HemoCue Hb 201+ 分析儀測定血紅蛋白結果的可比性研究

楊新平　王偉　項明方　劉志恒

[摘要] 目的 評估便攜式HemoCue Hb 201+分析儀急性失血后輸血的指導意義。 方法 選擇2013年6月～ 2015年5月間深圳市第二人民醫院全麻術中因急性失血可能需要輸血的患者共208例，血標本采集后，分別采用HemoCue Hb 201+分析儀及SYSMEX XE-2100型血細胞分析儀測定同一標本的Hb，所測得的數據進行相關分析，并采用Bland-Altman 法評價兩種檢驗方法的一致性。 結果 HemoCue Hb 201+分析儀和中心實驗室SYSMEX XE-2100全自動血液分析儀測得的Hb具有良好的相關性（y = 15.9297 + 0.8086x，r=0.888，P<0.001）。兩種方法檢測Hb差值95%的一致性限度超出臨床可接受范圍。 結論 HemoCue Hb 201+分析儀在急性失血后Hb的檢測具有較好的準確性，并且迅捷，對術中輸血具有良好的指導意義；但與標準方法的一致性尚有不足，二者不能相互取代。

[關鍵詞] HemoCue Hb 201+分析儀/儀器設備；血液生化分析/儀器設備；血紅蛋白測定

[中圖分類號] R446.11 [文獻標識碼] B [文章編號] 2095-0616（2016）09-140-04

[Abstract] Objective To assess the guiding significance of portable HemoCue Hb 201+ analyzer in blood transfusion after acute blood loss. Methods 208 patients with blood transfusion after acute blood loss during general anesthesia from June 2013 to May 2015 in the second people's hospital of shenzhen were selected， after blood specimen collection， the Hb of same specimen was respectively tested by HemoCue Hb 201+ analyzer and SYSMEX XE-2100 blood cell analyzer simultaneously， the taken data was relatively analyzed， the consistency between the two testing methods was evaluated by Bland-Altman method. Results The measured Hb of HemoCue Hb 201+ analyzer and SYSMEX XE-2100 automatic blood analyzer in central Laboratory had good correlation （y=15.9297+0.8086x， r=0.888， P<0.001）. The consistency limit of the 95% Hb difference tested by the two methods was beyond the clinically acceptable range. Conclusion HemoCue Hb 201+ analyzer in Hb testing after acute blood loss had good accuracy and fast， which had good guiding significance for intraoperative blood transfusion. This was inadequate compared the consistency of standard method， these two methods could not replace each other.

[Key words]HemoCue Hb 201+ analyzer or instrumentation； Blood biochemical analysis or instrumentation； Hemoglobin determination

在外科手術過程中，選擇一種簡便、快速、準確的血紅蛋白（Hb）測定儀器實時掌握術中血紅蛋白的變化，以指導術中合理輸血，是麻醉醫生面臨的一大難題[1-2]。在臨床工作中，通常的流程是，臨床工作人員采集血液標本后由相關人員送入中心實驗室，中心實驗室多采用全自動血細胞分析儀測定血紅蛋白。這種方法雖結果準確，但所需時程長，不能作為手術過程中實時血紅蛋白變化的監測[3-5]。隨著科技的發展，多種床旁便攜式血紅蛋白分析儀已應用于許多醫院的麻醉科以及ICU等，以獲得血

紅蛋白的實時檢驗數據[5]。HemoCue Hb 201+是近年來臨床應用較多的一種床旁快速血紅蛋白監測儀器。我們應用此儀器測定Hb，將其測定結果與中心實驗室的SYSMEX XE-2100全自動血液分析儀檢測結果的作對比，評價兩種儀器結果的相關性和一致性，從而為HemoCue Hb 201+ 分析儀應用于臨床術中輸血評估提供依據。

1 資料與方法

1.1 一般資料

2013年6月～2015年5月共3年間擇期手術的全麻患者，納入標準為：術前血紅蛋白≥90g/L，術中出血量>800mL，估計可能需要輸血者。共收集病例208例，其中顱腦外科手術79例，脊柱外科手術66例，其他骨科手術15例，胸肺手術13例，婦產科手術9例，肝臟手術6例，胃腸道手術6例，胰腺手術3例，其他手術11例。患者術前ASA 評級Ⅰ～Ⅲ級，其中男116例，女92例，年齡18～83歲，平均（49.8±24.44）歲，體重38～90kg，平均（65.62±19.783）kg。

1.2 研究方法

所在患者在麻醉插管成功后，穿刺上肢動脈監測動脈壓。在術中估計需要輸血前取動脈血3mL。其中1mL動脈血標本抽血后即刻經HemoCue Hb 201+分析儀（采用疊氮化高鐵血紅蛋白法）行Hb測定。另2mL動脈血標本注入乙二胺四乙酸二鈉（EDTA）抗凝真空管，迅速將管內血標本與抗凝劑充分混勻，15min內送入本院中心實驗室，用SYSMEX XE-2100全自動血液分析儀（采用十二烷基月桂酰硫酸鈉血紅蛋白法）測定血Hb濃度。結果出來后，電話報告至手術間，記錄獲得Hb數值的時間。

1.3 統計學處理

定量數用（）的形式表示，采用SPSS18.0 軟件進行相關分析和線性回歸分析，采用Medcalc軟件進行一致性分析（Bland‐Altman 法），以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 分別采用兩種方法檢測血Hb值及相關性分析

術中全部208例患者在取得血標本后，即刻經HemoCue Hb 201+分析儀檢測血Hb，均在2min（120s）時獲得數據，測得血Hb 值為40～173g/L，平均（78.47±22.23）g/L。另一份血標本送中心實驗室行急診檢驗，經SYSMEX XE-2100全自動血液分析儀測定血Hb值后，即刻電話通知結果，獲得數據時間為42～75min平均（52.33±15.471min），測得的Hb值為38～175g/L，平均（77.22±24.03）g/L。見表1。

兩種方法所測得血Hb濃度具有顯著的相關性，相關系數r=0.888（P<0.0001），相關系數的95%置信區間為（0.914～0.978），直線回歸方程為： y=15.9297 + 0.8086 x，其中y為HemoCue Hb 201+測得Hb值，x為中心實驗室SYSMEX XE-2100全自動血液分析儀測得的Hb值。見圖1。

2.2 兩種檢驗方法的一致性分析（Bland‐Altman法）

以中心實驗室SYSMEX XE-2100全自動血液分析儀測得的Hb值為橫坐標，以兩種方法測得的血紅蛋白結果差值d為縱坐標，并以差值的均數d±1.96×差值的標準差（sd）為95%的一致性限度，標繪出散點圖（圖2）。兩種測量方法差值的95%一致性限度為（20.5，-23），208個散點中有14個散點位于95%的一致性限度之外，比例為6.73%（14/208），大于5%。

臨床可以接受的界限參考美國臨床實驗室改進法案修正案[6]（CLIA88）規定的血紅蛋白檢測以靶值±7%為準。兩種儀器測定Hb的一致性限度的95%可信區間超過臨床可以接受的界限（-5.40，5.40）g/L。其中有19個散點（19/208，9.13%）的值高于這個界限，有49個散點（49/208，23.56%）的值低于這個界限，僅有126個散點（126/208，60.58%）的值在臨床可接受的界限范圍內。

3 討論

在手術失血期間，麻醉醫生常常需要監測患者血紅蛋白水平，以指導術中合理輸血[1-2]。我國血紅蛋白測定的標準方法根據衛生部頒布的氰化高鐵血紅蛋白法[7]，但操作過程中需要使用較大毒性試劑，對環境造成污染。因此，國際上均不采用此法作為臨床檢驗的方法。目前常用的是十二烷基月桂酰硫酸鈉血紅蛋白（SLS-Hb）法，經自動血液分析儀檢測，和標準的氰化高鐵血紅蛋白法有良好的一致性。但此方法需將血液標本送入檢驗科室進行分析，耗時較長，不能及時獲得的血紅蛋白數值。本組患者中，即使通過術中急查的方式檢測血Hb值，血標本經轉運、處理、自動分析和結果回報后，獲得Hb結果的時間為42～75min，平均（52.33±15.471） min。這么長的時間，在需要爭分奪秒決定是否輸血的手術中，往往難以接受的。

隨著科技發展，各類便攜式檢測儀器的出現，使得即時檢測血紅蛋白數值得以實現[8-9]。HemoCue Hb 201+分析儀是近年來國內外快速檢測Hb的儀器之一，它被廣泛應用于街頭獻血者的篩查，其測定血紅蛋白精密度好，檢測結果可靠 [9-12]。研究表明Hb在低于12.5g/dL時，HemoCue Hb 201+測定的Hb值與標準方法的相關性良好，而當Hb高于18g/dL時，兩種方法測定的Hb值即失去線性相關關系[13-14]。街頭獻血者大部分是血紅蛋白濃度正常的人，即使篩選出貧血患者，往往是慢性貧血，其血漿容量是正常的，最常見類型為缺鐵性貧血所導致的小細胞低色素性貧血。隨著HemoCue Hb的廣泛應用，亦有研究者將之應用快捷的疾控機構現場血紅蛋白測定和術中快速失血后輸血的評估[15-16]。對于后者，由于急性失血和血液稀釋引起的急性貧血， HemoCue Hb 201+分析儀測定Hb能否準確估計貧血的程度和出血量，它與中心實驗室測定Hb之間的一致性如何，還有待評估。Akhtar K等[16]認為在術中應用HemoCue法可以準確地檢測血紅蛋白的含量，并優于其他的快速方法。國內劉芳等[17-18]亦有類似的報道。

本組患者在手術過程中的均存在急性失血或/和血液稀釋，臨床判斷需緊急輸血。筆者采用HemoCue Hb 201+分析儀測定Hb，并和SYSMEX XE-2100全自動血液分析儀（采用SLS-Hb）測定Hb值進行對比。結果表明：本研究發現血紅蛋白值在4 ～ 15g/dL區間內兩種儀器所測得的血紅蛋白值相關性顯著，相關系數為0.888（P<0.0001），且具有線性關系，說明HemoCue Hb 201+分析儀在術中急性失血時應用來測定Hb是有良好的參考價值的。術中經HemoCue Hb 201+分析儀檢測血Hb，均在2分鐘（120s）時獲得數據，非常快捷。并且，測得血Hb平均值（78.47±22.23）g/L，95%CI為75.43～81.51g/L，正是臨床上需要輸血的區間。因此，這種快速而又較準確的術中Hb檢測法，對輸血與否的評估，具有重要的指導意義。

同時，我們采用Bland‐Altman分析法[19]評價HemoCue Hb 201+分析儀在術中的應用是否可以替代SYSMEX XE-2100全自動血液分析儀，即采用疊氮化高鐵血紅蛋白法檢測Hb是否和實驗室SLS-Hb血紅蛋白法是一致的。結果表明，兩種檢測指標95%CI 均超出了臨床可接受的界限，故兩種檢測方法的一致性欠佳，尚無法進行完全相互替代。兩種檢測方法的一致性欠佳產生的原因可能為多方面：首先，兩種儀器檢測原理不同，可能導致檢測結果存在一定差異。全自動血液分析儀采用是SLS-Hb法[7]，測定原理為利用表面活性劑先將紅細胞溶解，釋放出血紅蛋白分子。血紅蛋白分子中的正二價鐵離子被氧化為正三價鐵離子，十二烷基硫酸鈉（SLS）的親水端與正三價鐵離子結合形成穩定的SLS-Hb有色基團。SLS-Hb在535nm有最大吸收峰，根據吸光度，即可求得血紅蛋白濃度。而HemoCue Hb 201+分析儀采用疊氮高鐵血紅蛋白法，其測定血紅蛋白的原理為[20]：取HemoCue Hb 201+血紅蛋白儀專用玻璃片， 虹吸法吸取10ul血至玻璃片微小孔內， 與孔內試劑發生反應。在孔內紅細胞膜被脫氧膽酸鈉裂解，釋放出血紅蛋白， 亞硝酸鈉將血紅蛋白轉換成高鐵血紅蛋白， 然后疊氮化鈉與高鐵血紅蛋白結合形成疊氮化高鐵血紅蛋白， 在570nm 和880nm 雙波長測量紅細胞破壞后釋放出的血紅蛋白。兩者不同的校準檢測體系有可能產生一定的系統誤差。方法機制不同，受影響因素亦不同， 在某些病理條件下， HemoCue Hb 201+分析儀測定結果可能會產生較大的偏差[18-21]。因此，在術中使用HemoCue Hb 201+分析儀時要求嚴格按照操作規程使用，定期進行質量控制，定期與實驗室結果進行比對。

綜上所述，HemoCue Hb 201+分析儀應用于急性失血后Hb測定具有較好的準確性，并且迅捷，對術中輸血有良好的指導意義，但與標準方法的一致性尚有不足，二者不能相互取代。

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（收稿日期：2016-02-16）