鹿茸水溶性蛋白質(zhì)提取條件的優(yōu)化及組分1)

趙玉紅　　　　　張立鋼　　　張睿

(東北林業(yè)大學(xué)，哈爾濱，150040)　　　　(東北農(nóng)業(yè)大學(xué))　　　　(東北林業(yè)大學(xué))

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鹿茸水溶性蛋白質(zhì)提取條件的優(yōu)化及組分1)

趙玉紅張立鋼張睿

(東北林業(yè)大學(xué)，哈爾濱，150040)(東北農(nóng)業(yè)大學(xué))(東北林業(yè)大學(xué))

摘要以梅花鹿(Cervus nippon Temminck)鹿茸為原料，采用緩沖溶液提取水溶性蛋白質(zhì)，在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，利用Box-Behnken設(shè)計(jì)試驗(yàn)優(yōu)化鹿茸水溶性蛋白質(zhì)的提取條件，采用Sephadex G-100凝膠層析和SDS-PAGE電泳對提取物組分進(jìn)行分析。結(jié)果表明：鹿茸水溶性蛋白質(zhì)的最佳提取工藝條件為pH=9.18，料液比1.0 g∶60.4 mL，提取時(shí)間5.9 h，在此條件下蛋白提取量為90.84 mg·g-1。采用Sephadex G-100凝膠層析對鹿茸水溶性蛋白質(zhì)進(jìn)行分離得到3個(gè)吸收峰，經(jīng)SDS-PAGE電泳測定，其相對分子質(zhì)量分別為66 000、29 000、14 000。鹿茸水溶性蛋白質(zhì)主要為小分子蛋白質(zhì)。

關(guān)鍵詞梅花鹿；鹿茸；水溶性蛋白質(zhì)

梅花鹿鹿茸是梅花鹿(Cervus nippon Temminck)雄鹿密生茸毛的未骨化的幼角[1]。鹿茸作為哺乳動(dòng)物界唯一存在的可快速重生的組織器官[2-3]，其中含有蛋白質(zhì)、氨基酸、脂肪酸、磷脂、多糖等多種有機(jī)成分，還含有人體必需的多種常量和微量元素[1]。鹿茸蛋白占鹿茸總質(zhì)量的52%以上[4],具有調(diào)節(jié)免疫、促進(jìn)傷口愈合、改善性功能、抗疲勞、抗腫瘤、抗炎、抗氧化等多種生物學(xué)效應(yīng)[5-6]。

鹿茸水溶性成分主要包括蛋白質(zhì)、氨基酸、多糖等，其中蛋白質(zhì)和多糖是具有生物功能的活性物質(zhì)。Sui et al.[7]采用生理鹽水和pH=4.0、pH=10.0的緩沖溶液對鹿茸中蛋白質(zhì)進(jìn)行提取，用STD裂解緩沖液提取其中可溶性蛋白質(zhì)，并用胰蛋白酶進(jìn)行酶解，對產(chǎn)物采用RPLC-ESI-MS/MS進(jìn)行分析，其酸性和堿性緩沖溶液提取蛋白對人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞具有明顯增殖效果。……