核桃葉提取液對小鼠紅細胞滲透脆性的實驗研究

李　沖，許火龍，韋曉慧，鐘祖利，李華根，王彩冰

(右江民族醫學院1.2013級臨床醫學本科；2.生理學教研室,百色 533000)

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核桃葉提取液對小鼠紅細胞滲透脆性的實驗研究

李沖1，許火龍1，韋曉慧1，鐘祖利1，李華根1，王彩冰2▲

(右江民族醫學院1.2013級臨床醫學本科；2.生理學教研室,百色 533000)

【關鍵詞】核桃葉；小鼠；紅細胞滲透脆性

近年來研究發現，核桃葉具有抗菌消炎、抗腫瘤、抗衰老、增強記憶力和免疫力、抑制心肌收縮力、增強小腸平滑肌收縮力等作用[1～3]。但國內外尚未發現有核桃葉對血細胞影響的文獻報道，為了解核桃葉對紅細胞膜穩定性是否有影響，本課題組設計核桃葉對小鼠紅細胞(RBC)滲透脆性的實驗，旨在為核桃葉的開發和應用提供實驗依據。

1材料與方法

1.1實驗動物昆明種小鼠，雌雄各半，體重20～30 g，由右江民族醫學院實驗動物中心提供(許可證號：SYXZ桂2011-0010)。

1.2藥材、藥品核桃葉采于廣西百色市郊，曬干備用。0.9% NaCl注射液(貴州天地藥業有限責任公司，批號：H52020069)；肝素鈉注射液(上海第一生化藥業有限公司，批號：H31022051)。

1.3核桃葉提取液的制備干核桃葉100 g，加入4000 ml蒸餾水，室溫浸泡1 h，大火煮沸，文火煎至200 ml，紗布過濾除渣，水浴濃縮至100 ml(相當于生藥 1 g/ml)，冷卻后放入冰箱4℃保存，給小鼠灌胃時用生理鹽水分別配制成150 mg/ml、600 mg/ml的濃度。

1.4動物分組與給藥方法取小鼠30只，隨機均分為正常對照組(給予0.9% NaCl灌胃)、核桃葉低劑量和高劑量組(分別給予150、600 mg/ml核桃葉提取液灌胃)，共3組，雌雄各半，按小鼠的體重計算灌胃量(10 ml·kg-1)，1次/d，連續14 d。

1.5NaCl溶液的濃度設定不同濃度NaCl溶液均由0.9% NaCl注射液和蒸餾水按不同比例配置，濃度分別為0、0.25%～0.64%(梯度為0.03%)、0.9%，共16個濃度，其中以0和0.9% NaCl濃度作為紅細胞完全破裂和未破裂的參考標準。各濃度的NaCl溶液均取2 ml置入10 ml規格的試管中備用，16個濃度構成一組，供1只小鼠紅細胞滲透脆性的測定。

1.6紅細胞滲透脆性的測定小鼠末次給藥后1 h，眼球摘除采血放入肝素試管中，吸管吸血分別垂直懸滴入盛有不同濃度的NaCl溶液試管中1滴，靜置1 h時觀察紅細胞情況，分別記錄紅細胞開始破裂和紅細胞全部破裂的NaCl濃度；從高濃度依次觀察判斷，紅細胞開始破裂：管底有細胞沉淀，試管中上清液呈淺紅色(溶液不混濁)；紅細胞全部破裂：管底無細胞沉淀，整管溶液呈深紅色(無混濁)[4]。

2結果

正常對照組、核桃葉低劑量和核桃葉高劑量組的紅細胞開始破裂和完全破裂的NaCl濃度分別比較差異均無統計學意義(P>0.05)。見表1。

表1　核桃葉提取液對小鼠RBC滲透脆性的比較±s)

3討論

紅細胞滲透脆性是指紅細胞在低滲鹽溶液中會發生膨脹破裂的特性。血液中的紅細胞對低滲鹽溶液的抵抗力各不相同，紅細胞滲透脆性越大，紅細胞膜的穩定性就越差，發生溶血的概率就越高[5]。紅細胞在不同濃度的低滲鹽溶液中則表現出不同的現象，紅細胞開始破裂的NaCl濃度為紅細胞最大脆性值，代表該血液紅細胞的最小抵抗力；紅細胞完全破裂的NaCl濃度為最小脆性值，代表該血液紅細胞的最大抵抗力[4]。

本實驗結果顯示：三組紅細胞開始破裂和完全破裂的NaCl濃度分別比較差異均無統計學意義，說明核桃葉不影響紅細胞滲透脆性，即核桃葉不影響紅細胞膜的穩定性和壽命，不會誘發溶血。但老年人易發生炎癥感染、腫瘤繁殖、衰老、心腦疾病、消化不良等不良狀況，而核桃葉具有抗菌消炎、抗腫瘤、抗衰老、增強記憶力和免疫力、抑制心肌收縮力、增強小腸平滑肌收縮力等作用[1～3]，所以，核桃葉有望成為老年人的治療和保健食品；可老年人易發生老年性貧血[6]，因此老年人用藥時更需評估藥物有無溶血作用。本研究結果表明核桃葉不影響紅細胞膜的穩定性和壽命，這有利于核桃葉的應用推廣。

參考文獻

[1]許青松,陳新用,宋衛鋒,等,核桃葉水提取物對小鼠炎癥及免疫功能的影響[J].延邊大學醫學學報,2008,31(2):93-95.

[2]宋慶,劉亭秀,李靜，等.核桃葉提取液對離體灌流蛙心活動的實驗研究[J].中外醫學研究,2015,13(2):3-5.

[3]劉亭秀,宋慶,李靜，等.核桃葉提取液對家兔離體小腸平滑肌收縮活動的影響[J].右江民族醫學院學報,2015,37(1):11-13.

[4]梁興東,韋廷安,黎華連.一種改良的紅細胞滲透脆性試驗方法[J].國際檢驗醫學雜志,2012,33(10):1237-1238.

[5]白波,杜友愛.生理學[M].南京:江蘇科學技術出版社,2013:40.

[6]丁琪,蒲曉彥,宋麗潔，等.老年性貧血[J].武警醫學,2012,23(2):166-168.

(編輯：梁明佩)

(收稿日期：2016-01-18修回日期：2016-04-18)

中圖分類號：R931.71；R285.5

文獻標識碼：B

DOI:10.3969/j.issn.1003-1383.2016.02.032

作者簡介：李沖，男，本科在讀。E-mail:240398767@qq.com通信作者：王彩冰，女。E-mail：wangcb4444@163.com

基金項目：2015年廣西壯族自治區大學生創新創業訓練計劃項目(201510599089)