292株血培養陽性病原菌分布及耐藥性分析

馬小華 石國民 喻 容 石 燕 向延根

292株血培養陽性病原菌分布及耐藥性分析

馬小華 石國民 喻 容 石 燕 向延根

目的 分析血培養陽性病原菌分布及耐藥性特點，為指導臨床制定治療方案提供依據。方法 收集血培養采用BACTEC 9120全自動血培養儀進行培養，陽性者用MicroScan walkAway 96 SI進行細菌鑒定及藥敏。結果 所有血培養共檢出38種292株病原菌，革蘭氏陰性菌占141株（48.0%），革蘭氏陽性菌占142株(49.0%)，真菌9株（3.0%）。革蘭氏陰性菌中排行前兩位的是大腸埃希菌(44.7%)、肺炎克雷伯菌(22.0%)。大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌中產超廣譜β內酰胺酶檢出率分別為54.0%和25.8%，對氨芐西林和哌拉西林的耐藥性分別為92.1%、96.8%和87.3%、71.0%。革蘭氏陽性菌中耐甲氧西林凝固酶陰性葡萄球菌(MRCNS)和耐甲氧西林金葡萄球菌(MRSA)分別占48.6%和19.7%，兩種細菌對青霉素耐藥率達92.0%以上，尚未發現對利奈唑胺、萬古霉素和替考拉寧耐藥現象。結論 本次分離的細菌對藥物均有不同程度的耐藥，臨床醫師要根據不同細菌合理選擇抗菌藥物。

血培養；病原菌；抗菌藥物

Blood culture; Pathogens; Antimicrobial susceptibility

血流感染（BSIs）是疾病的發生率和病死率的主要原因之一。據粗略估算美國每年大約有250 000患者發生血流感染，血流感染致死率在美國排第10位[1]。近年來，隨著各種侵入性診療操作的出現[2]，抗菌藥物及激素類藥物的廣泛運用，血流感染及細菌耐藥性亦隨之增加[3-4]。及時了解血流感染患者病原微生物分布及耐藥情況，為臨床提供合理的、有針對性的抗菌藥物具有重要的指導意義。本研究就2014年10月～2015年10月全院血培養陽性樣本進行了統計分析，以期了解本院病原菌種類分布及耐藥狀況。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集2014年10月～2015年10月就診于本院急診及住院懷疑血流感染的患者，剔除同一患者相同部位的相同菌株。

1.2 儀器與試劑 BACTEC 9120全自動血培養儀及配套血培養購于美國BD公司，MicroScan walkAway 96 SI自動鑒定系統及配套試劑和藥敏購于德國西門子公司。培養箱購于上海力申公司；生物安全柜購于上海瑞仰公司；抗菌藥敏紙片有英國OXOID公司提供。血瓊脂培養基、巧克力瓊脂培養基、顯色板購于凱林公司；MH藥敏培養基購于博賽生物技術有限公司。

1.3 質控菌株 大腸埃希菌（ATCC 25922）、肺炎克雷伯菌（ATCC 700603）、銅綠假單胞菌（ATCC 27853）、金黃色葡萄球菌（ATCC 25923）、糞腸球菌（ATCC 29212）均由衛生部臨床檢驗中心提供。

1.4 方法

1.4.1 標本采集 患者寒戰發生時，抗生素治療前或者停藥后下次抗生素使用前采集血液注入血培養瓶中（兒童1～3 mL，成人8～10 mL），及時送檢，將血培養瓶放入BACTEC 9120全自動血培養儀中培養5 d，若儀器陽性報警時，及時轉種血瓊脂平板，若培養到期陰性報警，則取出轉血瓊脂平板，次日不長均則報陰性。

1.4.2 菌種鑒定與藥敏實驗 將培養陽性的菌株采用MicroScan walkAway 96 SI鑒定系統進行菌株及藥敏鑒定，同時采用KB瓊脂擴散法進行藥敏比較。實驗結果參照臨床實驗室標準化協會（CLSI）2014年標準判讀。

1.5 統計學方法 所有數據采用WHONET 5.4軟件進行統計分析。

2 結果

2.1 血培養主要菌株分布 臨床分離得到的38種292株細菌，其中革蘭氏陰性菌141株，占48.0%，革蘭氏陽性菌142株，占49.0%，真菌9株，占3.0%。革蘭陰性菌株中，排行前兩位的分別為大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌，分別占革蘭氏陰性菌的44.7%和22.0%；革蘭陽性菌中，MRCNS和MRSA分別占陽性菌的48.6%和19.7%。本次分離出的腸球菌屬占8.5%。見表1。

2.2 血培養陽性病原菌所在科室分布 本院血培養陽性患者所在科室主要集中在結核科、腎內科、小兒科、新生兒科和消化科，分別占10.6%、9.9%、8.9%、6.9%和5.1%。見表2。

表1 血培養陽性主要病原菌分布

表2 血培養陽性菌科室分布

2.3 血培養藥敏實驗結果

2.3.1 常見格蘭陰性桿菌對抗生素耐藥情況及產超廣譜β內酰胺酶（ESBLs）檢出 肺炎克雷伯菌和大腸埃希菌對氨芐西林的耐藥率達到92.0%以上，對哌拉西林的耐藥率也達到71.0%以上，對亞胺培南的敏感性均在93.0%以上，對含酶的抑制劑如哌拉西林/他唑巴坦和頭孢哌酮/舒巴坦有很好的抑菌效果，敏感性均在87.0%以上。見表3 A。產ESBLs的大腸埃希菌34株，陽性率為54%。產ESBLs肺炎克雷伯菌8株，陽性率為25.8%。見表3 B。

表3 A血培養陰性桿菌對抗菌藥物耐藥[n(%)]

表3 B大腸埃希菌及肺炎克雷伯菌ESBLs檢出

2.3.2 常見格蘭陽性菌對抗生素耐藥情況 血培養主要革蘭陽性球菌藥敏結果見表4，由表上可見，凝固酶陰性葡萄球菌中,耐甲氧西林占82.6%，對氨芐西林/舒巴坦、紅霉素和青霉素耐藥率為81.0%、82.7%和92.8%。金黃色葡萄球菌中耐甲氧西林葡萄球菌為32.1%，對青霉素耐藥率為96.4%。兩者對利奈唑胺、萬古霉素和替考拉寧耐藥率均為0%。見表4。

表4 血培養陽性球菌對抗菌藥物耐藥情況[n(%)]

3 討論

血流感染是患者住院期間發病和死亡的重要因素[5-7]，血培養陽性有助于血流感染的診斷，但是并非所有的血培養陽性均可診斷血流感染，必須結合臨床癥狀加以考慮。至今為止，有關血流感染報道的相關文獻很多，這也反映了各個醫院對血培養陽性的重視及謹慎。本院作為重組后的一家大型的三甲醫院，其科室構成與其他醫院可能不盡相同，有必要對全院各個科室血培養陽性樣本做一次調查。本研究中，回顧了2014年10月～2015年10月這1年中所有血培養陽性細菌的分布及耐藥性分析，為了解本院目前細菌分布及耐藥監測提供基數資料。

本組資料顯示，本次血培養陽性分離得到38種292株細菌，革蘭陰性菌分離率48.0%，革蘭陽性菌49.0%，兩者趨近平衡，與某些文獻報道不盡相同[8-10]。王佩芳等人報道2007～2009年血培養陽性菌占39.02%，而格蘭陰性菌占60.98%[11]，而謝強等人報道2013年血培養中格蘭陽性菌占63.33%，格蘭陰性菌占35.00%，說明近年來格蘭陽性菌感染率在各大醫院均有上升趨勢，某些地方甚至超過了格蘭陰性菌[12]。此外，培養陽性菌對應科室主要分布在結核科、腎內科、小兒科，這與這些科室相對患者量較多，標本送檢量大有關。

本次檢測出的產ESBLs的大腸埃希菌陽性率為54%，產ESBLs肺炎克雷伯菌陽性率為25.8%，而陳明慧等人分離出的大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌ESBLs檢出率分別55.0%和37.3%[9]，說明產ESBLs細菌耐藥形式嚴峻。一般而言，實驗室中只要檢測出產ESBLs細菌，則無論體內外藥物敏感試驗如何，均可認為對1、2、3代頭孢、青霉素類和單環菌素耐藥。本次分離的大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌對青霉素類耐藥率較高，而對碳青酶烯類藥物、阿米卡星等抗菌效果較好，可用于治療產ESBLs細菌的首選藥物。此外，本次分離的鮑曼不動桿菌對所統計的藥物與大腸埃希菌耐藥率相當（未列出），然而本次分離的鮑曼不動桿菌只有9株，需要更多株數進行分析。本次分離出的MRCNS和MRSA占葡萄球菌的48.6%和19.7%。一般而言，分離出耐甲氧西林的葡萄球菌，其對多種藥物如頭孢西丁、亞胺培南和頭孢孟多等耐藥。此外，本次分離出的MRCNS和MRSA均未發現對利奈唑胺、萬古霉素和替考拉寧耐藥，可以考慮作為首選藥。

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10.3969/j.issn.1009-4393.2016.15.003

湖南 410004 長沙市中心醫院檢驗科（馬小華 石國民 喻容 石燕 向延根）

注： R：耐藥；I：中介；S：敏感

[Abtract] Objective To investigate the distribution and drug-resistance characteristics of pathogens in blood culture isolates in order to provide the basis for guiding clinical treatment plan. Methods Pathogens collected were cultured with BACTEC 9120 automated blood culture system and bacterial confirmation and antibacterial susceptibility tests were conducted with MicroScan walkAway 96 SI. Results A total of 292 strains were isolated from blood specimens. Gram negative bacilli, gram positive cocci and fungi accounted for 48%, 49%, and 3%, respectively. The most common gram negative bacilli were Escherichia coli (44.7%), Klebsiella pneumoniae (22.0%), ESBLs producing strains of Escherichia coli and Klebsiella peumoniae was 54.0% and 25.8%, respectively. The detected rates of Escherichia coli and Klebsiella pneumoniae strains resistant to Ampicillin and Piperacillin were 92.1%, 96.8% and 87.3%, 71.0%, respectively. The most frequent isolates of gram positive cocci were methicillinresistant coagulase-negative Staphylococcus (MRCNS) (48.6%) and methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) (19.7%). The both isolates showed high resistant rates to Penicillin (over 92.0%). No strains were found resistant to linezolid, vancomycin, or teicoplanin. Conclusion Different bacterial isolates shows different levels of drug resistance in these data, clinicians should choose right antimicrobial gents according antimicrobial susceptibility of different bacterium.