內皮細胞微顆粒水平在糖尿病合并癥病變中的臨床意義?

李會娟， 邵桂芳， 田 田， 李紅衛， 毛曉燕， 方 靜， 沈和榮(江蘇省昆山市第二人民醫院內分泌科， 江蘇 昆山 215300)

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內皮細胞微顆粒水平在糖尿病合并癥病變中的臨床意義?

李會娟， 邵桂芳， 田 田， 李紅衛， 毛曉燕， 方 靜， 沈和榮??
(江蘇省昆山市第二人民醫院內分泌科， 江蘇 昆山 215300)

摘 要:目的:探討內皮細胞微顆粒(EMPs)水平在糖尿病合并癥病變中的臨床意義。方法:選取2型糖尿病患者80例，根據合并癥的不同，分為單純糖尿病組26例，糖尿病大血管病變組32例和糖尿病微血管病變組22例。另外選取同期進行健康體檢者40例為對照組。流式細胞法檢測EMPs水平。結果:糖尿病各組體質量指數(BMI)、空腹血糖(FBG)和糖化血紅蛋白(HbA1C)均顯著高于對照組(P＜0.05)；糖尿病組EMPs水平顯著高于對照組(P＜0.05)，糖尿病各組間比較顯示糖尿病大血管病變組和糖尿病微血管病變組EMPs水平顯著高于單純糖尿病組(P＜0.05)；糖尿病患者EMPs水平與FBG、TC、TG呈正相關性，與其它指標無明顯相關性。結論:2型糖尿病患者，尤其合并有血管病變患者，內皮細胞微顆粒明顯增高，內皮細胞微顆粒水平反應血管內皮細胞的功能狀態，可作為判斷血管病變程度的指標。

關鍵詞:糖尿病； 血管病變； 內皮細胞微顆粒

??通訊作者

糖尿病是多種因素共同作用而引起的一組以糖代謝紊亂為主的慢性代謝性疾病，是繼腫瘤、心血管疾病之后第三大嚴重威脅人類健康的慢性疾病[1]。本文主要研究糖尿病患者血漿中EMPs水平的變化，旨在探討EMP水平在糖尿病血管并發癥中的意義。

1　資料與方法

1.1一般資料:選取2010年8月至2015年12月我院收治的2型糖尿病患者80例，符合1999年WHO糖尿病診斷標準。排除合并惡性腫瘤、心肌梗死或腦梗死、自身免疫病、血小板功能障礙者。根據合并癥的不同，將80例2型糖尿病患者分為單純糖尿病組26例，糖尿病大血管病變組32例(頸動脈彩超示有動脈粥樣斑塊形成)和糖尿病微血管病變組(存在視網膜病變和糖尿病腎臟病變)22例。另外選取同期于我院進行健康體檢者40例為對照組。單純糖尿病組男14，女12例；年齡39～72歲，平均(52.5±9.8)歲。糖尿病大血管病變組男18，女14例；年齡41～75歲，平均(53.2 ±11.5)歲。糖尿病微血管病變組男12，女10例；年齡38～73歲，平均(52.8±10.5)歲。對照組男22，女18例；年齡40～74歲，平均(51.5±10.9)歲。四組患者一般資料比較差異均無統計學意義(P＞0.05)，具有可比性。

1.2方 法

1.2.1樣本采集:空腹抽取研究對象肘靜脈血2mL，于EDTA-K2抗凝管中，離心(1000rpm×5min)，獲取含血小板豐富的血漿，離心(3000rpm×5min)獲取貧血小板血漿。

1.2.2血漿微顆粒的檢測[2]:將特異性熒光抗體(anti -CD31-PE，anti-CD42-FITC)和同等數量的同型對照抗體(美國Immunotech公司產品)加入到5uL貧血小板血漿中，室溫下孵育30min。隨后將500uLPBS和5uL F1ow-CountTM熒光微球加入，充分混勻，于FC-500流式細胞儀(美國貝克曼公司)上機檢測。以直徑為0.3 um和08um的標準微球設定細胞門，每支待檢樣本中加入大約10 um數量已知的絕對計數微球(美國Immunotech公司產品)。收集50000個顆粒后停止計數，絕對計數微球的濃度法計算EMPs濃度。

1.3統計學方法:采用SPSS16.0進行所有資料分析處理，計數資料采用x2檢驗，BMI、FBG和HbA1C和EMPs水平采用均數±標準差表示并行單因素方差分析及LSD-t檢驗，相關分析用直線相關分析。以P＜0. 05為差異有統計學意義。

2　結 果

2.1一般資料比較:糖尿病各組BMI、FBG和HbA1C均高于對照組(P＜0.05)，見表1。

表1　糖尿病各組和對照組一般資料比較

2.2糖尿病組和對照組EMPs水平比較:糖尿病組EMPs水平高于對照組(P＜0.05)，糖尿病各組間比較顯示糖尿病大血管病變組和糖尿病微血管病變組EMPs水平高于單純糖尿病組(P＜0.05)，見表2。

表2　糖尿病組和對照組EMPs水平比較

2.3糖尿病患者EMPs水平與一般臨床資料相關性分析:糖尿病患者EMPs水平與FBG、TC、TG呈正相關性，與其它指標無明顯相關性，見表3。

表3　EMPs水平與糖尿病患者一般臨床資料相關性分析

3討 論

既往研究表明糖尿病是加速動脈粥樣硬化的重要危險因素，其發生冠脈疾病的概率是非糖尿病患者的2～3倍[3]。血管內皮功能紊亂是動脈粥樣硬化進展和斑塊不穩定的始動因素，是導致血管性疾病發生發展的主要原因[4]。建立血管內皮功能紊亂的定量檢測方法對于判斷糖尿病患者血管病變具有重要意義。

本文采用流式細胞術檢測2型糖尿病患者血漿EMP水平，結果顯示，糖尿病組EMPs水平顯著高于對照組(P＜0.05)，糖尿病各組間比較顯示糖尿病大血管病變組和糖尿病微血管病變組EMPs水平顯著高于單純糖尿病組(P＜0.05)，提示2型糖尿病患者，尤其合并有血管病變患者，EMPs明顯增高。血管內皮細胞是血管壁和血液之間的單層細胞，具有抑制血管平滑肌細胞增殖和防止動脈血栓形成的作用。正常情況下，血管內皮細胞不表達炎性因子，但是在病理狀態下會合成和釋放多種損傷物質導致內皮功能障礙。內皮細胞在受到損傷、缺氧或炎癥刺激是釋放EMPs，其主要由磷脂、蛋白質和膜內容物(核物質與部分細胞質)組成[5]。

EMPs具有促凝、促炎癥和改變血管功能的作用。糖尿病患者持續的高血糖狀態導致內皮功能的損害，EMPs水平升高。EMPs表面黏附分子加速了血小板的聚集，同時可以穩固已形成的血栓，還可通過穩固EMPs與血小板的連接，導致血栓的形成。EMPs的促炎癥性質主要表現在其增加NADPH氧化酶的活性，促進內皮炎癥反應和損傷血管。持續血糖升高狀態下，EMPs可降低NF-kB的活性及NO的利用率，而NO對血管內皮功能具有損傷作用，最終導致糖尿病患者血管并發癥的發生。此外，慢性高血糖激活血管緊張素Ⅱ，其可刺激EMPs的水平升高，通過刺激活性氧簇，導致糖尿病動脈血管硬化。本組數據顯示，糖尿病患者EMPs水平與FBG、TC、TG呈正相關性，與其它指標無明顯相關性，提示EMPs水平與FBG、TC、TG具有相關性。李旺俊發現阿爾茨海默病患者EMPs水平與與空腹血糖、膽固醇、甘油三酯呈正相關，與本文結果一致。

參考文獻:

[1] 魏聰，申鍔，胡兵.糖尿病大血管病變的研究進展[J].上海交通大學學報(醫學版)，2010，30(10)：1292～1296.

[2] 李旺俊.內皮細胞微顆粒和阿爾茨海默病的相關性研究[D].蘇州大學，2010，4.

[3] Potenza MA，Gag1iardi S，Nacci C，et a1. Endothe1ia1 dysfunction in diabetes：from mechanisms to therapeutic targets [J].Curr Med Chem，2009，16(6)：94～112.

[4] 夏金盈，李瑩.內皮微顆粒與糖尿病患者內皮功能障礙關系的研究進展[J].中國糖尿病雜志，2012，20(10)：792～793.

[5] 田剛，任燕，盧群，等.高糖誘導人臍靜脈內皮細胞內皮細胞微粒釋放并促進細胞凋亡[J].西安交通大學學報：醫學版，2010，31(2)：5.

Clinical Significance of Endothelial Microparticles in Diabetic Complications Development

LI Huijuan， SHAO Guifang， TIAN Tian， et al
(The Second People's Hospital of Kunshan，Jiangsu Kunshan 215300，China)

Abstract:Objective:To investigate the c1inica1 significance of endothe1ia1 micropartic1es (EMPs) in diabetic comp1ications deve1opment. Method: 80 cases of patients with type 2 diabetes in our hospita1 were divided into simp1e diabetes group (n＝26 cases)，diabetic vascu1ar comp1ication group (n＝32 cases) and diabetic microangiopathy group (n＝22 cases). Another 40 hea1thy peop1e undergoing hea1th examination were used as the contro1 group. F1ow cytometry method was used to determine the 1eve1 of EMPs. Result: The BMI，FBG and HbA1C 1eve1 of patients with type 2 diabetes were significant1y higher than those in the contro1 group (P＜0.05) and the same to EMPs (P＜0.05). The EMPs 1eve1 of patients in diabetic vascu1ar comp1ication group and diabetic microangiopathy group were significant1y higher than those in the simp1e diabetes group (P＜0.05). The EMPs 1eve1 was positive1y corre1ated with FBG，TC and TG. Conclusion: The EMPs 1eve1 of patients with type 2 diabetes is higher，especia11y for the patients with vascu1opathy. The EMPs 1eve1 can ref1ect the 1eve1 of the function of endothe1ia1 ce11s and be used as an index to eva1uate the 1esion extent.

Key words:Diabetes； Vascu1opathy； Endothe1ia1 micropartic1es

文獻標識碼:B

doi:10.3969/ j.issn.1006-6233.2016.02.034

文章編號:1006-6233(2016)02-0270-03

基金項目：?江蘇省昆山市社會發展科技項目，(編號：KS1330)