小型豬經頸靜脈肝穿刺活檢術的可行性探討

朱 冰，李曉娟，呂 颯，游紹莉，李瑞生

（1.解放軍第302醫院肝衰竭診療與研究中心，北京 100039；2.解放軍第302醫院臨床研究管理中心，北京 100039）

?

小型豬經頸靜脈肝穿刺活檢術的可行性探討

朱 冰1，李曉娟2，呂 颯1，游紹莉1，李瑞生2

（1.解放軍第302醫院肝衰竭診療與研究中心，北京 100039；2.解放軍第302醫院臨床研究管理中心，北京 100039）

【摘要】目的 探討采用美國Cook公司LABS 200肝內穿刺活檢針套裝行經頸靜脈肝穿刺活檢術（TJLB）的可行性和安全性。方法 利用影像學技術對5只小型豬行TJLB活檢術，在術中密切觀察穿刺路徑，并進行肝臟組織活檢樣本的采集。結果 5只小型豬行TJLB術均成功地采集了肝臟組織的活檢樣本，且無相關并發癥，均取得足夠多的肝組織，可以進行相關病理學的分析。結論 采用Cook公司LABS 200肝內穿刺活檢針套裝在小型豬上行TJLB術安全可行，為臨床進一步的應用提供技術支持。

【關鍵詞】小型豬；經頸靜脈肝穿刺活檢術；介入放射學

隨著國內外肝臟疾病的日益增多，肝組織活檢在肝臟疾病的診斷和治療中起到非常重要的作用。其中經皮肝穿刺活檢技術（PLB）是目前應用較為廣泛的方法，但是對于有大量腹腔積液及嚴重凝血功能異常的患者，應用PLB發生腹腔內出血的風險很高［1，2］。在這種情況下，經頸靜脈肝穿刺活檢術（TJLB）作為一種理想的替代和補充方法應運而生［3］。雖然TJLB在國外已成為常規技術，但由于TJLB的器械一直未正式進入國內市場，國內有關該方法的臨床應用和報道較少［4］，為了更好地開展臨床應用和治療研究，本實驗采用美國 Cook公司LABS 200肝內穿刺活檢針套裝對5只小型豬行TJLB，旨在探討和觀察TJLB的安全性和可行性，為今后臨床上開始應用TJLB方法提供可靠的實驗基礎和支持。

1　材料和方法

1.1實驗動物及實驗器械

成年健康實驗豬5頭，雄性，體重為40～50 kg，購自北京科宇動物養殖中心許可證號：SCXK（京）2012-0004。Liver Access and Biopsy Needle Set （LABS 200）購自 Cook Medical，速眠新（1.5 mL/支）購自軍事醫學科學院軍事獸醫研究所。本實驗室具有普通級實驗動物使用許可證號：SYXK（軍）2012-0009。

1.2術前準備及麻醉

術前小型豬需提前禁食禁水8 h，麻醉時先用速眠新和安定1：1配合，按每公斤體重0.3～0.5 mL肌內注射，誘導后再用戊巴比妥鈉按0.2～0.3 mL/ kg靜脈給予，這種麻醉方式更優于丙泊酚［5］，同時觀察小型豬進入麻醉后的狀態，然后用紗布將舌頭置于口側邊，以防發生窒息，術中密切觀察小型豬的呼吸、脈搏，右后肢靜脈保留置針，以便及時補充麻醉劑以維持其手術。

1.3穿刺活檢過程

TJLB需要有經驗的介入科醫生進行操作，首先分離小型豬右側頸靜脈，以19G穿刺針穿刺右側頸內靜脈，然后引入0.018或0.035導絲，并置入7 cm 長9F血管鞘。透視下，導管導絲配合將導管鞘經右心房進入下腔靜脈；首先行下腔靜脈DSA造影確認無明顯下腔靜脈狹窄，再將導管鞘進入肝靜脈，再造影確認肝靜脈無明顯狹窄閉塞；將導管鞘頭端進一步深入肝右靜脈遠端、距離下腔靜脈3～4 cm處，經鞘引入7F肝穿活檢針，旋轉導管鞘頭端指向正下方，開啟活檢槍完成肝實質活檢，并退出活檢針。視獲得肝組織大小決定是否再次獲取肝組織，最后行肝靜脈造影排除明顯異常。

1.4術后監測

TJLB術后，拔出穿刺針，逐層縫合組織至皮膚，給予抗生素以防發生感染，密切觀察術后小型豬的脈搏和呼吸直至麻醉蘇醒，每天觀察小型豬的生活狀態和傷口愈合情況。

2　結果

2.1TJLB術前準備結果

5頭小型豬均采用速眠新和安定誘導麻醉，然后用戊巴比妥鈉靜脈麻醉，其麻醉深度恰到好處，并適合行TJLB。逐層分離小型豬皮膚、筋膜，成功分離可見右側頸靜脈。

2.2TJLB術在影像學下觀察的結果

5頭小型豬經Cook公司LABS 200肝內穿刺活檢針套裝行TJLB術，在手術過程中，穿刺針順利到達肝臟組織，造影顯示血管均無狹窄（圖1A）。隨后打開活檢針，順利采集肝臟活組織（圖1B）。

圖1　TJLB術中觀察結果Note.A：Access to the right hepatic vein. B：Opening the biopsy gun to take liver tissueFig.1 The results of intraoperative observation in TJLB

2.3TJLB術后肝組織病理結果和小型豬術后觀察結果

TJLB術后將5頭小型豬成功采集到的肝組織進行了病理組織學分析，結果顯示為正常肝臟病理學結果：肝小葉結構清晰，肝索排列規則且以中心靜脈放射排列，肝細胞未見任何異常。TJLB術后采用逐層縫合，同時給予一定的抗生素以防感染。小型豬于術后第2天已全部恢復，并能正常行走和采食，生長狀態良好，無任何不良反應，其傷口愈合好未見感染。

3　討論

肝組織病理活檢是肝臟病變診斷的金標準，在肝臟疾病的診斷和治療中起到非常關鍵性的作用，對疾病診斷、分級、分期、療效判定及預后都有十分重要的參考價值［6］。臨床上獲取肝臟組織的方法非常多，主要有開腹肝活檢、經腹腔鏡肝穿刺活檢、PLB和TJLB等等［7］，而PLB因其簡單易行、費用低廉普遍公認為首選的方法，但患者如果伴有凝血障礙或中重度腹水、重度肥胖、肝臟萎縮等并發癥，采取PLB方法會出現出血的風險［8］，因此目前一致建議對此類患者可行TJLB術。雖然TJLB較PLB操作復雜，還需要訓練有素的醫務人員，花費時間長，費用高，但對于上述一些特殊患者來說卻是一種更安全的替代技術，可減少患者發生風險的可能性，成功獲得肝組織進行病理學診斷以確定下一步的治療方案［9］。另外，經頸靜脈進行肝組織活檢還可以進行肝靜脈造影，測量肝靜脈壓力以及肝靜脈楔壓等指標［10］。

國內有關TJLB的報道較少，羅澤龍等［4］報道了采用美國Cook公司LABS 100肝內穿刺活檢針套裝對12例患者行TJLB證實其安全可行。而本實驗采用美國Cook公司新一代的LABS 200產品在影像學技術的配合下對5只小型豬進行肝內穿刺活檢針套裝實驗，在穿刺過程中，需要注意穿刺針的尖端不要太接近肝被膜，因此本實驗選擇了小型豬的肝右靜脈能夠更好地控制穿刺針尖端與肝被膜的距離確保安全。臨床上常推薦進行3次肝活檢，但是2次肝活檢就足夠滿足臨床實驗診斷［11］，而選擇2次還是3次肝活檢取決于介入放射醫生觀察前兩次標本大小及碎片程度，來決定是否再取1次，標本的長度至少要1 cm［12］。本實驗由于是在探討TJLB的可行性，因此對小型豬成功地采集了3次肝組織，采集的肝臟組織需要進行不同的染色來診斷疾病，有報道稱最少需要6組匯管區對急慢性肝病進行診斷并分級［13］，本實驗為健康的小型豬，因此采用了普通的HE染色來觀察肝臟組織的變化［14，15］，結果均呈現正常肝組織的病理狀態。小型豬術后恢復良好，第2天可以行走和采食，傷口愈合良好無任何并發癥出現，說明對小型豬行TJLB術是成功的、安全可行的。

因此，本實驗在影像學技術的配合下采用美國Cook公司LABS 200肝內穿刺活檢針套裝對小型豬行TJLB術是成功的，說明TJLB術在小型豬上具有一定的可行性，這也將為此技術可以放心地應用于臨床治療和診斷當中提供了科學而又堅實的技術支持。

參考文獻：

［1］ Kis B，Pamarthi V，Fan CM，et al.Safety and utility of transjugular liver biopsy in hematopoietic stem cell transplant recipients［J］.J Vasc Interv Radiol，2013，24（1）：85-89.

［2］ Cholongitas E，Burroughs AK.Liver：transjugular liver biopsy yields high-quality samples［J］.Nat Rev Gastroenterol Hepatol，2012，9（9）：491-492.

［3］ Pathak K，Gopinath M，Salgotra KR.Transjugular liver biopsy ［J］.Med J Armed Forces India，2013，69（4）：384-387.

［4］ 羅澤龍，馮超，趙劍波.經頸靜脈肝穿刺活檢術12例 ［J］.介入放射學雜志，2015，24（5）：446-448.

［5］ 王洋，陳克研，張賀，等.丙泊酚靜脈麻醉與異氟醚吸入麻醉在巴馬小型豬實驗中的比較研究 ［J］.中國比較醫學雜志，2012，22（7）：25-28.

［6］ Sporea I，Popescu A，Sirli R.Why，who and how should perform liver biopsy in chronic liver diseases？［J］.World J Gastroenterol，2008，14：3396-3402.

［7］ Beckmann MG，Bahr MJ，Hadem J，et al.Clinical relevance of transjugular liver biopsy in comparison with percutaneous and laparoscopicliverbiopsy［J］.GastroenterolResPract，2009：947014.

［8］ 高海軍，陳光，蔡金貞，等.經頸靜脈肝活檢在肝移植術后患者中的應用［J］.實用器官移植電子雜志，2014，2（1）：16 -19.

［9］ Procopet B，Bureau C，Métivier S，et al.Tolerance of liver biopsy in a tertiary care center：comparison of the percutaneous and the transvenous route in 143 prospectively followed patients ［J］.Eur J Gastroenterol Hepatol，2012，24（10）：1209-1213.

［10］ 高海軍.經頸靜脈肝活檢技術應用進展 ［J］.實用器官移植電子雜志，2015，3（2）：121-124.

［11］ Miraglia R，Maruzzelli L，Minervini MI，et al.Transjugular liver biopsy in liver transplant patients using an 18-gauge automated core biopsy needle［J］.Eur J Radiol，2011，80（3）：e269 -272.

［12］ Hardman RL，Perrich KD，Silas AM.Single-institution Results of image-guided nonplugged percutaneous versus transjugular liver biopsy［J］.Cardiovasc Intervent Radiol，2011，34（2）：369 -375.

［13］ Kalambokis G，Manousou P，Vibhakorn S，et al.Transjugular liver biopsy-indications，adequacy，quality of specimens，and complications-a systematic review［J］.J Hepatol，2007，47 （2）：284-294.

［14］ 李曉娟，湯紫榮，李蓓，等.近交系小鼠移植性肝癌模型建立及對比分析 ［J］.中國比較醫學雜志，2014，24（9）：42 -45.

［15］ 白云峰，李曉娟，李永綱，等.近交系小鼠酒精性脂肪肝模型建立的分析 ［J］.中國比較醫學雜志，2014，24（1）：8 -11.

〔修回日期〕2015-12-16

Feasibility of transjugular liver biopsy in minipigs

ZHU Bing1，LI Xiao-juan2，LV SA1，YOU Shao-li1，LI Rui-sheng2
（1.Liver Failure Treatment and Research Center，302 Hospital of PLA，Beijing 100039，China. 2.Research Center for Clinical Medicine，302 Hospital of PLA，Beijing 100039，China）

【Abstract】Objective To evaluate the feasibility and safety of transjugular liver biopsy（TJLB）by using the LABS 200 liver access and biopsy set（Cook Inc，USA）.Methods Five minipigs were operated though TJLB puncture under the imaging guidance.The liver biopsies were analyzed by histological examination.Results Technical success of TJLB was achieved in all the 5 minipigs.No procedure-related complications occurred，and sufficient amount of specimen for histological examination was obtained in all cases.Conclusions Our preliminary results indicate that transjugular liver biopsy with the use of Cook LABS 200 liver access and biopsy set is clinically safe and feasible，and provide technical support for its clinical application.

【Key words】Minipig；Transjugular liver biopsy；Interventional radiology

【中圖分類號】R-33

【文獻標識碼】A

【文章編號】1671-7856（2016）04-0072-03

doi：10.3969.j.issn.1671-7856.2016.04.013

［基金項目］北京市科委計劃課題項目（Z141100002114038）和院內課題項目（YNKT007）。

［作者簡介］朱冰（1979-），男，博士，主治醫師，E-mail：zhubing302@163.com；李曉娟（1980-），女，碩士；并列第一作者。

［通訊作者］游紹莉（1972-）女，碩士，主任醫師，主要從事臨床肝病方面研究；李瑞生（1969-），男，博士，副研究員，主要從事人類疾病動物模型研究，E-mail：lrsheng@sohu.com。