李寶秀 方喜生 張 敏 毛海波 關明媚 劉國龍
1 廣州醫科大學附屬廣州市第一人民醫院腫瘤科(廣州 510180) 2 廣東藥科大學公共衛生學院(廣州 510310)
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自噬對鼻咽癌細胞CNE2放療敏感性的調節作用
李寶秀1方喜生1張敏2毛海波1關明媚1劉國龍1
1廣州醫科大學附屬廣州市第一人民醫院腫瘤科(廣州 510180) 2廣東藥科大學公共衛生學院(廣州 510310)
【摘要】目的探討自噬激活劑和自噬抑制劑分別對鼻咽癌細胞CNE2放療敏感性的影響。方法利用RNA干擾技術使atg5基因沉默,構建自噬抑制細胞模型后,與雷帕霉素、氯喹分別處理的兩組細胞一起,每天以X射線5Gy照射細胞,連續8天觀察各組細胞的生長狀況,并設置對照組。以MTT法及克隆集落形成法檢測其細胞活力,用流式細胞儀分析其細胞周期。結果與對照組相比,其他三組細胞存活率、克隆形成率、照射后存活率均顯著降低(P<0.05);細胞周期檢測除對照組外其他三組細胞集中在G0/G1期,其他兩個時期比G0/G1期相對較少。結論自噬抑制劑與激活劑和atg5沉默均能為CNE2放療增敏,然而自噬激活劑的增敏效果好于其他,為增敏放療提供實驗依據,開辟新的放療增敏途徑。
【關鍵詞】自噬鼻咽癌放療敏感性雷帕霉素氯喹
自噬(autophagy)是一種細胞在能量缺乏、代謝等壓力下的自我降解過程[1-2]。自噬不僅具有維持細胞自我穩態、促進細胞生存的作用,過度上調的自噬作用也可以引起細胞死亡,即“自噬性細胞死亡”[3]。放療可誘導自噬,自噬對放療敏感性的調節作用尚不清楚[4]。本研究通過體外實驗干預鼻咽癌自噬后聯合或單獨放療對鼻咽癌細胞的影響,明確鼻咽癌自噬現象與放療的關系,為增敏放療提供實驗依據,開辟新的放療增敏途徑。
1材料與方法
1.1材料與儀器胎牛血清(Hyclone)、青霉素、鏈霉素、谷氨酰……