花絨寄甲methuselah-like基因的鑒定和表達1)

王化鵬　郝春鳳　張正青　張偉　常勇　李孟樓

(西北農林科技大學，楊凌，712100)

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花絨寄甲methuselah-like基因的鑒定和表達1)

王化鵬郝春鳳張正青張偉常勇李孟樓

(西北農林科技大學，楊凌，712100)

摘要采用cDNA末端快速擴增技術獲取了花絨寄甲(Dastarcus helophoroides)methuselah-like基因的cDNA全長序列，命名為mth-like2，采用多種生物信息學軟件分析了Mth-like2受體蛋白的結構特征，并采用Real-time qPCR技術分析了該基因的表達情況。結果表明：mth-like2基因cDNA全長為2 117 bp，開放閱讀框的大小為1 458 bp，編碼485個氨基酸，相對分子質量為56 750，理論等電點為8.83，存在7個跨膜結構域。系統發育分析結果顯示，該基因對應的受體蛋白序列與赤擬谷盜(Tribolium castaneum)Mth2-like親緣關系最近。mth-like2基因在不同組織和不同蟲態均有表達，其中雄性生殖系統的表達量顯著高于其他組織，6齡幼蟲顯著高于其他蟲態；mth-like2基因的表達量隨存活時間的延長顯著下調；在氧化、高溫和饑餓條件下，mth-like2基因的表達量也均有顯著變化，且在氧化和高溫下雌雄有顯著差異。

關鍵詞花絨寄甲；Mth-like受體；基因克隆；實時熒光定量PCR

瑪士撒拉基因編碼一個G蛋白偶聯受體，亦稱瑪士撒拉受體(Methuselah，Mth)。Mth受體屬于B家族G蛋白偶聯受體，最早發現于果蠅(Drosophila)中。研究表明，mth基因的突變使果蠅的壽命延長了35%，并且對饑餓、高溫和百草枯等一系列外界脅迫因素的抵抗能力也顯著提高[1]。隨后的研究表明，mth基因不僅延緩了衰老而且加強了果蠅的感知運動能力[2]。但是，mth基因突變會抵消果蠅的生殖能力[3]，這也證明了壽命和生殖能力之間的互抵效應。果蠅的小分子肽Stunted是科學家們發現的首個Mth受體內源性配體。……