核桃葉提取液對小鼠心率、心電的影響

宋慶 范文鳳 劉桂彪 許火龍 楊媛 黃勇勝 王彩冰

核桃葉提取液對小鼠心率、心電的影響

宋慶 范文鳳 劉桂彪 許火龍 楊媛 黃勇勝 王彩冰

目的 探討核桃葉提取液對小鼠心率和心電的影響。方法 選取小鼠40只，隨機分為正常對照組(給予0.85%NaCl注射液)、普萘洛爾組(給予0.4mg/mL普萘洛爾)、核桃葉低濃度組和高濃度組(分別給予0.2g/mL、0.4g/mL核桃葉提取液)給予相應藥物灌胃，各10只，每天灌胃1次，14d后用心電圖機檢測各組小鼠的心率和P波、QRS波、PQ間期。結果 核桃葉低濃度組P波時限與正常對照組和普萘洛爾組比較差異無統計學意義，而高濃度組P波時限明顯長于正常對照組和普萘洛爾組(P＜0.05)；核桃葉低濃度組和高濃度組P波振幅明顯低于正常對照組(P＜0.01)，而明顯高于普萘洛爾組(P＜0.05)。核桃葉低濃度組和高濃度組QRS波時限與正常對照組比較差異無統計學意義，核桃葉低濃度組QRS波振幅明顯低于正常對照組和普萘洛爾組(P＜0.05)，核桃葉高濃度組QRS波振幅與正常對照組、普萘洛爾組和核桃葉低濃度組比較差異無統計學意義；核桃葉低濃度組和高濃度組、正常對照組、普萘洛爾組的PQ間期各組間比較差異無統計學意義。普萘洛爾組的心率明顯低于正常對照組(P＜0.01)，核桃葉低濃度組和高濃度組的心率與正常對照組比較差異無統計學意義，核桃葉低濃度組的心率與普萘洛爾組比較差異無統計學意義，但核桃葉提取液高濃度組的心率明顯高于普萘洛爾組(P＜0.05)。核桃葉高濃度組的P波間期和振幅、QRS波時限和振幅、PQ間期、心率與核桃葉低濃度組比較差異無統計學意義。結論 核桃葉提取液能延長P波時限、降低P波和QRS波振幅，對心率無明顯影響作用。

核桃葉提取液；心率；心電；小鼠

核桃是胡桃科核桃屬(Juglans L.)植物，核桃仁具有補腎壯陽、健腦益智、養顏美容、溫肺潤腸、抗氧化、預防心血管疾病，核桃葉具有增強記憶力和免疫力、降低心肌收縮力的作用、增強小腸平滑肌收縮力、抑制腫瘤細胞生長、抗氧化、抗衰老、抗炎、生理性止血、不影響紅細胞滲透脆性等作用，山核桃葉總黃酮還有保護心肌細胞和降低臍靜脈內皮細胞表面黏附因子的黏附作用[1-12]。目前尚未發現有核桃葉對心電圖影響的文獻報道，本實驗采用核桃葉提取液給小鼠灌胃，并與臨床用于治療心律失常藥物普萘洛爾劑量換算成小鼠用量給小鼠灌胃后作比較分析[13-14]，觀察核桃葉提取液對小鼠心電圖的影響，為進一步開發利用核桃葉提供實驗資料，現報道如下。

1 材料與方法

1.1 實驗動物 健康KM小鼠40只，體質量20～30g，雌雄不限，由廣西右江民族醫學院實驗動物中心提供。

1.2 藥材、藥品和儀器 核桃葉(采自廣西百色市郊)曬干備用。0.85%NaCl注射液(貴州天地藥業有限責任公司，批號：H52020069)，普萘洛爾(山西云鵬制藥有限公司，批號：B140703)，氨基甲酸乙酯(成都市科龍化工試劑廠，批號：20121101)，心電圖機(廣州市艾迪科遜醫療器械有限公司，型號：ECG-6511)。

1.3 核桃葉提取液的制備 將400g核桃葉加入4000mL的水中浸泡1h，文火煮沸2h，16層紗布過濾后再用濾紙過濾，濾液用文火隔水濃縮至400mL(相當于生藥1g/mL)，冷卻后放入4℃冰箱保存，給小鼠灌胃時用蒸餾水分別配制成0.2g/mL、0.4g/mL的核桃葉提取液。

1.4 動物分組與給藥方法 將40只小鼠隨機均分為4組，正常對照組(給予0.85%NaCl注射液)、普萘洛爾組(給予0.40mg/mL普萘洛爾)、核桃葉低濃度組和高濃度組(組分別給予核桃葉提取液0.2g/mL、0.4g/mL)給予相應藥物灌胃，灌胃量按小鼠體質量計算(10mL/kg)，每天灌胃1次，共14d。

1.5 小鼠心電圖測量方法

1.5.1 小鼠心電圖測定條件 小鼠禁食12h、禁水2h，末次灌胃10min用20%的氨基甲酸乙酯(10mL/kg)腹腔注射麻醉，通過心電圖機測量小鼠肢體Ⅱ導聯的心電圖，定標電壓2mV、紙速50mm/s。

1.5.2 心率測量 取心電圖基線較穩定的連續5個R波，測量并計算R-R間期均值，計算心率(次/分)=60/R-R間期/2。

1.5.3 P波時限和振幅的測量 取心電基線較穩定的連續5個P波，測量并計算P波時限和振幅的均值。

1.5.4 QRS波時限和振幅的測量 取心電基線較穩定的連續5個QRS波，測量并計算QRS波時限和振幅的均值。

1.5.5 PQ間期的測量 取心電基線較穩定的連續5個PQ間期，測量并計算PQ間期的均值。PQ間期為P波起點至QRS波起始的時限。

1.6 統計學方法 利用SPSS16.0統計軟件進行統計分析，計量資料采用“x±s”表示，組間比較采用t檢驗；以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

小鼠心率及心電P波、QRS波、PQ間期的測定結果 普萘洛爾組的心率明顯低于正常對照組(P＜0.01)，核桃葉低濃度組和高濃度組的心率與正常對照組比較差異無統計學意義，核桃葉低濃度組的心率與普萘洛爾組比較差異無統計學意義，但核桃葉高濃度組的心率明顯高于普萘洛爾組(P＜0.05)。核桃葉低濃度組的心率與核桃葉高濃度組比較差異無統計學意義。P波：核桃葉低濃度組P波時限與正常對照組和普萘洛爾組比較差異無統計學意義，而高濃度組P波時限明顯長于正常對照組和普萘洛爾組(P＜0.05)；核桃葉低濃度組和高濃度組P波振幅明顯低于正常對照組(P＜0.01)，而明顯高于普萘洛爾組(P＜0.05)；核桃葉高濃度組的P波時限和振幅與核桃葉低濃度組比較差異無統計學意義，普萘洛爾組的P波振幅明顯低于正常對照組(P＜0.01)。QRS波：核桃葉低濃度組和高濃度組QRS波時限與正常對照組比較差異無統計學意義，核桃葉低濃度組QRS波振幅明顯低于正常對照組和普萘洛爾組(P＜0.05)，核桃葉高濃度組QRS波振幅與正常對照組、普萘洛爾組和核桃葉低濃度組比較差異無統計學意義；核桃葉低濃度組和高濃度組、正常對照組、普萘洛爾組的PQ間期各組間比較差異無統計學意義。PQ間期：各組間的PQ間期兩兩比較差異無統計學意義。見表1。

表1 核桃葉提取液對小鼠心電圖影響的比較（s，n=10）

表1 核桃葉提取液對小鼠心電圖影響的比較（s，n=10）

注：與正常對照組比較，aP＜0.05，bP＜0.01；與普萘洛爾組比較，cP＜0.05，dP＜0.01

組別心率（次/分）P波QRS波PQ間期時限（s）振幅（mV）時限（s）振幅（mV）正常對照組617.93±27.380.028±0.0010.286±0.0190.043±0.0041.003±0.0660.033±0.001普萘洛爾組440.00±29.21b0.026±0.0010.137±0.012b0.047±0.0031.005±0.0860.034±0.002核桃葉低濃度組535.40±38.140.030±0.0030.200±0.026bc0.038±0.002c0.750±0.076ac0.039±0.003核桃葉高濃度組576.58±39.37c0.035±0.003ad0.198±0.020bc0.045±0.0020.874±0.0490.083±0.042

3 討論

心臟是推動血液循環的重要動力器官，心電的變化會直接影響心臟的功能活動，P波是兩心房的去極化波，QRS波是兩個心室的去極化波；去極化的高低會影響收縮力的強弱[15]。本實驗通過心電圖的檢測，了解核桃葉提取液對心臟的影響，并與生理鹽水和臨床用于降低心臟活動的普萘洛爾藥物進行比較分析。

本實驗結果顯示：普萘洛爾組的心率明顯低于正常對照組(P＜0.05)，普萘洛爾組的P波振幅明顯低于正常對照組(P＜0.05)，說明用于實驗的小鼠對藥物有正常的反應；核桃葉高濃度組的P波時限明顯長于正常對照組(P＜0.05)，核桃葉低濃度組和高濃度組的P波振幅明顯低于正常對照組(P＜0.05)，核桃葉低濃度組的QRS波振幅明顯低于正常對照組(P＜0.05)，提示核桃葉能降低心房和心室的收縮力；核桃葉高濃度組的P波時限明顯長于正常對照組(P＜0.05)，提示核桃葉能延長心房去極化時間。核桃葉低濃度組和高濃度組的QRS波時限、PQ間期與正常對照組比較差異無統計學意義，提示核桃葉不縮短心室去極化時間；核桃葉提取液低濃度組和高濃度組的心率與正常對照組比較差異無統計學意義，提示核桃葉提取液不影響心率活動。本研究表明，核桃葉提取液可降低心臟的收縮力而不影響心率，這一現象與本課題組之前研究的離體心臟活動結果一致[5]。

綜上所述，核桃葉不影響心率，核桃葉通過延長P波時限、降低P波和QRS波振幅的作用，從而引起心收縮力減弱。核桃葉不影響心率而能降低心收縮力，這對中老齡人冠心病引起的心絞痛可能有緩解作用，而核桃葉是否有望成為中老齡人的保健品和治療藥物，這還有待今后的開發研究。

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Objective The paper explores the impact of walnut leaves extract upon the heart rate and electrocardiograph (ECG) of rats. Methods Take 40 rats; divide them at random into normal control group (provided with 0.85%NaCl of injections), propranolol group (provided with 0.4mg/mL of propranolol), low concentration group and high concentration group of walnut leaves (provided with 0.2g/mL and 0.4g/mL of walnut leaves extract) with intragastric infusion with corresponding amounts of drugs; conduct intragastric infusion once every day. Use the ECG machine after 14 days to test the heart rate, P wave, QRS wave and PQ intervals of different groups of rats. Results The difference is not signifcant about the P wave duration of the low concentration group of walnut leaves, normal control group and propranolol group, while the P wave duration of the high concentration group of walnut leaves is longer than the normal control group and propranolol group’s (P＜0.05); the P-wave amplitude of the low concentration group and high concentration group of walnut leaves is lower obviously than the normal control group’s (P＜0.01) and higher obviously than the propranolol group’s (P＜0.05). The difference is not signifcant about QRS duration of the low concentration group and high concentration group of walnut leaves, compared with the normal control group’s. The QRS amplitude of low concentration group of walnut leaves is lower obviously than the normal control group and propranolol group’s (P＜0.05). The difference is not signifcant about the QRS amplitude of high concentration group of walnut leaves, the normal control group and propranolol group; the difference is not signifcant about the PQ intervals of the propranolol group, the low concentration group and high concentration group of walnut leaves. The heart rate of propranolol group is lower obviously than the normal control group’s (P＜0.01). The difference is not signifcant about the heart rate of the normal group, low concentration group and high concentration group of walnut leaves. The difference is not signifcant about the heart rate of low concentration group of walnut leaves and the propranolol group. But the heart rate of low concentration group of walnut leaves extract is higher obviously than the propranolol group’s (P＜0.05). The difference is not signifcant about the P-wave interval and amplitude, the QRS duration and amplitude and the PQ interval and heart rate of high concentration group and low concentration group of walnut leaves. Conclusion The walnut leaves extract can extend the P-wave duration, reduce the amplitude of P wave and QRS wave and has little impact on the heart rate.

Walnut leaves extract; Heart rate; Electrocardiograph; Rats

10.3969/j.issn.1009-4393.2016.18.002

2014年廣西壯族自治區級大學生創新創業訓練計劃項目（201410599004） 2014年右江民族醫學院大學生創新研究團隊校級科研課題（10）

廣西 533000 右江民族醫學院2012級臨床醫學本科 （宋慶 劉桂彪 楊媛 黃勇勝） 右江民族醫學院2013級臨床醫學本科全科班 （范文鳳）右江民族醫學院2013級臨床醫學本科（許火龍） 右江民族醫學院生理學教研室（王彩冰）

王彩冰 E-mail：wangcb4444@163.com