小麥CBL結合蛋白激酶基因TaCIPK16的克隆及特征分析

MYO THWIN，劉　芃，馬　微，薛慶賀，郭　軍，康振生

(西北農林科技大學 植物保護學院，旱區(qū)作物逆境生物學國家重點實驗室，陜西楊陵 712100)

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小麥CBL結合蛋白激酶基因TaCIPK16的克隆及特征分析

MYO THWIN，劉芃，馬微，薛慶賀，郭軍，康振生*

(西北農林科技大學 植物保護學院，旱區(qū)作物逆境生物學國家重點實驗室，陜西楊陵 712100)

摘要:類鈣調磷酸酶亞基B蛋白(calcineurin B-1ike protein，CBL)作為一類鈣離子結合蛋白，通過與一類蛋白激酶(CBL-interacting protein kinase，ClPK)結合，從而在鈣信號依賴的生理生化過程中發(fā)揮作用。該研究在條銹菌誘導的小麥葉片中克隆獲得CIPK家族中1個基因TaCIPK16，并利用qRT-PCR技術、酵母雙雜交技術及亞細胞定位技術分析了其功能特性。序列分析表明，TaCIPK16編碼447個氨基酸，包含保守的激酶催化結構域及調控結構域，與水稻、擬南芥CIPK蛋白具有高度相似性。酵母雙雜交分析驗證顯示，TaCIPK16與TaCBL4和TaCBL9存在強烈互作。定量分析表明，TaCIPK16受到條銹菌的誘導表達，在小麥與條銹菌互作過程中呈顯著差異表達趨勢。綜上結果，TaCIPK16可能作為正調控因子參與了小麥對條銹菌的抗病防衛(wèi)反應。

關鍵詞:小麥，CBL，蛋白激酶，TaCIPK16，條銹菌

在適應復雜多變自然環(huán)境的進化中，植物形成了完善的信號通路。Ca2+是信號傳導中重要的第二信使，在植物的生理和生長過程中起著重要的作用。植物在響應外界的信號和脅迫時，細胞中的Ca2+水平會發(fā)生相應的改變[1]。植物中存在3種鈣離子結合蛋白，分別是鈣調素CaM (Calmodulin)及其相關蛋白、鈣依賴性蛋白激酶(Ca2+-dependent protein kinases, CDPK)、鈣調磷酸酶B類蛋白(calcineurin B-like protein, CBL)[2]。其中CBL本身沒有激酶活性，必須和靶蛋白CIPK結合形成復合體才能發(fā)揮作用[3]。……