清內轉化生長因子-β1和過氧化物酶體增殖物活化受體-γ表達水平

陳　薔　俞　娉　于　冰

(杭州市第三人民醫院內分泌科，浙江　杭州　310009)

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老年糖尿病腎病患者血清內轉化生長因子-β1和過氧化物酶體增殖物活化受體-γ表達水平

陳薔俞娉于冰

(杭州市第三人民醫院內分泌科，浙江杭州310009)

〔摘要〕目的通過檢測糖尿病腎病(DN)患者血清轉化生長因子(TGF)-β1和過氧化物酶體增殖物活化受體(PPAR)-γ的蛋白含量及mRNA變化水平，探討二者是否參與DN的發病進程。方法DN患者50例作為DN組，同期體檢健康老年人50例作為對照組。兩組均清晨空腹取血，采用酶聯免疫吸附(ELISA)實驗和實時聚合酶鏈反應(RT-PCR)法檢測血清中TGF-β1和PPAR-γ的蛋白及mRNA水平。結果與對照組比較，DN組血清中TGF-β1的蛋白含量及mRNA水平明顯升高(P<0.01)、PPAR-γ的蛋白含量及mRNA水平明顯降低(P<0.01)，且TGF-β1和PPAR-γ具有負相關性(r=-0.689，P=0.042；r=-0.711，P=0.036)。結論TGF-β1水平的上調和PPAR-γ水平的下調及二者具有明顯負相關性，說明可能參與了DN的發病進程。

〔關鍵詞〕糖尿病腎病；轉化生長因子-β1；過氧化物酶體增殖物活化受體-γ

糖尿病腎病(DN)是糖尿病繼發微血管病變最為嚴重的并發癥，常導致患者生活質量明顯下降甚至死亡〔1〕。本研究探討DN患者血清中的轉化生長因子(TGF)-β1和過氧化物酶體增殖物活化受體(PPAR)-γ的蛋白含量及mRNA變化水平及機制。

1資料與方法

1.1一般資料隨機選取我院2015年2～10月入院且同意受試的DN患者50例作為DN組，其中男28例，平均年齡(54.3±2.6)歲，女22例，平均年齡(55.9±3.7)歲；同期我院接受健康體檢正常老年人50例作為對照組，其中男25例，平均年齡(57.9±3.5)歲，女25例，平均年齡(55.7±2.9)歲。DN患者均經WHO糖尿病及DN的診斷標準〔2〕篩選，排除臟器官良性或惡性腫瘤，無心肝肺功能不全，無合并其他系統感染，具有可比性(P>0.05)。

1.2實驗試劑及主要儀器抗人酶聯免疫試劑盒TGF-β1和PPAR-γ(碧云天生物有限公司)；Trizol、RT-PCR試劑盒(塔克拉生物有限公司)。Epoch酶標儀(美國)、Biometra PCR擴增儀(美國)。

1.3檢測血清中TGF-β1和PPAR-γ的蛋白含量及mRNA水平清晨空腹取靜脈血5 ml，離心1 000 r/min，分離血清液氮中凍存待測。一部分血清通過酶聯免疫法嚴格按照試劑盒操作檢測TGF-β1和PPAR-γ蛋白含量；另一部分用Trizol提取血清內總RNA，通過RT-PCR試劑盒實現引物擴增，采用凝膠成像圖像分析系統分析TGF-β1和PPAR-γ的mRNA水平。

1.4統計學方法采用SPSS16.0統計軟件進行t檢驗，Spearman等級相關分析。

2結果

2.1兩組血清中TGF-β1和PPAR-γ的蛋白和mRNA含量水平與對照組比較，DN組血清中TGF-β1的蛋白和mRNA含量水平明顯升高(P<0.01)、PPAR-γ的蛋白和mRNA含量水平明顯降低(P<0.01)。見表1。

2.2TGF-β1和PPAR-γ的相關性DN組血清中TGF-β1、PPAR-γ均具有負相關性(r=-0.689，P=0.042；r=-0.711，P=0.036)。

表1　各組血清TGF-β1和 PPAR-γ的蛋白含量及

與對照組比較：1)P<0.01

3討論

DN是糖尿病微血管重要并發癥之一，其發病率達20%～40%，主要病變累及部位是腎小球系膜、毛細血管基膜及細胞外基質，系膜的增生、基膜的增厚外加細胞外基質的大量積聚都將導致腎小球硬化，而糖尿病患者血液的高血糖、高凝、髙聚及高黏狀態都是DN的繼發因素〔3〕。研究證實，多種細胞因子與炎性因子參與細胞外基質成分的合成及代謝〔4〕。

TGF-β1水平升高能促進腎小球系膜細胞、腎小球毛細血管增生肥大，從而促進腎小管間質纖維化，增加細胞外基質在腎小球及腎小管間質內的異常堆積，導致腎臟受損及有效腎小球的減少〔4，5〕；PPAR-γ是一種核受體，它存在于人類染色體上，對脂肪細胞和胰島素有重要的作用，當PPAR-γ被激活時能通過降低DM血糖、血脂、改善胰島素抵抗，從而對腎臟組織起到保護作用〔6〕。TGF-β1和PPAR-γ在DN發生發展中扮演著尤為重要的角色，二者可能通過直接誘導腎小球系膜細胞凋亡及抑制其增殖參與了DN的發病進程，下調TGF-β1水平和上調PPAR-γ水平可能成為臨床治療DN的新靶點。

4參考文獻

1徐鵬杰,李航,徐亞蘭,等.2型糖尿病并發慢性腎臟病臨床病理特點分析〔J〕.中華腎臟病雜志,2010;26(10):731-5.

2葉任高,陸再英,謝毅,等.內科學〔M〕.北京:人民衛生出版社,2004：798-80.

3Lee WC,Chen HC,Wang CY,etal.Cilostazolameliorates nephropathy in type 1 diabetic rats involvingimprovement in oxidative stress and regulation of TGF-Beta and NF-kappaB〔J〕.Biosci Biotechnol Biochem,2010;74(7):1355-61．

4鄭亞萍,劉春杰.赤芍對早期糖尿病腎病大鼠腎臟AngⅡ、ET-1、PKC及TGF-β1的影響〔J〕.當代醫學,2012;18(23):20-3.

5劉圣,陳象青,唐麗琴,等.復方黃連膠囊對早期糖尿病腎病大鼠腎組織TGF-β1/BMP-7表達失衡及其Smad信號通路的調控作用〔J〕.中國中藥雜志,2015;40(5):938-45.

6田雪,于倩,張捷,等.糖尿病大鼠腎組織中PPAR-γ對TGF-β1、c-Ski調控作用的研究〔J〕.天津醫科大學學報,2013;19(1):31-5.

〔2014-11-25修回〕

(編輯苑云杰)

基金項目：浙江省中醫藥管理局(2013ZB106)

通訊作者：俞娉(1967-)，女，主任醫師，主要從事糖尿病研究。

〔中圖分類號〕R589

〔文獻標識碼〕A

〔文章編號〕1005-9202(2016)09-2110-02；

doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2016.09.026

第一作者：陳薔(1965-)，女，碩士，副主任醫師，主要從事糖尿病并發癥發病機制的研究。