肺結核患者外周血輔助性T細胞亞群相關細胞因子臨床意義初探

李曉紅,佟冬冬

(1.長春市傳染病醫(yī)院,吉林 長春130123；2.吉林大學第一附屬醫(yī)院,吉林 長春130021)

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肺結核患者外周血輔助性T細胞亞群相關細胞因子臨床意義初探

李曉紅1,佟冬冬2*

(1.長春市傳染病醫(yī)院,吉林 長春130123；2.吉林大學第一附屬醫(yī)院,吉林 長春130021)

結核分枝桿菌感染宿主后發(fā)病與否，不僅與感染細菌的數(shù)量和毒力等因素相關，同時還取決于機體的免疫功能狀態(tài)。目前認為機體的抗結核免疫反應主要通過T淋巴細胞介導巨噬細胞的細胞免疫反應[1]。為明確CD4+T淋巴細胞及其亞型相關細胞因子與結核病進展的相關性,我們應用流式細胞術檢測肺結核患者CD4+T淋巴細胞計數(shù),采用流式細胞微球陣列技術(CBA)檢測其分泌細胞因子INF-γ、IL-2、 IL-4、IL-10的含量，探討其經(jīng)有效抗結核治療后的臨床意義。現(xiàn)將研究結果報道如下。

1資料與方法

1.1一般資料肺結核患者組：選取2010年1月-2011年12月于我院診斷治療的初治肺結核患者給予常規(guī)抗結核化療方案進行治療，即2HRZE/4HR(H為異煙肼，R為利福平，Z為吡嗪酰胺，E為乙胺丁醇)，6個月后達臨床治愈(癥狀均緩解，痰菌陰轉，X線胸片提示結核病灶明顯吸收)。共92例，其中男62例，女30例，年齡在18-57歲之間，平均年齡為28.84±11.06歲。所有患者均符合中華醫(yī)學會結核病學分會制定的《肺結核診斷及治療指南》診斷標準[2]。所有患者均排除心、肝、腎等臟器嚴重疾病或自身免疫性疾病的患者，未曾使用免疫調節(jié)劑，化療過程中可依據(jù)患者的臨床表現(xiàn)給予適當?shù)谋８嗡幬锛皬秃暇S生素輔助治療。健康人群對照組：選取健康人群30例，其中男20例，女10例，年齡19-58歲之間，平均年齡為30.3±11.88歲。兩組在性別構成和平均年齡方面比較均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，具有組間可比性。

1.2試驗方法肺結核患者組于治療前、治療后2個月以及化療后6個月，對照組空腹抽取靜脈血4-5 ml進行檢測。CD4+T淋巴細胞檢測采用抗凝全血標本;選用試劑為BD MultiTESTTMCD3/CD8/CD45/CD4 Kit(美國 BD 公司,批號:84305)Thl/Th2相關細胞因子INF-γ、IL-2、 IL-4、IL-10檢測選用試劑為BDTMCBAHuman Thl/Th2 Cytokine II Kit(美國 BD 公司,批號:88810)。使用美國BD公司的BD FACSCalibur流式細胞儀于吉林大學公共衛(wèi)生學院實驗中心進行檢測，試驗方法嚴格按照試劑盒所提供的說明書操作。

1.3統(tǒng)計方法所有臨床研究數(shù)據(jù)均采用SPSS13.0軟件t檢驗進行統(tǒng)計學分析，并以P<0.05表示差異顯著，P<0.01表示差異非常顯著。

2結果

2.1患者組與對照組的CD4+T淋巴細胞及其亞型Th1/Th2細胞相關細胞因子水平比較

與對照組健康人群相比，肺結核患者CD4+T淋巴細胞計數(shù)降低，INF-γ水平降低，差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；IL-10水平明顯提高，經(jīng)統(tǒng)計學分析，有顯著差異(P<0.01)。結果見表1。

表1　實驗組與對照組的比較±s)

注：與對照組相比，*表示P<0.05，**表示P<0.01

2.2肺結核患者在抗結核治療過程中CD4+T淋巴細胞及相關細胞因子水平動態(tài)觀察及比較

患者在強化治療(2個月后)、療程結束(6個月后)測定CD4+T淋巴細胞計數(shù)及細胞因子INF-γ、IL-2、 IL-4、IL-10水平，分別與入院時測定情況進行比較及統(tǒng)計學分析。治療2個月后，CD4+T淋巴細胞計數(shù)、INF-γ、IL-2、IL-4無明顯變化，經(jīng)統(tǒng)計學分析無明顯差異；IL-10水平較前下降，其差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。治療6個月后，CD4+T淋巴細胞計數(shù)明顯上升，IL-10水平明顯下降，經(jīng)統(tǒng)計學分析有顯著差異(P<0.01)；INF-γ水平上升、IL-4水平下降，差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；IL-2水平上升，經(jīng)統(tǒng)計學分析有明顯差異(P<0.01)。結果見表2。

表2　治療過程中CD4+T淋巴細胞及其亞型Th1/Th2細胞相關細胞因子水平的比較±s)

注：與入院時相比，*表示P<0.05，**表示P<0.01

3討論

有關結核病患者機體免疫功能方面的研究,是近幾年來國內外學者研究的熱點之一。結核病免疫是T淋巴細胞介導的細胞免疫,CD4+T淋巴細胞對結核病的發(fā)病和演變具有決定性意義。CD4+T淋巴細胞因分泌不同的細胞因子,分型為Th1和Th2細胞,其平衡狀態(tài)與疾病的轉歸和愈后密切相關[1]。Th1細胞主要通過分泌IFN-γ、IL-2等細胞因子發(fā)揮相應的生物學效應，在細胞免疫中發(fā)揮極為重要的作用。IFN-γ通過促進Th1細胞和巨噬細胞參與的炎癥反應，抑制Th2細胞和嗜酸性粒細胞參與的炎癥反應而加強細胞免疫應答。Th2細胞主要通過分泌IL-4、IL-10等細胞因子發(fā)揮相關生物學效應。IL-4通過抑制巨噬細胞的活化，阻斷INF-γ激活巨噬細胞介導的免疫應答[3]。由此可見，Th1/Th2應答平衡對于結核病的發(fā)生、發(fā)展及轉歸起著決定性的作用。

本研究主要是針對初治結核病患者的CD4+T細胞計數(shù)以及Th1和Th2細胞相關細胞因子進行測定觀察，從而對于患者的免疫功能進行分析判定。結果顯示：92例肺結核患者外周血CD4+T細胞的水平較健康對照組低,提示細胞免疫功能降低；通過INF-γ、IL-2水平降低可判定Th1細胞水平降低，提示保護性細胞免疫功能抑制；IL-4、IL-10水平明顯提高可判定Th2細胞水平增加。可見活動性肺結核患者細胞免疫功能降低，Th1/Th2應答平衡失衡。此結論與相關學術報道[4,5]結論一致。在抗結核治療過程中動態(tài)觀察并與治療前進行對比分析，有效的抗結核治療有助于細胞免疫功能逐漸恢復。表2數(shù)據(jù)顯示，活動性肺結核患者在抗結核強化治療后，CD4+T細胞計數(shù)增加(P<0.05)，IL-10數(shù)值下降(P<0.05)；經(jīng)有效抗結核治療6個月后，CD4+T細胞計數(shù)明顯增加(P<0.01)，INF-γ水平升高(P<0.05)、IL-2水平升高(P<0.01)，IL-2數(shù)值下降(P<0.05)，IL-10數(shù)值下降(P<0.01).此組觀察病例均為抗結核治療取得良好療效的病例，故可推斷：活動性肺結核經(jīng)有效抗結核治療后免疫功能逐漸恢復，Th1細胞水平增加，Th2細胞水平降低，Th1/Th2應答平衡平衡逐漸恢復。

綜上所述，活動性肺結核患者細胞免疫功能降低，Th1/Th2應答平衡失衡，Thl細胞的功能降低，Th2細胞功能增強；經(jīng)有效抗結核治療后，細胞免疫功能逐漸恢復。由此可見，外周血CD4+T細胞計數(shù)以及Th1和Th2細胞相關細胞因子水平的動態(tài)監(jiān)測有助于對肺結核患者預后情況的正確評價。然而，免疫細胞和細胞因子的作用是復雜的和多方面的，其具體機制仍需進一步深入研究。

參考文獻：

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[4]張賢蘭，呂江青，林兆原，等.肺結核患者CD4+T淋巴細胞凋亡及相關細胞因子水平變化[J].廣州醫(yī)學，2008，29(10)：1664.

[5]譚耀駒，張言斌，馮蝶儀，等.初治肺結核患者外周血Th1/Th2 細胞的測定及臨床意義[J].中華結核和呼吸雜志，2004，27(6)：385.

文章編號：1007-4287(2016)06-1011-02

*通訊作者

(收稿日期：2015-08-19)