花絨寄甲HSP70基因的特征與表達1)

郝春鳳　王化鵬　張正青　常勇　李孟樓

(西北農(nóng)林科技大學(xué)，楊凌，712100)

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花絨寄甲HSP70基因的特征與表達1)

郝春鳳王化鵬張正青常勇李孟樓

(西北農(nóng)林科技大學(xué)，楊凌，712100)

摘要為闡明熱休克蛋白70(HSP70)在花絨寄甲(Dastarcus helophoroides)發(fā)育及雌雄成蟲抵抗環(huán)境脅迫中的作用，利用實時熒光定量PCR技術(shù)分析了其在發(fā)育階段和環(huán)境脅迫時的表達情況。從花絨寄甲轉(zhuǎn)錄組中獲得3條HSP70基因，分別命名為D.hHSP69.09、D.hHSP70.11和D.hHSP71.88。發(fā)育階段定量結(jié)果顯示，3條HSP70在所有發(fā)育階段均有表達，D.hHSP69.09在1齡幼蟲期表達量最高；D.hHSP70.11和D.hHSP71.88在雄蟲中表達量最高。在檢測的成蟲組織中，D.hHSP69.09和D.hHSP70.11在卵巢表達量最高；D.hHSP71.88在脂肪體中表達量最高。HSP70基因隨溫度升高(23 ℃升至44 ℃)、41 ℃下處理時間(0～270 min)延長、氧化劑濃度(0～70 mmol·L-1)的升高表達量先增加后減少，雌雄表達量差異較大。饑餓試驗顯示，雌雄蟲表達模式不同；隨饑餓時間延長，雄蟲HSP70基因表達量有所降低，雌蟲一定時間內(nèi)有所上升。因此，花絨寄甲HSP70可能與不同發(fā)育期的轉(zhuǎn)換、幼蟲的蛻皮行為相關(guān)； HSP70對溫度、氧化和饑餓脅迫的應(yīng)激敏感程度和表達水平不同，能夠有效應(yīng)對高溫、氧化、饑餓等環(huán)境脅迫。

關(guān)鍵詞花絨寄甲；逆境脅迫；HSP70；實時熒光定量 PCR

花絨寄甲(Dastarcus helophoroides)是多種林木蛀干害蟲如栗山天牛(Massicus raddei)、云斑天牛(Batocera horsfieldi)、松褐天牛(Monochamus alternatus)、光肩星天牛(Anoplophora glabripennis)、銹色粒肩天牛(Apriona swainsoni)等最為有效的天敵昆蟲[1]，其幼蟲寄生在天牛末齡幼蟲和蛹上[2]。有報道指出，高溫等環(huán)境脅迫能夠顯著影響昆蟲的存活、發(fā)育和生殖[3-4]。花絨寄甲成蟲有著相對較長的壽命，人工飼養(yǎng)8 a以上，在自然環(huán)境中，由于各種不利環(huán)境因素的影響，比如氣候變化、生態(tài)環(huán)境惡化、病原微生物的入侵等，花絨寄甲的壽命往往達不到人工飼養(yǎng)條件下的壽命。……