李勇鵬 張力維 張佳佳 陳慧茹 曹玥華 杜麗
(南陽師范學院,南陽,47300)
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香樟CcCBFs基因的克隆及表達模式1)
李勇鵬張力維張佳佳陳慧茹曹玥華杜麗
(南陽師范學院,南陽,47300)
摘要CBF轉錄因子又稱為DREB1,在增強植物抵御非生物脅迫(低溫、干旱和鹽脅迫)方面具有重要的作用。利用同源克隆的方法結合RACE PCR技術,從香樟中獲得2個CBF類似基因的cDNA全長序列,命名為CcCBFa和CcCBFb,其cDNA序列全長分別為909和941 bp,分別包含一個714和729 bp的開放閱讀框,編碼237和242個氨基酸;gNDA序列分析結果顯示,CcCBFa和CcCBFb基因均不含有內含子。一系列生物信息學分析表明,CcCBFa和CcCBFb基因屬于DREB家族的CBF/DREB1亞家族,將所獲得香樟CBF基因cDNA全長序列提交到NCBI(登錄號:KJ958932和KJ958933)。此外,實時定量PCR結果表明,CcCBFa和CcCBFb基因在香樟不同器官中的表達量存在一定差異,并且均能被低溫、干旱、鹽以及ABA強烈誘導。這些結果表明,CcCBFa和CcCBFb可能在香樟應對低溫、干旱和鹽等非生物脅迫時發揮重要作用,并且可能與ABA信號通路有關。
關鍵詞香樟;CcCBF基因;非生物脅迫;RACE PCR;基因表達
植物由于不能像動物一樣自由移動,它們不得不應對來自生長環境一系列不利因素的傷害,這些不利因素包括生物脅迫和非生物脅迫。非生物脅迫,主要包括低溫、干旱和高鹽脅迫,是影響植物生長、發育和產量的重要因素,并且決定了植物的地理分布,其中低溫對植物的限制性影響最為深遠[1-2]。為了應對各種各樣的脅迫,植物經過漫長的進化,在形態、生理、生化和分子等方面做出了一系列適應性改變,使自身得以生存和繁殖[3]。……