中性粒細胞CD64和血清sTREM-1在老年社區獲得性肺炎中的診斷價值探討

農賢剛　程衛萍

(貴港市中西醫結合骨科醫院，貴港537100)

中性粒細胞CD64和血清sTREM-1在老年社區獲得性肺炎中的診斷價值探討

農賢剛程衛萍

(貴港市中西醫結合骨科醫院，貴港537100)

[摘要]目的：探討中性粒細胞CD64和sTREM-1在老年社區獲得性肺炎(CAP)診斷中的臨床價值。 方法：將76例老年CAP住院患者按病情嚴重程度分為重癥肺炎組23例(存活15例，死亡8例)，普通肺炎組53例；同期進行健康體檢老年人45例為對照組。采用流式細胞術檢測外周血中性粒細胞CD64的表達，采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附法檢測sTREM-1的水平，并應用受試者工作特征曲線(Receiver operating characteristic curve，ROC)分析二者對老年CAP的診斷價值。 結果：重癥肺炎組、普通肺炎組、對照組CD64中位數水平分別為37.49、18.82、10.63MFI，三組間比較差異有統計學意義(P<0.05)；重癥肺炎組sTREM-1中位數為75.39 pg/ml，高于普通肺炎組和對照組(分別為65.31、43.96 pg/ml)，三組間比較差異均有統計學意義(P<0.05)；重癥肺炎存活組CD64、sTREM-1隨著病情好轉逐漸降低至正常水平，而死亡組 CD64、sTREM-1隨著病情的加重持續升高，且在死亡時達到最高值；二者診斷老年CAP的ROC曲線下面積分別為0.876、0.843，聯合二者診斷CAP的ROC曲線下面積為0.917。 結論：CD64、sTREM-1可作為老年CAP有價值的診斷指標，動態監測兩項指標的水平變化趨勢能夠反映CAP的病情以及預后。

[關鍵詞]中性粒細胞CD64；可溶性髓系細胞觸發受體-1；老年；社區獲得性肺炎

社區獲得性肺炎(Community acquired pneumonia，CAP)是一種嚴重威脅人類健康的常見感染性疾病。近年來，隨著社會人口老齡化態勢的日益嚴峻， 老年CAP尤其是重癥CAP的發病率不斷上升。老年人因基礎疾病的積累，免疫力水平差，病死率較高，目前重癥CAP死亡率高達30%～70%[1]。早期診斷和準確評估患者病情嚴重程度、變化趨勢，將有益于治療方案的制定和判斷患者預后。近年有文獻報道，應用流式細胞儀檢測CD64的表達水平可作為早期診斷細菌感染的特異性指標[2]，可溶性髓系細胞觸發受體-1(soluble triggering receptor expressed on myeloid cells-1，sTREM-1)對CAP診斷及病情嚴重程度評估有重要價值[3]。本研究通過對老年CAP患者疾病發展過程中中性粒細胞CD64和sTREM-1表達水平變化的動態觀察，探討CD64和sTREM-1在老年CAP診斷和療效觀察、預后判斷等方面的臨床價值。

1材料與方法

1.1資料選取2013年1月至2015年5月本院呼吸內科收治的老年CAP患者76例作為觀察組，其中男46例，女30例；年齡61～82歲，平均(71.4±5.7)歲；根據病情嚴重程度分為重癥肺炎組23例(存活15例，死亡8例)，普通肺炎組53例，所有患者均符合中華醫學會呼吸病學分會2006年制定的《社區獲得性肺炎診斷和治療指南》的CAP診斷標準[4]，且排除合并其他部位感染及肺部疾病者、惡性腫瘤、活動性肺結核、器官移植和AIDS者、終末期肝或腎功能衰竭者。另選取同期在本院進行健康體檢老年人45例為對照組，男28例，女17例；年齡60～79歲，平均(70.6±5.1)歲。觀察組與對照組在性別、年齡構成等方面均無統計學差異(P>0.05)，具有可比性。

1.2方法

1.2.1標本采集所有觀察組患者在發病或者入院后的第1、4、7天抽取靜脈血5 ml，其中2 ml EDTA-K2抗凝靜脈血用于中性粒細胞CD64測定；3 ml靜脈血置于促凝生化管，離心后取血清保存于-20℃冰箱，用于血清sTREM-1水平測定。對照組空腹采集血標本，處理同上。

1.2.2測定方法CD64檢測 50 μl全血加CD64-FITC抗體20 μl(美國BD公司生產)混勻，以IgG-FITC為同型對照，室溫避光放置30 min后加流式細胞分析(FACS)溶血劑2 ml，暗處再放置15 min，用美國BD FACS Calibur流式細胞儀進行檢測，根據FSC/SSC點圖顯示的形態學特征選定中性粒細胞群，每個樣本計數10 000個細胞，測定CD64的平均熒光強度(MFI)； 血清sTREM-1測定采用雙抗體夾心ELISA法，sTREM-1檢測試劑盒由上海滬峰生物科技有限公司提供。所有檢測操作均嚴格按照試劑盒說明書進行。

2結果

2.1對照組與觀察組CD64、sTREM-1水平的變化普通肺炎組、重癥肺炎組中性粒細胞CD64、sTREM-1水平均明顯高于對照組，且重癥肺炎組明顯高于普通肺炎組，差異均有統計學意義(P<0.05)。重癥肺炎組、普通肺炎組、對照組中性粒細胞CD64中位數分別為37.49、18.82、10.63 MFI；sTREM-1中位數分別為75.39、65.31、43.96 pg/ml。見表1。

2.2不同組別CD64檢測結果流式細胞儀分析圖譜見圖1。

2.3重癥肺炎死亡組與存活組CD64、sTREM-1動態變化水平比較存活組患者隨著病情的好轉，患者CD64、sTREM-1水平呈下降趨勢，轉出院時降低至正常水平；死亡組患者CD64、sTREM-1水平不斷升高，且在死亡時達到最大值。見表2。

2.4CD64、sTREM-1診斷CAP敏感性和特異性比較以本組資料通過SPSS17.0軟件繪制ROC曲線分析發現，CD64曲線下面積(AUC)為0.876，sTREM-1的AUC為0.843，聯合2項指標診斷CAP的AUC為0.917。以曲線中最靠近左上角的一點為最佳截斷值，計算得出陽性標準以16.34 MFI為最佳截斷值時，CD64診斷老年CAP的敏感性為80.3%，特異性為91.1%、；以57.76 pg/ml為界時，sTREM-1診斷老年CAP的敏感性為82.9%，特異性為84.4%；兩項聯合對老年CAP診斷的敏感性和特異性分別為90.8%，95.5%。見表3。

2.5相關性分析Pearson相關分析顯示，CAP患者血清sTREM-1水平與中性粒細胞CD64之間呈正相關(r=0.631，P<0.01)。

GroupsnCD64(MFI)sTREM-1(pg/ml)Controlgroup4510.63±3.2143.96±4.83OrdinaryCAPgroup5318.82±7.471)65.31±17.961)SevereCAPgroup2337.49±16.041)2)75.39±23.521)2)F45.6154.42P<0.05<0.05

Note：Compared with control group，1)P<0.05；compared with ordinary pneumonia group，2)P<0.05.

TimeSurvivalgroup(n=15)CD64(MFI)sTREM-1(pg/ml)Deathgroup(n=8)CD64(MFI)sTREM-1(pg/ml)1st36.34±14.4874.72±21.5339.63±18.9776.64±27.264th19.47±15.7368.49±25.6246.33±16.0792.57±32.247th14.93±14.2249.52±8.2451.54±19.03117.72±32.83outpatient/antemortem9.89±4.1236.52±4.4362.02±19.87148.80±28.16

表3CD64、sTREM-1對CAP診斷效能的比較(%)

Tab.3Diagnostic efficacy of CD64 and sTREM-1 for CAP(%)

ParameterAUCSensitivitySpecificity95%CICD640.87680.391.10.781-0.962sTREM-10.84382.984.40.729-0.957CD64+sTREM-10.91790.895.50.864-0.976

圖1　流式細胞儀分析圖Fig.1　Flow cytometry analysis diagram

3討論

CAP是老年人呼吸系統常見病及多發病，是具有潛在生命危險的感染性疾病。老年CAP臨床癥狀不典型，臨床醫生判斷病情困難，常常造成對病情的嚴重程度估計不足。因此，臨床迫切需要有效的血液學診斷指標，以輔助CAP的及時診斷和準確預測患者病情變化趨勢和嚴重程度，為指導臨床制定治療方案和分級治療提供依據。

隨著流式細胞儀的普及和應用，外周血中性粒細胞CD64的表達在臨床診斷和治療細菌性感染中得到越來越多的應用。CD64是免疫球蛋白IgG的Fc段受體之一，又稱Fcγ-RI，為免疫球蛋白超家族成員。它是一個高親和力的受體，表達受細胞因子的調節，起連接體液免疫和細胞免疫的橋梁作用[5]，主要分布在單核細胞、巨噬細胞及樹突狀細胞等抗原呈遞細胞表面，正常情況下，在外周血的中性粒細胞表面CD64僅少量表達，但當機體受到感染時，其表達水平明顯增高，可增多5～10倍，且上升速度很快[6]，在4～6 h內會大量升高[7]。本研究通過對老年CAP患者進行相關檢測分析，發現普通肺炎組、重癥肺炎組中性粒細胞CD64水平均明顯高于對照組，且重癥肺炎組明顯高于普通肺炎組，差異均具有統計學意義(P<0.05)；重癥肺炎存活組CD64隨著病情的好轉逐浙下降至正常水平，而死亡組CD64隨著病情的加重持續升高，與陳琳磊等[8]的報道相似，提示CD64與老年CAP病情嚴重程度呈正相關，可作為評估老年CAP患者病情及判斷相應的預后的指標應用于臨床。另外，CD64表達檢測與其他檢查相比，需要的血量較少、操作簡單，檢測快速準確，可以單獨或聯合其他指標進行診斷[9]，其受性別、年齡、抗菌藥物等因素的影響小、且在基層醫院都較易于實施，值得臨床推廣應用。

sTREM-1是TREM-1的分泌亞型，在感染的過程中能夠釋放于血液或體液中，與感染嚴重程度密切相關，是一種早期診斷炎癥性疾病的新指標。sTREM-1在免疫過程發揮重要作用，是促炎性因子[10]。中性粒細胞和巨噬細胞等細胞中sTREM-1表達量最多，在炎性級聯反應中發揮著放大作用[11]。國外有研究證實，sTREM-1水平的高低反應了感染的程度，嚴重感染時會顯著升高，臨床可用于評估感染性疾病的發展和預后[12]，肺部感染患者血清中sTREM-1明顯增高[13]。本研究結果顯示，普通肺炎組、重癥肺炎組中血清sTREM-1水平均明顯高于對照組，且重癥肺炎組明顯高于普通肺炎組，差異均具有統計學意義(P<0.05)；重癥肺炎死亡組患者血清sTREM-1水平持續升高，而存活組患者血清sTREM-1水平呈下降趨勢，說明sTREM-1是一種促炎介質，動態監測其水平變化趨勢能夠反映CAP的病情以及預后情況，水平下降，病情好轉，反之，則考慮病情進展預后不良，與文獻[13,14]的報道相似。

本研究數據ROC曲線分析顯示，CD64診斷CAP的特異性為91.1%優于sTREM-1(84.4%)，而sTREM-1的敏感性為82.9%比CD64(80.3%)高，CD64曲線下面積(AUC)為0.876大于sTREM-1的AUC為0.843，說明對于考察老年CAP早期診斷的單一檢測指標，CD64相比sTREM-1具有更好的預測值；聯合兩項指標診斷CAP的ROC曲線下面積可達到0.917，敏感性和特異性分別提升至90.8%、95.5%，表明應用CD64和sTREM-1聯合檢測對CAP的診斷價值更大。相關性分析表明，CAP患者血清sTREM-1水平與中性粒細胞CD64之間呈正相關，提示兩項指標聯合檢測能互為補充，有可能進一步提高患者病情評估的準確性，利于及時監測疾病進展情況。

綜上所述，CD64、sTREM-1均可作為老年CAP早期診斷有價值的參考標志物，動態監測二者的水平變化趨勢能夠反映CAP的病情以及預后。CD64和sTREM-1聯合檢測可以提高診斷的靈敏度和準確率、對老年CAP的早期診斷、療效觀察、預后判斷具有重要的臨床價值，值得在臨床推廣應用。

參考文獻：

[1]胡銘，馮培峰，劉波，等.pro-AVP和pro-ADM對社區獲得性肺炎嚴重度及預后的預測價值[J].熱帶醫學雜志，2012，12(11):1353-1356.

[2]Li S，Huang X，Chen Z，etal.Neutrophil CD64 expression as a biomarker in the early diagnosis of bacterial infection：a meta-analysis[J].Int J Infect Dis，2013，17(1):e12-23.

[3]Siranovi M，Kovac J，Gopcevi S，etal.Human soluble TREM-1：lung and serum levels in patients with bacterial ventilator associated pneumonia[J].Acta Clin Croat，2011，50(3):345-349.

[4]中華醫學會呼吸病學分會.社區獲得性肺炎診斷和治療指南[J].中華結核和呼吸雜志，2006,29(10):651-655.

[5]Streimish I，Bizzarro M，Northrup V，etal.Neutrophils CD64 as a diagnostic marker in neonatal sepsis[J].Pediatr Infect Dis J,2012,31(7):777-781.

[6]Yamazaki T，Hokibara S，Shigemura T，etal.Markedly elevated CD64 expressions on neutrophils and monocytes are useful for diagnosis of periodic fever，aphthous stomatitis，pharyngitis，and cervical adenitis(PFAPA)syndrome during flares[J].Clin Rheumatol，2014，33(5)：677-683.

[7]沈少卿，許文芳.小兒麻疹合并細菌性肺炎患者中性粒細胞CD64表達水平的臨床應用價值[J].浙江創傷外科，2011，16(40):448-450.

[8]陳琳磊，彭潔雅，易向民.中性粒細胞CD64表達在細菌性肺炎中的診斷價值[J].臨床醫學工程，2013,20(1):23-24.

[9]Dilli D，Oguz SS，Dilmen U，etal.Predictive values of neutrophil CD64 expression compared with interleukin-6 and C-reactive protein in early diagnosis of neonatal sepsis[J].J Clin Lab Anal，2010，24(6):363-370.

[10]趙靜，秦儉，王晶，等.TNF-α和sTREM-1對老年社區獲得性肺炎初始治療效果的評價[J].臨床肺科雜志，2013，18(9):1609-1610.

[11]Vught LA，Endeman H，Meijvis SC，etal.The effect of age on the systemic inflammatory response in patients with community-acquired pneumonia[J].Clin Microbiol Infect，2014,20(11)：1183-1188.

[12]Doi A，Iwata K，Takegawa H，etal.Community-acquired pneumonia caused by carbapenem-resistant Streptococcus pneumoniae：re-examining its prevention and treatment[J].Int J Gen Med，2014,7:253-257.

[13]Chao WC，Wang CH，Chan MC，etal.Predictive value of serial measurements of sTREM-1 in the treatment response of patients with community-acquired pneumonia[J].J Formos Med Assoc，2007,106(3):187-195.

[14]程興梅，張敏，姜杰.重癥肺炎降鈣素原及人可溶性髓系細胞觸發受體-1與乳酸測定的臨床價值研究[J].中華醫院感染學雜志，2013,23(7):1548-1549.

[收稿2015-08-21修回2015-09-28]

(編輯許四平)

Study of diagnostic value of neutrophil CD64 and sTREM-1 in elderly patients with community-acquired pneumonia

NONG Xian-Gang,CHENG Wei-Ping.

Integrative Medicine Orthopaedic Hospital in Guigang City,Guigang 537100，China

[Abstract]Objective:To explore the neutrophil CD64 and sTREM-1 in elderly patients with community-acquired pneumonia (CAP) in the diagnosis of clinical value.Methods: 76 elderly CAP hospitalized patients were divided into severe pneumonia group (n=23) (live in 15 cases,8 deaths)and ordinary pneumonia group(n=53) according to severity;45 patients in the control group compared with healthy older persons.Peripheral blood neutrophil CD64 was measured by automatic flow cytometry，sTREM-1 levels was measured by double-antibody sandwich enzyme-linked immunosorbent assay.The receiver operating characteristic curve (ROC curve) was used to check diagnostic value of the detection.Results: Median concentrations of CD64 and sTREM-1 in the severe pneumonia group,general pneumonia group and control group were 37.49,18.82 and 10.63 MFI,and 75.39，65.31 and 43.96 pg/ml， respectively.Although there was significant differences among the three groups (P<0.05)； CD64 and sTREM-1 in Severe pneumonia survival group reduced to a normal level as his condition improved gradually,death group continued to rise as the disease,and peaked at the time of death;the area under the ROC curve of CD64，sTREM-1were respectively 0.876,0.843,which was 0.917 by combination of CD64 and sTREM-1.Conclusion: Both CD64 and sTREM-1 are good markers in the diagnosis value of CAP, the dynamic changes of two may reflect the condition and prognosis of CAP.

[Key words]Neutrophil CD64;Soluble triggering receptor expressed on myeloid cells-1;Elderly;Community-acquired pneumonia

doi:10.3969/j.issn.1000-484X.2016.06.022

作者簡介：農賢剛(1971年-)，男，主管檢驗師，主要從事臨床生化和免疫檢驗研究，E-mail：Nongxiangang2014@163.com。

中圖分類號R446.1

文獻標志碼A

文章編號1000-484X(2016)06-0871-04