HDAC3和HDAC5在乳腺癌中的表達(dá)與臨床病理特征意義

林俊杰,楊昭婷,玄延花,倪衛(wèi)東,王麗強(qiáng)

(1.延邊大學(xué) 2013級口腔醫(yī)學(xué)專業(yè)，吉林 延吉133002；2.延邊大學(xué)醫(yī)學(xué)院 病理學(xué)教研室；3.吉林大學(xué)中日聯(lián)誼醫(yī)院)

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HDAC3和HDAC5在乳腺癌中的表達(dá)與臨床病理特征意義

林俊杰1,楊昭婷2,玄延花2,倪衛(wèi)東2,王麗強(qiáng)3*

(1.延邊大學(xué) 2013級口腔醫(yī)學(xué)專業(yè)，吉林 延吉133002；2.延邊大學(xué)醫(yī)學(xué)院 病理學(xué)教研室；3.吉林大學(xué)中日聯(lián)誼醫(yī)院)

近幾年來,我國乳腺癌患者以每年21萬例的增長速度成為女性最常見惡性腫瘤中的第一位[1]。有效的治療乳腺癌,對于保障女性的生命與健康意義重大。準(zhǔn)確的估計乳腺癌患者的預(yù)后情況，對于指導(dǎo)乳腺癌患者的個體化靶向治療具有很大幫助。所以，研究乳腺癌患者預(yù)后的相關(guān)影響因素迫在眉睫。

研究發(fā)現(xiàn)組蛋白去乙酰化酶(HDACs)在乳腺癌的發(fā)生、演進(jìn)過程中具有重要作用。其中HDAC3屬于Ⅰ類HDACs，HDAC5屬于Ⅱ類HDACs，HDAC3和HDAC5均可通過催化生理過程中的關(guān)鍵蛋白,從而影響腫瘤的發(fā)生與發(fā)展。研究表明HDAC3在浸潤性乳腺癌組織中高表達(dá)[2]，為進(jìn)一步研究HDAC3和HDAC5在乳腺癌組織中的表達(dá)情況與患者預(yù)后的關(guān)系，本研究共選取29例乳腺組織和124例乳腺癌組織，通過免疫組化EnVision法測定HDAC3和HDAC5在乳腺癌組織中表達(dá)的情況，并從表觀遺傳學(xué)角度探討其與臨床病理特征及預(yù)后的關(guān)系。

1材料與方法

1.1材料本研究選取延邊大學(xué)醫(yī)院病理科1998-2008年的正常乳腺組織29例和乳腺癌組織存檔蠟塊標(biāo)本124例。124例乳腺癌組織中患者年齡≤50歲84例，年齡>50歲40例；根據(jù)AJCC 2009年腫瘤的分期標(biāo)準(zhǔn)，124例乳腺癌組織中TNM分期：Ⅰ期31例；Ⅱ期54例；Ⅲ期39例；124例乳腺癌組織中,淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陽性的有64例,淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陰性的有60例。依據(jù)在第十三屆St.Gallen國際專家共識推薦的乳腺癌分子分型標(biāo)準(zhǔn),本組124例乳腺癌病變組織分4型,Luminal A型22例,Luminal B型72例,HER-2過表達(dá)型21例,三陰性型9例。

1.2免疫組織化學(xué)染色免疫組織化學(xué)染色采用EnVision法,免疫組化EnVision檢測試劑盒購自DAKO公司,HDAC3、5均購自 Cell Signaling Technology公司。染色步驟按免疫組化DAB染色常規(guī)操作步驟進(jìn)行。為證明免疫組化檢測的特異性,實驗中應(yīng)用了兔IgG代替一抗作為對照,結(jié)果為陰性。

1.3染色結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)棕褐色的陽性顆粒位于細(xì)胞核和(或)細(xì)胞質(zhì)中。以陽性染色細(xì)胞數(shù)所占的百分比作為主要分類依據(jù),將染色結(jié)果分為兩類:陽性和陰性。陽性細(xì)胞數(shù)超過20%為陽性，陽性細(xì)胞數(shù)低于20%為陰性。

1.4統(tǒng)計學(xué)方法統(tǒng)計學(xué)分析采用SPSS19.0軟件進(jìn)行，實驗數(shù)據(jù)之間的參數(shù)比較采用χ2檢驗，同時應(yīng)用Kaplan-Meier法繪制HDAC3和HDAC5的表達(dá)與患者術(shù)后生存時間曲線的關(guān)系圖，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2結(jié)果

HDAC3和HDAC5主要表達(dá)于乳腺癌組織的細(xì)胞核及細(xì)胞質(zhì)中。HDAC3和HDAC5在正常乳腺組織和乳腺癌組織中的表達(dá)見表1，與臨床病理特征的關(guān)系見表2。HDAC3(P=0.004)和HDAC5(P=0.012)表達(dá)陽性的乳腺癌患者的總生存率明顯低于陰性者(圖1)。

表1　HDAC3和HDAC5在正常乳腺組織及乳腺癌組織中的表達(dá)情況

表2　HDAC3和HDAC5在乳腺癌組織中的表達(dá)與臨床病理特征的關(guān)系

3討論

表觀遺傳學(xué)(Epigenetics)是指在基因編碼的DNA序列不變的前提下，通過某些機(jī)制而產(chǎn)生的可遺傳的細(xì)胞表型或基因表達(dá)改變的科學(xué)。組蛋白的修飾是引起表觀遺傳學(xué)改變的主要機(jī)制之一，組蛋白的乙酰化修飾在腫瘤的發(fā)生發(fā)展過程中扮演著重要角色。組蛋白的乙酰化修飾離不開HDACs,而HDACs可以影響多種癌基因或抑癌因子的表達(dá)，進(jìn)而導(dǎo)致細(xì)胞的惡性增殖和腫瘤的發(fā)生[3]。在本研究中，我們發(fā)現(xiàn)HDAC3和HDAC5在乳腺癌組織中高表達(dá)，并且二者的表達(dá)跟乳腺癌患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及較差的預(yù)后有關(guān)系。

圖1　HDAC3和HDAC5蛋白表達(dá)與乳腺癌患者總生存率之間的關(guān)系

Mariadason等[4]研究報道證實與鄰近的正常組織相比，HDAC3在腫瘤組織中高表達(dá)，并且下調(diào)HDAC3的水平將導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞存活的減少。在本研究中，我們發(fā)現(xiàn)HDAC3在乳腺癌組織中的陽性表達(dá)率明顯高于正常的乳腺組織，這說明HDAC3可能是乳腺腫瘤形成與發(fā)展的一個重要危險因素。Wilko等[5]研究表明HDAC3在胃癌組織中高表達(dá)，并且其預(yù)示與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和較差的預(yù)后顯著相關(guān)。以上研究結(jié)果與本研究結(jié)果相近，HDAC3在乳腺癌組織中高表達(dá)，與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和較差的預(yù)后具有相關(guān)性，提示HDAC3可以作為評價乳腺癌患者預(yù)后的一個重要參考因素。但是，Krusche等[6]研究報道認(rèn)為 HDAC3的表達(dá)與乳腺癌患者預(yù)后無關(guān)，并不影響患者的無病生存期和總生存期。其結(jié)果與本研究結(jié)果不一致，HDAC3 在腫瘤組織中的表達(dá)在不同的研究中存在較大差異,他們真正的關(guān)系還需要進(jìn)一步去研究揭露。

Milde等[7]的研究報道與低風(fēng)險的髓母細(xì)胞瘤相比,HDAC5在高風(fēng)險的髓母細(xì)胞瘤高表達(dá)，并且與較差的預(yù)后具有相關(guān)性。我們也發(fā)現(xiàn)，HDAC5在乳腺癌組織中的陽性表達(dá)率高于正常的乳腺組織，并且HDAC5表達(dá)陽性的乳腺癌患者其總生存率也明顯低于陰性者。在體外胃癌細(xì)胞系研究中，Lee等[8]發(fā)現(xiàn)HDAC5在促進(jìn)胃癌的侵襲及轉(zhuǎn)移方面具有重要作用。通過本實驗，我們推測HDAC5可能參與乳腺癌的遷移，因為它在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陽性的乳腺癌患者中的陽性表達(dá)率明顯比陰性組高，具體機(jī)制需要進(jìn)一步研究。以上結(jié)果說明HDAC5在乳腺癌患者中高表達(dá)，并且與患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、較差的預(yù)后具有相關(guān)性。

綜上所述，HDAC3和HDAC5在乳腺癌組織中過表達(dá)，并與患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、較差的預(yù)后密切相關(guān)。因此，對于乳腺癌患者,分析HDAC3和HDAC5的表達(dá)情況對評價患者的預(yù)后具有一定的參考價值。

參考文獻(xiàn)：

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[3]Cress WD,Seto E.Histone deacetylases,transcriptional control,and cancer[J].Cell Physiol,2000,184(1):1.

[4]Mariadason JM.Dissecting HDAC3-mediated tumor progression[J].Cancer Biol Ther,2008,7(10):1581.

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[6]Krusche CA,Wülfing P,Kersting C,et al.Histone deacetylase-1 and-3 protein expression in human breast cancer:a tissue microarray analysis[J].Breast Cancer Res Treat,2005,90(1):15.

[7]Milde T,Oehme I,Korshunov A,et al.HDAC5 and HDAC9 in medulloblastoma:novel markers for risk stratification and role in tumor cell growth[J].Clin Cancer Res,2010,16(12):3240.

[8]Lee KH,Choi EY,Kim MK,et al.Inhibition of histone deacetylase activity down-regulates urokinase plasminogen activator and matrix metalloproteinase-9 expression in gastric cancer[J].Mol Cell Biochem,2010,343(1-2):163.

*通訊作者

文章編號：1007-4287(2016)06-1001-03

(收稿日期：2015-08-21)